目的观察动力相关蛋白1(Drp1)在高糖/高脂(high glucose and high fat,HGHF)培养的心肌细胞(H9C2)中的表达及其在HGHF诱导的心肌细胞凋亡中的作用。方法 H9C2细胞培养分为4组:正常+空白腺病毒组(con+Ad-EV)、正常+Drp1过表达腺病毒组(co...目的观察动力相关蛋白1(Drp1)在高糖/高脂(high glucose and high fat,HGHF)培养的心肌细胞(H9C2)中的表达及其在HGHF诱导的心肌细胞凋亡中的作用。方法 H9C2细胞培养分为4组:正常+空白腺病毒组(con+Ad-EV)、正常+Drp1过表达腺病毒组(con+Ad-Drp1)、高糖/高脂+Ad-EV组(HGHF+Ad-EV)、高糖/高脂+Ad-Drp1组(HGHF+AdDrp1)。分别用qRT-PCR及Western blot检测Drp1在各组细胞中的mRNA水平及蛋白水平表达;用流式细胞术(FCM)分析各组心肌细胞的凋亡;用荧光探针DCFH-DA检测各组心肌细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与正常+空白腺病毒组相比,高糖/高脂+Ad-EV组Drp1的mRNA水平显著降低(P<0.01),Drp1的蛋白表达水平也明显减少;正常+Drp1过表达腺病毒(Ad-Drp1)组的心肌细胞凋亡数量降低,ROS的水平显著减少(P<0.05);与正常+空白腺病毒组相比,高糖/高脂+Ad-EV中Drp1表达减少,心肌细胞凋亡数量增加和ROS的水平升高(P<0.01),相对于高糖/高脂+Ad-EV组,高糖/高脂+Ad-Drp1组中心肌细胞凋亡数量和ROS水平明显减少(P<0.01)。结论在高糖/高脂环境下,Drp1表达对H9C2心肌细胞凋亡及ROS生成具有抑制作用,从而保护心肌。展开更多
文摘目的观察动力相关蛋白1(Drp1)在高糖/高脂(high glucose and high fat,HGHF)培养的心肌细胞(H9C2)中的表达及其在HGHF诱导的心肌细胞凋亡中的作用。方法 H9C2细胞培养分为4组:正常+空白腺病毒组(con+Ad-EV)、正常+Drp1过表达腺病毒组(con+Ad-Drp1)、高糖/高脂+Ad-EV组(HGHF+Ad-EV)、高糖/高脂+Ad-Drp1组(HGHF+AdDrp1)。分别用qRT-PCR及Western blot检测Drp1在各组细胞中的mRNA水平及蛋白水平表达;用流式细胞术(FCM)分析各组心肌细胞的凋亡;用荧光探针DCFH-DA检测各组心肌细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与正常+空白腺病毒组相比,高糖/高脂+Ad-EV组Drp1的mRNA水平显著降低(P<0.01),Drp1的蛋白表达水平也明显减少;正常+Drp1过表达腺病毒(Ad-Drp1)组的心肌细胞凋亡数量降低,ROS的水平显著减少(P<0.05);与正常+空白腺病毒组相比,高糖/高脂+Ad-EV中Drp1表达减少,心肌细胞凋亡数量增加和ROS的水平升高(P<0.01),相对于高糖/高脂+Ad-EV组,高糖/高脂+Ad-Drp1组中心肌细胞凋亡数量和ROS水平明显减少(P<0.01)。结论在高糖/高脂环境下,Drp1表达对H9C2心肌细胞凋亡及ROS生成具有抑制作用,从而保护心肌。
