中国耳科学研究的现状和展望

近几年来，随着现代医学的飞速发展，耳鼻咽喉科学所属的各个领域也在日新月异地蓬勃发展，其中耳科学就是有突出进展的学科之一。由于分子生物学、生物化学、生物物理学、电子技术和计算机科学等高新科技广泛应用于耳科学研究，对耳科学所有领域都产生了变革性的冲击，使得耳科学研究取得了令世人瞩目的成就。

大鼠耳蜗毛细胞前体细胞与耳蜗间质细胞共培养的实验研究

目的探讨耳蜗间质细胞对耳蜗毛细胞前体细胞——大上皮嵴(greater epithelial ridge,GER)细胞的诱导分化作用。方法取出生后第1天大鼠20只,随机分为2组,每组各10只,利用酶消化和机械分离相结合的方法分别分离出纯耳蜗GER细胞和耳蜗间质细胞,并进行体外混合培养及形态学的观测,对共培养10天的标本行抗Calretinin(标记幼稚毛细胞)及抗p27抗体(标记支持细胞)的免疫细胞组织化学染色鉴定。结果混合培养的耳蜗GER细胞和间质细胞易形成片状细胞岛,共培养10天后,有部分细胞表达Calretinin,亦有少数细胞表达p27,但无Calretinin及p27双标记者。结论GER细胞与耳蜗间质细胞共培养,可以诱导GER细胞分化为毛细胞及支持细胞表型。

一个中国河北省遗传性低频感音神经性耳聋家系临床表型及遗传学特征分析

目的分析一个常染色体显性遗传性耳聋家系的临床听力学特征及遗传规律。方法对一个国人常染色体显性遗传低频感音神经性耳聋家系的资料进行了收集、整理及临床遗传学特征的分析。对家系成员进行调查并绘制系谱图。对调查的家系成员进行病史、体检、纯音测听、声导抗检查,两名患者进行耳声发射、听性脑干反应、前庭功能及颞骨CT扫描检查以排除听神经病及听觉系统的其他病变。结果该耳聋家系遗传方式为常染色体显性遗传,耳聋患者表现为一种迟发型的、渐进性的、以低频下降为主的听力损失,发病年龄介于10～25岁,早期以低频损失为主,听力曲线呈上升型,随着年龄增长逐渐累及全频听力,听力曲线由上升型变为平坦型。结论该耳聋家系为常染色体显性遗传方式,表现为低频感音神经性耳聋,通过全基因组扫描及连锁分析,有望发现新的低频感音神经性聋的相关基因。

耳鸣客观诊断研究现状及展望

耳鸣一直是临床难题之一 ,也是耳科学最前沿研究课题。耳鸣的发生机理仍不清楚 ,耳鸣的客观诊断尤其困难。以往 ,耳鸣的诊断主要依靠患者主诉和主观测听结果 (耳鸣匹配等 ) ,常规听力学检查方法未能为耳鸣提供客观证据。近来 ,现代脑功能成像技术 (如 MEG、PET、MRI)为耳鸣客观检测带来了新的希望。本文综述耳鸣客观诊断研究现状 。

以耳鼻喉科为首要症状的白塞病一例

1引言白塞病于1937年由土耳其医生Behcet首次报道,并以之命名,是一种以血管炎为病理基础的系统性疾病,可累及全身多个部位。其临床表现常不典型,以某一器官损害作为首发症状时,临床医生往往容易误诊误治,甚至无法做出诊断。现将我科收治的一例累及下咽,

内耳基因转导的研究进展

基因治疗是指在体细胞中转入具有治疗价值的新的遗传物质，使其在体内稳定表达，在一段时期内持续提供蛋白药物可达到治疗目的。对于一些日常用药物难以奏效的内耳疾病来说无疑是一种有潜力的治疗方法。由于内耳存在血迷路屏障，使得一些如生长因子、细胞因子和酶类等大分子难以通过血迷路屏障并输送到靶部位而发挥生物学作用。另外，由于这些蛋白质分子的半衰期短，因而需要重复多次耳蜗内注射及徽泵灌注，技术上的复杂性大大限制了这类分子在内耳中的应用。故基因治疗的关键是建立有效的基因转移方法，以使目的基因得到高效率及长时间的表达。同时还要具备相应的调控手段。

耳蜗非线性特性研究的进展

了解和认识耳蜗毛细胞的非线性特性的特点，是解释耳蜗机制的重要环节，可为进一步认识耳蜗主动机制和调谐特性提供重要的依据。本文对近十几年来有关耳蜗非线性特性研究的文献进行了复习，以期对耳蜗非线性特性有一个全面的认识，对其研究进展、实验方法和手段有进一步了解。

抗生素89—07、庆大霉素和阿米卡星的耳毒性比较

采用听性脑干电反应、眼震电图，结合火棉胶切片、耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶染色方法和扫描电镜等形态学观察，综合评价抗生素８９－０７与阿米卡星（ＡＭＫ）、庆大霉素（ＧＭ）的耳毒性。结果表明：ＧＭ１００ｍｇ确有耳蜗系和前庭系毒性；ＡＭＫ２００ｍｇ对耳蜗系有轻度损伤；而抗生素８９－０７２５、５０、１００ｍｇ对耳蜗均无损伤。抗生素８９－０７２５ｍｇ对前庭无影响，ＡＭＫ５０ｍｇ和ＧＭ２５ｍｇ对前庭有轻度损伤，中、大剂量的ＧＭ、ＡＭＫ和抗生素８９－０７对前庭均有损伤，并随着剂量的增加损伤程度加重。３种药物对耳蜗和前庭毒性为ＧＭ＞ＡＭＫ＞抗生素８９－０７。

抗生素89－07与奈替米星对豚鼠耳毒性的比较

９２只豚鼠分别肌注４种剂量的抗生素８９－０７、ＮＴＬ及生理盐水，２８ｄ后通过电生理、病理形态学检查，比较抗生素８９－０７与ＮＴＬ对豚鼠的耳毒性。结果显示：抗生素８９—０７与ＮＴＬ对听性脑干电反应阈值无显著影响。抗生素８９－０７较ＮＴＬ对前庭功能影响稍轻。耳蜗病变从扫描电镜、耳蜗铺片所见抗生素８９－０７较ＮＴＬ轻。内耳切片观察两药无显著区别．前庭病变各剂量总体相比抗生素８９－０７较ＮＴＬ轻。

北京地区耳聋残疾人群大前庭水管相关SLC26A4基因热点突变分子流行病学调查

目的分析北京耳聋残疾人群中SLC26A4基因热点突变IVS7-2A>G和2168A>G发生频率,初步探讨SLC26A4基因热点突变在北京地区耳聋残疾人群中的分子诊断意义。方法抽查北京地区持耳聋残疾证患者6247例,均抽取外周静脉血并提取DNA,以博奥生物有限公司提供的晶芯九项遗传性耳聋基因检测试剂盒(微阵列芯片)对SLC26A4基因的热点突变IVS7-2A>G和2168A>G进行检测,并对其发生频率进行分析。结果在6247名受检耳聋残疾人群中,携带SLC26A4基因IVS7-2A>G和2168A>G突变的例数共计177例,总阳性检出率为2.83%(177/6247)。IVS7-2A>G突变携带者141例(纯合27例,单杂合突变114例),2168A>G突变携带者26例(纯合4例,单杂合突变22例),SLC26A4基因2168A>G/IVS7-2A>G复合杂合突变携带者10例。针对IVS7-2A>G和2168A>G突变的SLC26A4基因双等位基因突变例数为41例,双等位基因突变率为0.66%(41/6247)。结论 1、在6247例耳聋残疾人中,通过SLC26A4基因热点突变IVS7-2A>G和2168A>G检测能够明确分子学诊断的占总体的0.46%(41/6247);2、在北京地区持证聋人群体中,SLC26A4基因热点突变检出率较我院门诊就诊的耳聋患者低,此项课题的开展,有助于了解北京地区残疾人群中与大前庭水管综合征密切相关的SLC26A4基因热点突变分布情况,在分子水平上为耳聋残疾人群明确诊断或指导进一步诊断,并对IVS7-2A>G和2168A>G突变检测阳性患者的婚配、生育具有一定的指导意义。

225例听神经病患者的耳鸣发生特点及临床特征分析

目的调查听神经病患者的耳鸣发生情况,并分析伴发耳鸣的听神经病患者的临床特征及听力学特点.方法对225例听神经病患者（均可准确陈述病史）进行病史采集及纯音测听、声导抗、听性脑干反应、DPOAE、言语识别率、耳蜗电图等听力学检测,并对结果总结分析.结果①225例听神经病患者就诊年龄3~45岁,男女比例1：1.23,发生耳鸣的患者126例,比例达56%,青少年期及青年期发病的患者耳鸣发生率最高,分别为63.03%（75/119）和66.67%（32/48）;②男性和女性患者耳鸣发生率分别为52.48%和58.87%,差异无统计学意义;③耳鸣发生率随病程增长而增高,病程10年以上的听神经病患者耳鸣发生率高达82.14%（23/28）;④综合征型听神经病患者耳鸣发生率明显高于非综合征性听神经病患者（84.00%〉42.00%）;⑤轻中度听力损失的听神经病患者耳鸣发生率明显高于其他听力损失类型.结论本组听神经病患者耳鸣发生与听神经病发病年龄、病程、听力损失程度及类型有一定相关性.听神经病患者耳鸣发生的临床特征分析对进一步探讨听神经病患者耳鸣发生机理提供临床资料.

MYO7A基因突变与遗传性耳聋

耳聋是临床上最常见的遗传性疾病之一。在所有耳聋患者中,遗传性聋约占50%,在所有先天性聋儿中,60%以上由遗传因素引起。与遗传性耳聋相关的基因大约有200多个,

豚鼠耳蜗Hensen细胞脂滴的性质与分布

目的探索豚鼠内耳Hensen细胞(Hensen cells,HC)中透明物质的性质及分布。方法 10只豚鼠分离制备好耳蜗单离Hensen细胞后,采用中性脂滴的特异分子探针Bodipy 493/503、苏丹Ⅲ、油红O染色及锇酸再固定四种染色方法对内耳组织进行染色,观察耳蜗不同区域Hensen细胞中脂滴的分布情况。结果豚鼠耳蜗不同区域Hensen细胞内均存在高透亮物质,从顶回至底回其体积逐渐变小,数量逐渐增加,至底回逐渐消失;该物质经Bodipy 493/503分子探针特异标记为绿色,被苏丹Ⅲ染色为橘红色,被油红O染色为宝石红,被锇酸后固定后呈黑色颗粒,证实为脂滴。结论四种染色方法对内耳组织的染色结果均提示内耳Hensen细胞中透明物质为脂类物质。

N-乙酰半胱氨酸对活性氧诱导耳蜗毛细胞凋亡的抑制作用的观察

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对活性氧诱导耳蜗毛细胞凋亡的抑制作用。方法选用新生1～5天SD大鼠24只,随机分为4组,每组6只12耳:①无血清培养基组;②0.1mmol/L H2O2组(H2O2组);③10mmol/L N-乙酰半胱氨酸组(NAC组);④10mmol/L NAC+0.1mmol/L H2O2组(NAC+H2O2组)。分离各组动物Corti器,分别放入相应培养液中培养,培养结束后用丫啶橙(YO)/碘化丙啶(PI)双重染色技术检测并计数凋亡毛细胞。结果 NAC组耳蜗基底膜的形态结构与无血清培养基组无明显差异,未见凋亡细胞;H2O2组可见大量凋亡细胞,细胞形态发生改变,出现水肿及碎裂,还有部分细胞缺失;NAC+H2O2组细胞仍保持完好形态,只见少许凋亡细胞。结论抗氧化剂NAC对外源性H2O2诱导的耳蜗毛细胞凋亡有抑制作用。

瞬态耳声发射的主频对梅尼埃病的诊断价值

为探讨检测TEOAE的主频对诊断梅尼埃病的应用价值,本研究用ILO 88测试系统以click声为刺激信号,对正常耳和梅尼埃病耳作瞬态耳声发射(TEOAE)检测,观察其主频范围.发现正常耳的主频集中在1.2～l.6kHz之间,梅尼埃病主频集中在0.8～1.1kHz之间,正常耳的主频明显高于梅尼埃耳的主频.梅尼埃病人服用甘油后,TEOAE主频发生变化,由低频转为高频,未引出耳声发射耳,服用甘油后耳声反射引出.以上结果提示,检测TEOAE的主频对梅尼埃病的诊断有一定意义.

豚鼠耳蜗中ATP对一氧化氮/环磷酸鸟苷途径的激活作用

实验研究了豚鼠耳蜗中ATP和一氧化氮/环磷酸鸟苷途径(nitric oxide/cyclic guanosine monophosphate,NO/cGMP pathway)的关系。将40只耳廓反射灵敏的健康白色豚鼠随机分为5组,分别对其离体的耳蜗即刻灌流人工外淋巴基础液(artificial perilymph basic solution,APBS)以及溶于人工外淋巴基础液的ATP、一氧化氮合酶抑制剂左旋-NG-硝基精氨酸(L-NG-nitroarginine,L-NNA)+ATP、可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂1H-[1,2,4]草酸重氮[4,3-a]喹恶啉(1H-[1,2,4]oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one,ODQ)+ATP和A-23187(ca2+载体),收集耳蜗组织标本,利用放射免疫方法测定耳蜗组织中的cGMP的平均含量,比较各组之间耳蜗组织cGMP平均含量的差异。试验结果显示,向刚离体的耳蜗中灌流ATP和A-23187可以引起耳蜗组织中的cGMP含量升高,而灌流L-NNA和ODQ则可以抑制ATP所引起的耳蜗组织中cGMP含量的升高,提示在耳蜗组织中ATP可以通过升高细胞内Ca2+浓度的作用而激活NO/cGMP途径。从本实验结果可以提出假说:耳蜗中ATP从神经末梢释放,通过提高细胞内Ca2+的浓度,有激活NO/cGMP途径的作用,而NO/cGMP又能对ATP进行负反馈调节,两者共同调节耳蜗的生理功能,在耳蜗中存在ATP/Ca2+-NO/cGMP通路。