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人工模拟加卤酶Ⅰ.半抗原合成,表征和生物活性测定 被引量:9
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作者 祁超 丁兰 +5 位作者 刘立岩 耿昊 张玉静 赵大庆 刘仔 倪嘉缵 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期533-535,共3页
rac-Tetra(m-nitrobenzene)porphyrin, H2TNO2PP, synthesized from o-nitro-benzaldehyde and pyrrole was reduced to H2TamPP, from which tetra(o-phenylacetyl benzene) porphyrin and especially its α,α,α,α-isomer were... rac-Tetra(m-nitrobenzene)porphyrin, H2TNO2PP, synthesized from o-nitro-benzaldehyde and pyrrole was reduced to H2TamPP, from which tetra(o-phenylacetyl benzene) porphyrin and especially its α,α,α,α-isomer were obtained. The α,α,α,α-isomer was used as hapten to immunize BALB/C mice. The latter gave antibody value of 320 as determined by ELISA method, indicating that the artificial hapten could induce the production of antibody without use of carrier. 展开更多
关键词 加卤酶 半抗原 卟啉衍生物 生物活性 合成
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鸡下丘脑cDNA文库的构建及部分克隆ESTs序列初步分析 被引量:7
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作者 赵志辉 李宁 +2 位作者 刘兆良 张玉静 吴常信 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期301-305,共5页
以鸡下丘脑为实验材料,以λgt10为载体,构建了鸡下丘脑cDNA文库。结果表明,文库的滴度为3.8×106,重组率为80%,插入片段大小集中在1.0~3.0kb之间。从cDNA文库中随机挑取10个克隆,并对其ES... 以鸡下丘脑为实验材料,以λgt10为载体,构建了鸡下丘脑cDNA文库。结果表明,文库的滴度为3.8×106,重组率为80%,插入片段大小集中在1.0~3.0kb之间。从cDNA文库中随机挑取10个克隆,并对其ESTs进行了测定和初步分析。经BLASTn和FASTA3分析后发现,4个ESTs在鸡中已有同源序列,4个在人或其他物种中也可以找到同源序列,有两个为未知功能基因。所测10个ESTs序列均已录入GenBank。 展开更多
关键词 下丘脑 CDNA文库 表达序列标签 功能基因
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稀土离子诱导钙调蛋白构象变化后的单克隆抗体制备 被引量:5
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作者 李伟国 赵大庆 +2 位作者 祁超 杜丽 刘仔 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期526-529,共4页
采用单克隆抗体技术研究了三价稀土离子与钙调蛋白作用后对其与靶分子识别能力的影响。牛脑钙调蛋白经2.4-二硝基氟苯修饰后再结合三价的铕离子,然后免疫Balb/c 小鼠,经过3次免疫后在小鼠血清中检测到相应的抗体,抗体效价为1... 采用单克隆抗体技术研究了三价稀土离子与钙调蛋白作用后对其与靶分子识别能力的影响。牛脑钙调蛋白经2.4-二硝基氟苯修饰后再结合三价的铕离子,然后免疫Balb/c 小鼠,经过3次免疫后在小鼠血清中检测到相应的抗体,抗体效价为1:12 000;用杂交瘤细胞技术制备出一株抗钙调蛋白的单克隆抗体细胞株2C3;酶联免疫吸附法(ELISA)测定结果证实钙调蛋白结合稀土离子前后对该抗体的识别能力存在显著差异,表明该抗体可以用于进一步研究金属离子对钙调蛋白构象变化及其对靶分子识别的影响. 展开更多
关键词 钙调蛋白 稀土离子 单克隆抗体 构象 分子识别 三级结构 免疫化学 制备
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圆二色谱和紫外可见光谱研究抗体-卟啉的相互作用 被引量:3
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作者 祁超 李伟国 +2 位作者 张玉静 刘立岩 赵大庆 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期601-604,共4页
圆二色谱 (CD)和紫外可见光谱 (UV VIS)可用来研究单克隆抗体 (McAb) 卟啉之间的相互作用。卟啉形成McAb 卟啉复合物 ,在Soret带区域最大吸收峰有显著红移和增色现象。在 3 5 0~ 45 0nm区域 ,形成复合物时能检测诱导的CD光谱。CD光谱... 圆二色谱 (CD)和紫外可见光谱 (UV VIS)可用来研究单克隆抗体 (McAb) 卟啉之间的相互作用。卟啉形成McAb 卟啉复合物 ,在Soret带区域最大吸收峰有显著红移和增色现象。在 3 5 0~ 45 0nm区域 ,形成复合物时能检测诱导的CD光谱。CD光谱遵守朗伯 比尔定律 ,显示等吸收行为。McAb 卟啉复合物的紫外可见吸收及诱导的CD光谱在pH 6~ 1 1的范围内保持不变 ,说明复合物异常稳定 ,也说明McAb 卟啉结合位点之间疏水相互作用是主要因素。 展开更多
关键词 圆二色谱 紫外可见光谱 相互作用 单克隆抗体 meso-四(α α α-O-苯乙酰苯)卟啉
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人工模拟加卤酶II.酶学性质 被引量:3
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作者 祁超 丁兰 +2 位作者 张玉静 刘仔 赵大庆 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期560-562,共3页
The meso-tetra(α,α,α,α-O-phenylacetylbenzene)porphyrin was used as a complete antigen to elicit monoclonal antibody 1F2 through the immunization and cell fusion techniques. The antibody could combine with Mn porph... The meso-tetra(α,α,α,α-O-phenylacetylbenzene)porphyrin was used as a complete antigen to elicit monoclonal antibody 1F2 through the immunization and cell fusion techniques. The antibody could combine with Mn porphyrin and showed a haloperoxidase activity. The affinities of the antibody for antigen and Mn porphyrin were 4 98×10 -5 mol/L and 7 63×10 -5 mol/L, respectively. When the antibody-Mn porphyrin complex was used to catalyze the halogenation reaction, the Michaelis constant and reactive rate constant κ cat for H 2O 2 were 5 127 0×10 -3 mol/L and 0 483 4 s -1, respectively. The enzyme exchange number κ cat/K m=94 285 1 mol/(L·s). 展开更多
关键词 全抗原 加卤酶 meso-四(α α α α-O-苯乙酰苯)卟啉 酶学性质 抗体酶 人工模拟酶
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稀土离子对钙调蛋白与单克隆抗体分子识别的影响
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作者 李伟国 祁超 +2 位作者 杜丽 刘立岩 赵大庆 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期1346-1350,共5页
分别采用酶联免疫吸附 (ELISA)法和荧光标记技术比较了 Ca2 +,La3 +,Eu3 +和 Yb3 +离子对钙调蛋白与单克隆抗体 2 C3之间分子识别的影响 .结果表明 ,金属离子与钙调蛋白作用后会诱导其发生不同的构象变化 ,并进一步影响到钙调蛋白与单... 分别采用酶联免疫吸附 (ELISA)法和荧光标记技术比较了 Ca2 +,La3 +,Eu3 +和 Yb3 +离子对钙调蛋白与单克隆抗体 2 C3之间分子识别的影响 .结果表明 ,金属离子与钙调蛋白作用后会诱导其发生不同的构象变化 ,并进一步影响到钙调蛋白与单克隆抗体 2 C3分子之间的结合强度 .当钙调蛋白分别与 La3 +,Eu3 +,Yb3 +作用后 ,它与单抗 2 C3分子之间的解离常数为 (2 6 .8± 2 .5 ) ,(2 1 .8± 3.4 )和 (6 4 .8± 5 .1 ) nmol/ L,而结合 Ca2 +前后的钙调蛋白与单抗分子的解离常数分别为 (1 77.2± 2 .8)和 (1 5 7± 4 .2 ) nmol/ L.这一结果表明 ,稀土离子诱导钙调蛋白发生的构象变化明显不同于钙离子的作用 ,这种差异可能是稀土与钙离子对钙调蛋白调控作用表现出差别的原因 . 展开更多
关键词 稀土离子 钙调蛋白 单克隆抗体 分子识别 分子量 抗原 酶联免疫吸附 荧光滴定法
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正常及肿瘤染色质的荧光寿命法、精确量热法和荧光能量转换
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作者 祁超 赵剑非 +2 位作者 李伟国 杜丽 刘立岩 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1135-1138,共4页
通过DNA染色剂 染色质配合过程的荧光寿命、精确量热和荧光能量转换的测定 ,研究了正常染色质 (NC)和肿瘤染色质 (TC)的结构。结果表明 ,NC中溴化乙锭插入DNA的成分比TC增加了 4 86 % ;溴化乙锭与TC中DNA的配合焓为 - 15 38kJ/mol,NC... 通过DNA染色剂 染色质配合过程的荧光寿命、精确量热和荧光能量转换的测定 ,研究了正常染色质 (NC)和肿瘤染色质 (TC)的结构。结果表明 ,NC中溴化乙锭插入DNA的成分比TC增加了 4 86 % ;溴化乙锭与TC中DNA的配合焓为 - 15 38kJ/mol,NC中DNA的配合焓为 - 13 2 5kJ/mol;TC中丹磺酰氯和吖啶橙之间的荧光能量转换效率比NC中的低 ,而平均供体 受体距离比NC的大 ,说明TC刚性结构较少、与溴化乙锭结合的可能性较大及基因活性较强。 展开更多
关键词 量热学 染色质 能量转换 荧光寿命
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单克隆抗体1F2的制备、纯化及质谱测定
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作者 祁超 孙淑清 +5 位作者 杜丽 丁兰 张玉静 刘仔 赵大庆 倪嘉缵 《化学研究》 CAS 2001年第2期1-3,共3页
用小分子meso -四 (α,α ,α ,α -O -苯乙酰苯 )卟啉免疫Balb/c小鼠 ,用单克隆抗体技术得到细胞株 1F2和单抗 1F2 ,这是对传统免疫理论的一个突破 .利用高效液相色谱和基质辅助激光解吸质谱 (matrixassistedlaserdesorptionionization... 用小分子meso -四 (α,α ,α ,α -O -苯乙酰苯 )卟啉免疫Balb/c小鼠 ,用单克隆抗体技术得到细胞株 1F2和单抗 1F2 ,这是对传统免疫理论的一个突破 .利用高效液相色谱和基质辅助激光解吸质谱 (matrixassistedlaserdesorptionionizationtime_of_flightmassspectography ;缩写为MALDI/TOFMS)证明了纯化得到单抗体 1F2的纯度很好 ,同时得到的单抗 1F2的相对分子量为 15 6 6 78.8Da . 展开更多
关键词 单克隆抗体 全抗原 meso-四(α α α α-O-苯乙酰苯)卟啉 基质辅助激光解吸质谱 制备 纯化 分子量测定
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催化抗体的催化效率优化和展望
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作者 祁超 张玉静 赵大庆 《化学研究》 CAS 2001年第4期47-54,共8页
综述了改进催化抗体催化效率的可能方法 ,包括较好的半抗原、广泛的筛选。
关键词 催化抗体 催化效率 优化方法 催化活动 选择性 半抗原
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