正常组织在免疫组织化学染色对照设置中的应用

日常工作中影响免疫组织化学染色结果的因素繁多,对照组织的设置是验证免疫组织化学染色结果是否可靠的有效方法。2015年国际特设专家委员会就诊断免疫组织化学阳性对照的设计原则及应用提出了规范化的建议,并推荐18种病理诊断常用抗体对照组织及染色结果的判读标准[1]。据此本实验室优先选用表达抗原的正常组织作为常用的外部阳性对照组织,并将其分为三类:正常阑尾组织、扁桃体组织及羊膜卷组织集。

IgA-MM患者血清双M蛋白分析与实验室指标检测对骨髓移植疗效预测价值研究

目的探讨IgA型多发性骨髓瘤(IgA multiple myeloma,IgA-MM)患者血清双M蛋白分析与实验室指标检测对骨髓移植疗效预测价值。方法选择2019年1月~2022年1月于中国人民解放军中部战区总医院收治的60例出现双M条带的IgA-MM患者为研究对象,比较患者血清蛋白电泳及免疫固定电泳(immunofixation electrophoresis,IFE)图谱资料;采用2-巯基乙醇(2-dimercaptoethanol,2-DE)处理IgA-MM双M蛋白带的血清,IFE鉴定双M蛋白带;比较两种双M蛋白类型患者免疫学试验指标,包括免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)、血清游离轻链(serum free light chain,sFLC)和本周蛋白(Bene Jone protein,BJP);并且比较二种双M蛋白类型患者的常规实验指标;对两种IgA型双M蛋白血症骨髓瘤多发性骨髓瘤国际分期系统(international staging system,ISS)分期及疗效进行比较;采用Kaplan-Meier法和LOGrank检验分析两种双M蛋白类型的患者生存率。结果IFE显示,单克隆轻链型和IgA聚合体型为IgA-MM血清双M蛋白带的两种类型。单克隆轻链型患者相较于聚合体型sFLC(2970.14±876.82 mg/L vs 118.68±74.10 mg/L)及BJP(6.22±3.01 g/L vs 0.55±0.12 g/L)水平更高,差异具有统计学意义(t=21.684,12.659,均P<0.05);单克隆轻链型患者相较于聚合体型血清β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)(7.88±2.14 mg/L vs 4.65±1.56 mg/L)、血清钙(calcium,Ca)(2.64±0.24 mmol/L vs 2.32±0.20 mmol/L)、肌酐(serum creatinine,Scr)(182.85±64.23μmol/L vs 90.52±42.20μmol/L)水平升高(t=21.684,120.659,6.400,5.193,6.473),血红蛋白(hemoglobin,Hb)(74.32±19.44 g/L vs 90.75±15.52 g/L)、清蛋白(albumin,Alb)(28.42±3.64 g/L vs 31.72±4.96 g/L)水平降低(t=3.386,2.428),差异具有统计学意义(均P<0.05);与IgA聚合体型患者相比,单克隆轻链型患者ISS分期更高、疗效更低(t=11.827,4.519,均P<0.05);生存分析结果显示,IgA聚合体型相较于单克隆轻链型生存率更高(χ^(2)=4.482,P<0.05)。结论IgA型双M蛋白的两种类型在疗效和预后不尽相同,故鉴定IgA-MM双M蛋白带类型尤为重要。

组蛋白去甲基化酶KDM5C在疾病中的功能研究

赖氨酸去甲基化酶5C(lysine demethylase 5C,KDM5C)可以催化组蛋白H3上第4位赖氨酸残基二甲基和三甲基(histone H3 lysine 4 di-/trimethylation,H3K4me2/3)去甲基化为H3K4me1。KDM5C主要在人的大脑和骨骼肌中表达,其编码的蛋白质参与各种生物学效应。KDM5C与X连锁智力迟钝有关,在神经系统疾病中发挥重要作用;KDM5C在肿瘤中是一把双刃剑,具有促癌和抑癌的特性。KDM5C在前列腺癌、卵巢癌、结肠癌、膀胱癌、肝细胞癌、食管癌、鼻咽癌、胃癌、肺癌和弥漫性大B细胞淋巴瘤中过表达并促进肿瘤生长,在肝内胆管癌、子宫颈癌、套细胞淋巴瘤和甲状腺乳头状癌中低表达,在肾透明细胞癌和前体B细胞急性淋巴细胞白血病中易失活突变,并与不良预后相关,在乳腺癌中发挥双重作用。本文就KDM5C在疾病中的功能研究做一简述。

流式细胞术监测血小板活化指导颅内支架介入术后病人抗血小板治疗的价值

目的探讨流式细胞术监测血小板活化指导颅内支架介入治疗术后病人抗血小板治疗的价值。方法选择2013年1月至2016年4月支架介入治疗术后病人1 792例,采集空腹静脉血,用20μmol/L ADP激活5 min,应用流式细胞仪监测CD62P阳性率,范围控制在20.0%~50.0%。所有病人随访1年。结果 1792例中,无不良事件1691例,出血96例,再梗死5例。无不良事件组ADP激活后CD62P阳性率[(42.34±19.35)%]显著低于再梗死组[(83.64±6.41)%;P<0.05],但是明显高于出血组[(11.32±3.96)%;P<0.05]。ADP激活后CD62P阳性率<20.0%有247例,20.0%~50.0%有1195例,>50.0%有345例。<20.0%组出血发生率明显增高(P<0.05),>50.0%组再梗死发生率明显增高(P<0.05)。20.0%~50.0%组不良事件发生率最低(P<0.05)。结论应用20μmol/L的ADP激活血小板5 min,采用流式细胞仪监测CD62P阳性率,可精准指导颅内支架介入治疗术后病人抗血小板治疗,其安全有效范围为20.0%~50.0%。

糖尿病自身抗体联合检测在糖尿病分型中的价值分析

针对糖尿病分型采用糖尿病自身抗体联合检测方式的临床价值进行分析。方法 时间2020年1月-2022年1月为研究区间,病例取自本院收治糖尿病患者,其中I型糖尿病患者50例,定义为A组,II型糖尿病患者50例定义为B组,选择健康体检人员定义为C组,组间比对三组研究对象的诊断价值体现为何。结果 诊断后,对比三组各项指标检测,差异显著,数据表述为P<0.05。结论 针对I型糖尿病、II型糖尿病正确鉴别采用自身抗体联合检测,可提高诊断阳性率数值,防止漏诊,经研究结果证实可做临床推广。

280例呼吸道感染儿童呼吸道病毒病原学检出情况及流行规律分析

目的:了解呼吸道感染儿童呼吸道病毒病原学检出情况及其流行规律,为儿童呼吸道感染的预防、诊断及治疗提供病原学依据。方法:选取2016年1月-2017年12月期间中国人民解放军中部战区总医院收治的280例呼吸道感染患儿为研究对象,分析患儿呼吸道分泌物中呼吸道病毒的检出情况,并分析呼吸道感染儿童呼吸道病毒感染与年龄、季节、疾病类型的关系。结果:280例呼吸道感染患儿中共检出98份阳性标本,阳性率为35.00%,其中有2份标本中检出2种病毒感染,混合感染阳性率为0.71%;在所有病毒类型中,呼吸道合胞病毒(RSV)病毒感染阳性率最高。<1岁患儿的病毒感染阳性率最高,与其他年龄段病毒感染阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。呼吸道感染患儿春季、冬季的病毒感染阳性率明显高于夏季、秋季(P<0.05)。不同呼吸道感染疾病类型患儿病毒感染阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),以喘息性肺炎、毛细支气管炎、肺炎患儿病毒感染阳性率较高。结论:RSV是呼吸道感染儿童呼吸道病毒感染的主要致病病原体,<1岁的婴幼儿较易感染,春季、冬季为其高发季节,且以肺炎、毛细支气管炎、喘息性肺炎患儿的病毒感染阳性率较高。

靶向胶质瘤的敲除程序死亡受体-1基因表皮生长因子突变受体Ⅲ嵌合抗原受体T细胞的构建和功能鉴定

目的构建敲除程序死亡受体-1(PD-1)基因的靶向表皮生长因子突变受体Ⅲ(EGFRvⅢ)阳性胶质瘤细胞的嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞,评估其在体外和体内对EGFRvⅢ阳性胶质瘤细胞的杀伤作用.方法运用电转染技术构建靶向EGFRvⅢ抗原的CAR-T细胞,并用基因打靶技术(CRISPR/Cas9)敲除其PD-1基因,获得PD-1ko EGFRvⅢCAR-T细胞;流式细胞术、聚合酶链反应(PCR)和酶切法验证PD-1 ko EGFRvⅢCAR-T细胞是否构建成功;流式细胞术及乳酸脱氢酶细胞毒性试剂盒检测PD-1ko EGFRvⅢCAR-T细胞对胶质瘤细胞的杀伤作用.选取15只6~8周龄雌性BALB/c-nude小鼠,构建肿瘤模型,随机分为PD-1ko EGFRvⅢCAR-T细胞组、T细胞组、磷酸盐缓冲液(PBS)组.各组在第28、32和36天分别注入100μl 5×106个PD-1ko CAR-T细胞、T细胞、100 μl PBS.应用SPSS 18.0软件进行统计,计量资料采用均数±标准差表示,两组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 PCR及酶切实验显示PD-1ko EGFRvⅢCAR-T细胞PD-1出现了不同条带,验证基因敲除成功.体外实验中,PD-1ko EGFRvⅢCAR-T细胞分泌的细胞因子浓度[白细胞介素(IL)-2:(242.08±19.08) ng/L,干扰素(IFN)-γ:(8 374.8 ±265.82) ng/L]均显著高于T细胞组[IL-2:(153.73±13.23) ng/L,IFN-γ:(2 118.96±29.62) ng/L],差异有统计学意义(IL-2:t=6.589,P< 0.05;IFN-γ:t=33.076,P< 0.05).细胞毒性实验结果显示PD-1 koEGFRvⅢCAR-T组对胶质瘤细胞杀伤作用显著高于T细胞组及PBS组,且效靶比越高杀伤作用越强.移植瘤裸鼠注射细胞后,PD-1ko EGFRvⅢCAR-T组瘤体体积为(1.06±0.26) cm3,显著小于T细胞的(5.14±1.57) cm3和PBS对照组组瘤体体积为(5.04 ±0.61) cm3,3组比较差异均有统计学意义(F=22.290,P<0.05).结论 PD-1 ko EGFRvⅢCAR-T细胞具有良好的抑瘤效果.