MicroRNA-20a通过调节CKIP-1促进小鼠C3H/10T1/2成骨分化

目的:研究microRNA-20a(miR-20a)对小鼠C3H/10T1/2细胞成骨分化作用的影响及其调控机制。方法:对贴壁培养的小鼠C3H/10T1/2细胞成骨诱导不同时间,ALP染色及应用qRT-PCR验证其诱导结果,同时观察MiR-20a在诱导过程中表达变化;细胞转染MiR-20a mimics,CKIP-1 siRNA,在荧光显微镜下观察转染效果,应用qRT-PCR测定过表达及干扰效率;qRT-PCR检测过表达MiR-20a及干扰CKIP-1对细胞成骨分化的影响及过表达MiR-20a对CKIP-1基因表达的影响。结果:成骨标记基因ALP、OSX、OCN、BSP随小鼠C3H/10T1/2细胞诱导过程逐渐升高,且成骨诱导分化过程中MiR-20a表达上调。过表达MiR-20a促进C3H/10T1/2细胞成骨分化,成骨标记基因碱性磷酸酶(ALP)、RUNX2、OSX、0CN、BSP显著高于对照组,并且抑制CKIP-1的表达;干扰CKIP-1能促进细胞成骨标记基因表达。结论:MiR-20a可能通过下调骨形成负调节因子CKIP-1的表达促进C3H/10T1/2细胞成骨分化。

纳米银溶胶的体外细胞毒性评价及其机制研究

目的对纳米银溶胶的体外细胞毒性进行评价，初步探讨纳米银对细胞的毒性作用机制。方法利用化学还原法制备纳米银溶胶，通过紫外一可见分光光度计和透射电镜对其物理特性进行检测；以小鼠纤维肉瘤细胞（L929）为研究对象，通过细胞形态观察、LIVE／DEAD染色分析和MTT检测来评价纳米银对细胞的毒性作用；在电子显微镜下观察纳米银在细胞中的分布，探讨纳米银对细胞的毒性作用机制。结果当纳米银质量浓度大于10mg／L时会对L929细胞产生明显的细胞毒性，细胞形态发生明显变化，细胞增殖受到抑制。纳米银可以通过胞吞作用进入细胞，与细胞内的多种细胞器相互作用而造成细胞损伤。结论纳米银会对哺乳动物细胞的形态和存活产生影响且具有浓度依赖性，因此在纳米银的应用过程中要考虑其毒副作用。