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Vasorin蛋白特异单链DNA适配体的筛选与鉴定
被引量:
4
1
作者
李慧
王玮
+7 位作者
丁红梅
董洁
黄皑雪
罗昭锋
李洁
白琛俊
李少华
邵宁生
《生物技术通讯》
CAS
2018年第4期459-464,共6页
目的:筛选能特异识别vasorin(VASN)蛋白的单链DNA(ss DNA)适配体并对其进行鉴定。方法:利用SPRSELEX技术筛选VASN蛋白特异ss DNA适配体,通过基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structure软件分析富集文库序列并挑选出候选适配体序列,利用...
目的:筛选能特异识别vasorin(VASN)蛋白的单链DNA(ss DNA)适配体并对其进行鉴定。方法:利用SPRSELEX技术筛选VASN蛋白特异ss DNA适配体,通过基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structure软件分析富集文库序列并挑选出候选适配体序列,利用EMSA、ELISA、流式细胞术对候选适配体进行特异性与亲和力鉴定。结果:经过5轮SELEX筛选,获得了与VASN蛋白特异结合的ss DNA适配体富集文库,合成候选适配体,经EMSA和ELISA检测分析,证实适配体V4-2能与VASN蛋白特异结合,而不与无关对照牛血清白蛋白结合,其平衡解离常数为281.3±103.7 nmol/L;流式细胞术证实V4-2能够特异识别高表达VASN蛋白的Hep G2细胞。结论:筛选获得特异识别VASN蛋白的ss DNA适配体V4-2。
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关键词
vasorin
指数富集的配基系统进化(SELEX)
适配体
单链DNA
下载PDF
职称材料
题名
Vasorin蛋白特异单链DNA适配体的筛选与鉴定
被引量:
4
1
作者
李慧
王玮
丁红梅
董洁
黄皑雪
罗昭锋
李洁
白琛俊
李少华
邵宁生
机构
军事科
学院
军事医学研究院军事认知与脑科学研究所
中国人民武装警察部队后勤学院生物化学与分子生物学教研室
中国
科学技术大学
出处
《生物技术通讯》
CAS
2018年第4期459-464,共6页
基金
国家自然科学基金(81572846)
北京市自然科学基金(7132142)
文摘
目的:筛选能特异识别vasorin(VASN)蛋白的单链DNA(ss DNA)适配体并对其进行鉴定。方法:利用SPRSELEX技术筛选VASN蛋白特异ss DNA适配体,通过基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structure软件分析富集文库序列并挑选出候选适配体序列,利用EMSA、ELISA、流式细胞术对候选适配体进行特异性与亲和力鉴定。结果:经过5轮SELEX筛选,获得了与VASN蛋白特异结合的ss DNA适配体富集文库,合成候选适配体,经EMSA和ELISA检测分析,证实适配体V4-2能与VASN蛋白特异结合,而不与无关对照牛血清白蛋白结合,其平衡解离常数为281.3±103.7 nmol/L;流式细胞术证实V4-2能够特异识别高表达VASN蛋白的Hep G2细胞。结论:筛选获得特异识别VASN蛋白的ss DNA适配体V4-2。
关键词
vasorin
指数富集的配基系统进化(SELEX)
适配体
单链DNA
Keywords
vasorin
systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX)
single-stranded DNA(ssDNA) aptamer
分类号
Q52 [生物学—生物化学]
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Vasorin蛋白特异单链DNA适配体的筛选与鉴定
李慧
王玮
丁红梅
董洁
黄皑雪
罗昭锋
李洁
白琛俊
李少华
邵宁生
《生物技术通讯》
CAS
2018
4
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