缓冲液种类对毛细管区带电泳分离蛋白质的影响

目的 寻找可同时分离酸性和碱性蛋白的合适缓冲液。方法 以马心肌红蛋白、β -乳球蛋白A、碳酸酐酶II和核糖核酸酶A为标准混合样品 ,详细研究了四种缓冲液 ,磷酸盐、硼酸盐、Tricine和Tris对毛细管区带电泳分离蛋白质的影响。结果 磷酸盐缓冲液与毛细管壁和蛋白均可发生作用 ,能改变碱性蛋白质的迁移规律 ;而硼砂缓冲液主要是通过与毛细管壁作用抑制蛋白的吸附 ,不改变蛋白质的迁移规律 ;Tris和Tricine不能有效地抑制蛋白质的吸附。结论 磷酸盐是同时分离酸性和碱性蛋白质的较好缓冲液。

蛋白质纯度的微乳液毛细管电动色谱分析法

目的：为克服毛细管壁对蛋白质的吸附，探索一种用毛细管电泳分离蛋白质的新模式。方法：在毛细管中，以ＳＤＳ－ 正丁醇－ 正己烷组成的微乳液为分离介质，对蛋白质混合物进行分离，研究温度、ｐＨ 值、电压、离子强度、ＳＤＳ浓度、烷烃链长等对蛋白质分离的影响，探索微乳液毛细管电动色谱分离蛋白质的机理。同时，还与毛细管区带电泳和胶束毛细管电动色谱进行比较。结果：微乳液毛细管电动色谱在分离蛋白质时，分离度受温度、电压和ＳＤＳ浓度影响较大，受ｐＨ 值和离子强度的影响较小，并用本法成功地分析了重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和重组人肿瘤坏死因子半成品的纯度。结论：本文建立的方法，可有效地用于同时分析酸性和碱性蛋白质混合物。