miR⁃492表达下调促进CD44介导的恶性胶质瘤细胞迁移

目的:探讨miR⁃492对恶性胶质瘤细胞迁移的影响及分子机制。方法:利用miRNA芯片检测恶性胶质瘤组织中miRNAs的表达谱,real time RT⁃PCR验证miR⁃492在恶性胶质瘤组织中的表达;用miR⁃492 mimics转染人恶性胶质瘤细胞系U87细胞,Transwell试验检测U87细胞迁移能力;利用生物信息学方法筛选miR⁃492的下游靶基因并在U87细胞中验证;Western Blot检测恶性胶质瘤中白细胞分化抗原44(CD44)蛋白的表达,并用皮尔逊相关系数分析恶性胶质瘤组织中miR⁃492和CD44的表达的相关性。结果:与癌旁组织相比,恶性胶质瘤组织中miR⁃492表达下调。miR⁃492 mimics转染可抑制U87细胞转移,同时降低CD44的表达;恶性胶质瘤组织中miR⁃492和CD44的表达呈负相关。结论:我们鉴定了miR⁃492及其靶分子CD44作为对恶性胶质瘤转移有重要作用的调节因子。miR⁃492有望成为恶性胶质瘤的一个有前途的新治疗靶点和生物标志物。

miR-181a在慢性阻塞性肺疾病患者血清中的表达及其与炎症因子和肺功能的关系

目的探讨微小RNA-181a(miR-181a)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清中的表达及其与炎症因子和肺功能的关系。方法选取2018年12月到2019年8月期间在我院接受治疗的COPD患者116例,其中稳定期74例作为稳定期组,急性加重期42例作为急性加重组。另选取同期在我院进行体检的健康志愿者40例作为对照组。检测所有研究对象的血清miR-181a、白介素-1β(IL-1β)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)以及第1秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)。分析COPD患者血清miR-181a与炎症因子及肺功能的关系,分析COPD患者血清miR-181a表达水平的影响因素。结果稳定期组和急性加重组的吸烟率明显高于对照组(P<0.05);急性加重组的血清miR-181a以及FEV1/FVC、FEV1%低于稳定期组和对照组,血清IL-1β、hs-CRP高于稳定期组和对照组(P<0.05);稳定期组的血清miR-181a以及FEV1/FVC、FEV1%低于对照组,血清IL-1β、hs-CRP高于对照组(P<0.05);Pearson分析显示,COPD患者血清miR-181a与IL-1β、hs-CRP呈负相关,与FEV1/FVC、FEV1%呈正相关(P<0.05);吸烟及IL-1β、hs-CRP高表达均是COPD患者血清miR-181a水平的负向影响因素(P<0.05,OR<1)。结论miR-181a在COPD患者血清中呈低表达,且表达水平与炎症因子和肺功能存在相关性,吸烟、IL-1β、hs-CRP均是COPD患者血清miR-181a表达的影响因素。

2种重叠延伸PCR技术构建5种立克次体融合基因的方法学比较

目的采用2种重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将5种立克次体目的基因片段进行融合,同时对2种方法进行比较。方法采用一步法及两步法融合基因技术,对5种立克次体融合基因进行构建,并优化一步法中重叠引物浓度以及两步法中各靶基因产物加入量,以提高2种方法的融合效率。结果成功建立5种立克次体融合基因。一步法基因融合过程中重叠引物浓度在0.1~0.01μmol/L时,912 bp的融合基因条带亮度较高,且杂带较少;两步法基因融合过程中各靶基因产物加入量为0.1~0.25μL时,912 bp的融合基因条带亮度较高,且杂带较少。结论一步法基因融合技术操作简单、耗时短且耗材少,在掌控好退火时的温度及时间的情况下是一种经济、方便且高效的融合技术。为后续进行立克次体融合基因表达载体构建以及立克次体分子生物学多重检测提供实验模板。

全国血流感染细菌耐药监测(BRICS)2021年度报告

目的通过血流感染病原菌谱及其耐药性的监测,为临床血流感染治疗和合理用药提供参考。方法收集全国血流感染细菌耐药监测联盟(BRICS)成员单位2021年1至12月所有分离自血培养的病原菌,按美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)推荐的稀释法进行抗菌药物敏感性测定。采用WHONET 5.6进行分析统计。结果共收集51家成员单位11013株病原菌,其中革兰阳性菌为2782株(25.3%),革兰阴性菌8231株(74.7%)。前10位病原菌为大肠埃希菌4141株(37.6%)、肺炎克雷伯菌2076株(18.9%)、金黄色葡萄球菌1078株(9.8%)、凝固酶阴性葡萄球菌697株(6.3%)、铜绿假单胞菌401株(3.6%)、屎肠球菌397株(3.6%)、鲍曼不动杆菌308株(2.8%)、粪肠球菌296株(2.7%)、阴沟肠杆菌276株(2.5%)和其他克雷伯菌属233株(2.1%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌流行率分别为25.3%和76.8%,未检测到对糖肽类和达托霉素耐药葡萄球菌属;金黄色葡萄球菌对头孢比罗的敏感率>95.0%。未检测到耐万古霉素肠球菌。产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌分别为49.6%、25.5%和39.0%;耐碳青霉烯类大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌分别为2.2%和15.8%;7.9%耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦耐药。头孢比罗对超广谱β-内酰胺酶阴性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌具有较强的抗菌活性。耐碳青霉烯类大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氨曲南/阿维巴坦敏感性较高。鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药率为60.0%,对多黏菌素B和替加环素耐药率低,分别为5.5%和4.5%;铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率为18.9%。结论我国血流感染病原体以革兰阴性菌为主,且大肠埃希菌占1/3;MRSA的流行率呈进一步下降趋势,耐万古霉素肠球菌仍然处于较低水平;耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌仍呈较高水平流行,但已有下降趋势,耐碳青霉烯类大肠埃希菌处于较低水平流行。

2020年全国血流感染细菌耐药监测(BRICS)报告

目的监测血流感染病原菌分布及其耐药性,为耐药控制提供依据。方法收集全国血流感染细菌耐药监测联盟(BRICS)成员单位2020年1至12月所有按方案分离自血培养的病原菌,按美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)推荐的稀释法进行抗菌药物敏感性测定。采用WHONET5.6软件进行统计分析。结果共收集54家成员单位10043株病原菌,其中革兰阳性菌为2664株(26.5%),革兰阴性菌7379株(73.5%)。前10位病原菌为大肠埃希菌3878株(38.6%)、肺炎克雷伯菌1846株(18.4%)、金黄色葡萄球菌990株(9.9%)、凝固酶阴性葡萄球菌751株(7.5%)、铜绿假单胞菌393株(3.9%)、屎肠球菌327株(3.3%)、阴沟肠杆菌281株(2.8%)、粪肠球菌262株(2.6%)、鲍曼不动杆菌241株(2.4%)和其他克雷伯菌属177株(1.8%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌检出率分别为27.6%和74.4%,未检测到对糖肽类和达托霉素耐药葡萄球菌属;金黄色葡萄球菌对利福平和复方磺胺甲噁唑的敏感率均在95%以上。未检测到耐万古霉素肠球菌。产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs+)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌分别为48.4%、23.6%和36.1%;耐碳青霉烯类大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌分别为2.3%和16.1%;9.6%耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦耐药。鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药率为60.0%,对多黏菌素B和替加环素耐药率低;铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率为23.2%。结论我国血流感染病原菌以革兰阴性菌为主,且呈缓慢上升趋势;大肠埃希菌为最常见的病原菌,ESBLs+大肠埃希菌逐年下降,而耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌仍呈高水平流行状态,耐碳青霉烯类大肠埃希菌处于较低水平流行;铜绿假单胞菌引起的血流感染所占比例呈增加态势。MRSA的流行率进一步下降,耐万古霉素肠球菌仍然处于低水平。

2018至2019年度全国血流感染细菌耐药监测报告

目的通过研究血流感染的病原菌分布及对其耐药性监测,准确掌握我国细菌耐药状况。方法收集全国血流感染细菌耐药监测联盟成员单位2018年1月至2019年12月所有按操作规程分离自血培养的感染病原菌,按美国临床和实验室标准化研究所推荐的琼脂稀释法或肉汤稀释法进行抗菌药物药敏性测定。采用WHONET5.6进行统计分析。结果2018年1月至2019年12月共收集50家成员单位14778株病原菌,其中革兰阳性菌为4117株(27.9%),革兰阴性菌10661株(72.1%)。最常见的前10位病原菌为大肠埃希菌5500株(37.2%)、肺炎克雷伯菌2519株(17.0%)、金黄色葡萄球菌1438株(9.7%)、凝固酶阴性葡萄球菌1285株(8.7%)、铜绿假单胞菌546株(3.7%)、屎肠球菌504株(3.4%)、鲍曼不动杆菌501株(3.4%)、阴沟肠杆菌424株(2.9%)、其他链球菌属414株(2.8%)和粪肠球菌344株(2.3%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌检出率分别为27.4%(394/1438)和70.4%(905/1285),未检测到对糖肽类耐药的葡萄球菌;金黄色葡萄球菌对阿米卡星、利福平和复方磺胺甲噁唑的敏感率均在95%以上。屎肠球菌对万古霉素的耐药率为0.4%(2/504),未检测到耐万古霉素的粪肠球菌。产超广谱β-内酰胺酶非耐碳青霉烯类大肠埃希菌、碳青霉烯敏感肺炎克雷伯菌、变形杆菌属分别为50.4%(2731/5415)、24.6%(493/2001)、35.2%(31/88);耐碳青霉烯类大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌分别为1.5%(85/5500)、20.6%(518/2519);碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦的耐药率为8.3%(27/325)。鲍曼不动杆菌对多黏菌素B和替加环素的耐药率分别为2.8%(14/501)和3.4%(17/501);铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率为18.9%(103/546)。结论我国血流感染病原体以革兰阴性菌为主,大肠埃希菌为最常见的病原菌,产超广谱β-内酰胺酶为主要耐药现象;MRSA的检出率显著降低;耐碳青霉烯大肠埃希菌处于较低水平,耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌仍呈上升趋势。