TIMP1在胃癌中的表达及作用机制的多数据库分析和实验研究

目的:探讨TIMP1在胃癌中的表达及作用机制。方法:应用Oncomine、GEPIA数据库分析TIMPs家族成员在胃癌及正常组织中的差异性表达,选择TIMP1为研究对象。GEPIA进一步分析TIMP1与胃癌病理分期相关性,Kaplan-Meier绘图仪分析TIMP1表达水平与胃癌患者生存预后的关系。应用CRISP/Cas9技术敲除TIMP1基因,CCK-8实验法检测细胞增殖情况,RT-PCR检测胃癌细胞AGS组与TIMP1基因敲除组的抗凋亡基因Bcl-2及促凋亡基因c-Myc的mRNA表达水平。应用DAVID数据库进行GO和KEGG分析。结果:Oncomine、GEPIA数据库分析发现胃癌组织中TIMP1表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.01);TIMP1表达量与胃癌病理分期呈负相关;Kaplan-Meier绘图仪分析显示TIMP1高水平表达的胃癌患者较低水平表达胃癌患者生存预后更差。TIMP1基因敲除后,胃癌细胞增殖明显减少,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平下降,促凋亡基因c-Myc mRNA表达水平上升。GO分析结果显示,TIMP1主要富集在细胞粘附分子结合、细胞外基质及细胞外结构组织等基因功能上;KEGG分析发现,TIMP1主要涉及粘着斑、癌症中的蛋白多糖等信号通路。结论:TIMP1在胃癌中呈高水平表达,与胃癌的病理分期、生存预后相关;敲除基因后,肿瘤细胞增殖减少,有望成为新的胃癌治疗靶点。