CpG-ODN减轻放射性肺纤维化的作用及机理

使用单次全肺照射至吸收剂量15 Gy的C57BL/6雌性小鼠建立放射性肺纤维化模型,连续20周观察照射小鼠的基本情况和大体肺组织变化,制作肺组织Masson染色切片,并进行Ashcroft纤维化评分和纤维化面积定量,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞因子TGF-β1的表达水平,免疫组化法检测肺组织内TGF-β1、TβR、磷酸化Smad 2/3和Smad 7蛋白的表达。实验结果显示,照射后给予CpG-ODN处理,能使小鼠肺组织损伤及纤维化程度减轻,Ashcroft评级降低2分,纤维化面积减少约11%,促纤维化细胞因子TGF-β1表达水平下降近1/2,肺组织内的TGF-β1、TβR和磷酸化Smad 2/3蛋白的表达皆出现不同程度降低,Smad 7蛋白的表达升高。这些结果提示CpG-ODN能通过降低促纤维化细胞因子TGF-β1的表达水平抑制TGF-β1/Smad依赖性纤维化信号通路,从而减轻放射性肺纤维。

CpG-ODN调节Th1/Th2型细胞因子表达抑制放射性肺纤维化

从Th细胞因子平衡的角度着手,探讨CpG-ODN在防治放射性肺纤维化中的作用机理。使用单次全肺照射15 Gy的雌性C57BL/6小鼠建立放射性肺损伤模型,通过酶联免疫吸附测定法连续20周检测小鼠体内Th1/Th2相关细胞因子和促纤维化细胞因子的表达水平,免疫组化法评估肺泡巨噬细胞、肺组织纤维化和丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族主要蛋白的磷酸化水平。实验结果显示,CpG-ODN能促进Th1型细胞因子分泌,同时抑制Th2型细胞因子分泌,导致Th1型免疫反应占主导优势,从而抑制肺泡巨噬细胞的聚集活化,降低促纤维化细胞因子TGF-β1、IGF-1的表达,下调MAPK通路的活化。这提示CpG-ODN能通过调节电离辐射后Th1/Th2型细胞因子的失衡而抑制放射性肺纤维化的发生。