急性缺氧条件下EP、CM、CAP以及耳蜗毛细胞的形态学变化

本实验用同一根玻璃微电极在豚鼠耳蜗中阶记录ＥＰ（ＥｎｄｏｃｏｃｈｌｅａｒＰｏｔｅｎｔｉａｌ，耳蜗内电位）、ＣＭ（ＣｏｃｈｌｅａｒＭｉｃｒｏｐｈｏｎｉｃｓ，耳蜗振电压）、ＣＡＰ（ＣｏｍｎｏｕｎｄＡｃｔｉｏｎＰｏｔｅｎｔｉａｌ，复合动作电位），观察在不同缺氧状态下，三者动态变化过程．发现在缺氧初始（１—２分钟），ＣＭ和ＣＡＰ随ＥＰ同步迅速下降；但缺氧３—６分钟时，ＣＭ下降缓慢，似一“平台”，而ＣＡＰ和ＥＰ继续同步下降；缺氧７—１２分钟时，三者又倾于平行。扫描电镜观察：ＩＨＣ（内毛细胞）表面由底四到三圈出现广泛分泌物和球状物，ＯＨＣ汐（毛细胞）表面出现局限性分泌物和球状物，静纤毛融合。结果表明：ＯＨＣ和ＩＨＣ的功能状态与氧代谢密切相关，ＣＭ直接受ＯＨＣ和ＩＨＣ结构变化的影响。ＣＭ下降过程中的平台，则可能与盖膜（ＴＭ）的压电效应有关。ＣＡＰ的变化不完全依赖于ＣＭ。

缺氧豚鼠耳蜗总和电位和形态学实验观察

应用同一玻璃微电极在豚鼠中阶记录复合动作电位（ＣＡＰ）、总和电位（ＳＰ）和蜗内电位（ＥＰ），连续动态观察在缺氧、给氧过程中的变化，结合内、外毛细胞及突触形态学观察，发现缺氧时ＳＰ和ＥＰ幅度下降，极性发生改变。而ＳＰ极性及大小同时随ＣＡＰ阈值因氧供变化而变化。组织学检查结果内毛细胞琥珀酸脱氢酶无变化，外毛细胞琥珀酸脱氢酶活性下降，而突触内乙酰胆碱酯酶无变化。结果提示：在中阶记录的ＳＰ极性和振幅受ＥＰ的被动影响，同时有外毛细胞主动机制对内毛细胞的调控。从缺氧到给氧过程，ＳＰ由负变正是外毛细胞对内毛细胞调控的失与得的过程。

脉冲噪声暴露后豚鼠畸变产物可声发射（DPO）和耳蜗振电压（CM）的变化

脉冲声暴露前及暴露后即刻（１小时之内）、４８小时、一周同时测试了豚鼠耳蜗畸变产物耳声发射（ＤＰＯ）和振电压（ＣＭ），结果表明，暴露前豚鼠耳蜗出现最佳ＤＰＯ的最适频比（ｆ２／ｆ１）为１．１９－１．２５，最适强度差（Ｉｆ１－Ｉｆ２）为０．４５—２．００ｄＢ，８和４ｋＨｚ时ＤＰＯ出现率为１００％，２ｋＨｚ为９５％，１ｋＨｚ时为７９％。暴露后不同阶段ＤＰＯ和ＣＭ恢复的速率和变化程度不同，前者在各个阶段上损失的程度比后者重。震后一周ＤＰＯ除在８ｋＨｚ时恢复至接近震前水平外，其余频率只恢复至震前的１／４左右或稍多．与之对比，各个频率的ＣＭ在一周时均完全恢复至震前水平，似说明ＤＰＯ较ＣＭ敏感。ＤＰＯ和ＣＭ相关分析结果提示，二者同源于外毛细胞（ＯＨＣ）．

中枢性低频感音神经性听力减退患者内侧橄榄耳蜗系统功能测试

利用对侧声刺激对耳声发射（ＯＡＥｓ）的抑制效应对８例能够引出明确ＯＡＥｓ反应的低频感音神经性听力减退患者的内侧橄榄耳蜗系统（ＭＯＣ）功能进行测试观察。所有病例患侧ＭＯＣ功能均出现障碍，２例单侧听力减退病例镫骨肌声反射、ＡＢＲ、ＥＣｏｃｈＧ均正常，６例双侧听力减退病例声反射及ＡＢＲⅠ波后的反应均消失，阈上功能及言语测听均不正常。结果提示中枢性低频感音神经性听力减退病例可同时伴有ＭＯＣ功能障碍，测试ＭＯＣ功能对于耳蜗和蜗后病变的定位诊断有独特的临床意义。

鼠和人胎儿嗅粘膜与犁鼻器官的免疫组织化学观察

应用免疫组织化学方法观察了神经原特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）、神经胶质特异性Ｓ－１００蛋白（Ｓ－１００）和细胞角质素（ＣＫ）三种抗体在豚鼠。大鼠和人胎儿嗅粘膜和犁鼻器官的正常分布情况。结果发现以上三种抗体联合应用可以显示除支持细胞和微绒毛细胞外所有的嗅粘膜结构，是研究正常嗅粘膜和嗅粘膜病理改变的良好方法。豚鼠、大鼠犁鼻器官内侧被覆ＮＳＥ阳性的嗅上皮，具有感觉功能。７个月人胎儿鼻中隔两侧的犁鼻器官对ＮＳＥ染色呈阴性反应，因此，新生儿和成年人的犁鼻器官不可能具有象低等动物那样的辅助嗅觉的功能。

豚鼠耳蜗外毛细胞的钾通道

目的研究外毛细胞钾离子通道的生物物理学和药理学特性。方法用细胞贴附式和内面向外式膜片钳技术,研究豚鼠耳蜗单离外毛细胞底侧膜的钾离子单通道电流。结果记录到两种钾离子单通道电流(1)大电导型钙激活钾通道,在等渗140mmol/LKC1溶液时电导为161±26pS(内面向外式)或155±27pS(细胞贴附式),反转电位为0mV;浴液为Hanks液而电极内液为140mmo/LKC1液时,电导为133±9pS(细胞贴附式)。当膜内面浴于无钙液时通道活动消失。通道呈簇状发放或快速簇状发放方式,其开启和关闭时程直方图均可用三阶指数方程拟合。双氢链霉素能够可逆性地抑制外毛细胞的大电导型钙激活钾通道,表现为电流幅度减少,在链霉素浓度增大以及细胞膜电位偏正时更明显,新霉素的抑制作用更强。(2)～44pS钾通道。结论豚鼠耳蜗外毛细胞底侧膜具有两种钾离子通道,研究了其大电导型钙激活钾通道的生物物理学和药理学特性。

豚鼠耳蜗外毛细胞的钙激活钾通道

用细胞贴附式和内面向外式膜片钳记录法研究豚鼠耳蜗单离外毛细胞底侧膜的钾离子单通道电流，记录到大电导型钙激活钾通道。在等修１４０ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ溶液时其电导为１６１±２６ｐｓ（内面向外式）或１５５±２７ｐｓ（细胞贴附式），反转电位为ｏｍＶ；浴液为Ｈａｎｋｓ液而电极向液为１４０ｍｍｏｌ／ＬＫＣＩ液时，电导为１３３±９ＰＳ（细胞贴附式）。当膜内面浴无钙液时通道活动消失。通道呈簇状发放或快速痪状发放方式，其开启和关闭时程直方图均可用三阶指数方程拟合。

豚鼠中潜伏期听觉诱发电位脑地形图特性的研究

将脑地形图技术应用于豚鼠中潜伏期（ＭＬＲ）反应的研究。在１０只豚鼠颅骨表面钻１４个直径为１ｍｍ的洞，放置硬膜外电极，１３导联同时记录中潜伏期反应，做出彩色脑地形图。结果提示，豚鼠中潜伏期反应包含两部分内容：第一部分为ＭＬＲ的主要成分，即Ａ、Ｂ、Ｃ正负正三相波，灶位于刺激耳对侧颞区皮层；第二部分为Ｍ＿－、Ｍ＿＋双相波，波幅较小，灶位于顶枕区。通过普鲁卡因微量注入额区皮层，发现Ｂ、Ｃ波消失，Ａ波增宽。本实验结果表明，Ａ波、Ｍ＿－波、Ｍ＿＋波可能来源于皮层下，Ｂ、Ｃ波可能来源于皮层。

庆大霉素和丁胺卡那霉素耳毒性的再探讨

给豚鼠肌注不同剂量的庆大霉素（ＧＭ）和卡那霉素（ＡＭＫ），分别于注射前和后１、２、３、４周测ＡＢＲ，并于用药前和后２、４、６周记录眼震频率，最后一次功能测试后取内耳组织用ＳＤＨ染色耳蜗铺片，火棉胶切片和ＳＥＭ观察。结果表明，除ＧＭ１００ｍｇ组ＡＢＲ阈值受剂量影响较明显外，其它各组ＡＢＲ阈移大小随着用药时间的延长逐渐提高，ＧＭ的阈值变化比ＡＭＫ大。ＧＭ１００ｍｇ组和ＡＭＫ各组用药后前庭眼震频率减少。随着用药剂量的增加毛细胞缺失数亦增加，ＧＭ比ＡＭＫ毛细胞缺失数多，前庭器官位觉斑和壶腹嵴的变化ＡＭＫ组比ＧＭ组大。耳蜗和前庭功能与形态变化结果基本一致，进一步证实了二药对内耳的毒性。

双重荧光染色监测听毛细胞游离钙

豚鼠耳蜗分离外毛细胞经fluo-3和fura-red染色后,用激光扫描共聚焦显微镜监测其胞内游离钙的空间分布和动态变化,以fluo-3/fura-red荧光比值大小指示游离钙浓度的高低。外毛细胞胞内游离钙呈不均匀分布,荧光比值分别为细胞质1.71±0.85,质膜1.61±0.75,表皮板1.47±0.65及胞核1.39±0.66,显示细胞质游离钙浓度最高而胞核游离钙浓度最低。静息状态下连续扫描时荧光比值变化小于0.1,而在受到机械刺激后荧光比值增加幅度达0.3—1.2。实验结果表明,fluo-3和fura-red双发射比例法能更准确反映听毛细胞胞内钙的空间分布和动态变化,第二信使钙可能参与了听毛细胞的机械-电换能过程,研究了换能过程中听毛细胞钙信号的时空模式。

儿童眩晕症

总结８７例１３岁以下儿童眩晕症的病因及位、听功能检查。绝大多数为前庭末梢性病变，占９５．４％，儿童良性阵发性眩晕多见，占３４．５％，其次为Ｍｅｎｉｅｒｅ病１３例（１４．９％）及耳毒性药物中毒１０例（１１．５％），眼震电图检查半规管功能异常者５７例（６５．５％），其中少数有视动功能异常，与儿童中枢神经系统尚不稳定有关。眩晕合并半规管功能低下者，证明前庭末梢有器质性损害，其中１３例进行姿势图检查，患儿人体重心晃动的轨迹长、速度大，与同龄健康儿童比较差异有显著性。

豚鼠膜迷路蛋白组成分析及免疫转印法检测感音神经性聋患者抗68kD抗体

比较了多种条件提取的豚鼠膜迷路蛋白，发现用十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）或ＴｒｉｔｏｎＸ－１００提取效率高，冻融法较超声粉碎法更可取。成功地建立了免疫转印（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）法，并初步运用于血清抗膜迷路蛋白抗体的检测。４２例不明原因感音神经性聋患者中１６例患者血清中抗６８ｋＤ抗体阳性，同时伴有ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ升高。部分正常对照组血清中也存在该抗体，但反应弱，重复性差。

100例乳突再手术分析

本文对100例(114耳)乳突再手术所见病变进行总结,分析了外耳道口狭窄、面神经嵴过高、鼓窦、后鼓室及乳突腔病变的原因,并提出处理意见,同时观察术前细菌学检查对术后术腔的影响。经过再手术,术后干耳率为92%。

豚鼠脉冲角加速度刺激诱发中潜伏期反应的两种成分

目的探讨中潜伏期前庭诱发电位。方法以自行研制的脉冲角加速度刺激装置在豚鼠记录中潜伏期诱发反应，脉冲角加速度上升时间３．５ｍｓ，角加速度在０～１００００°／ｓ２之间可调。结果脉冲角加速度刺激诱发中潜伏期反应由神经源性和肌源性两种成分组成。中潜伏期反应神经源性成分由发生于刺激开始后９ｍｓ至２４ｍｓ的三相波构成，最大振幅均值为２８μＶ，中潜伏期反应肌源性成分由发生于刺激开始后７ｍｓ至１１ｍｓ的多相波组成，最大振幅均值１５μＶ。结论中潜伏期反应的两种成分均为脉冲角加速度刺激引起的前庭诱发电位。

螺旋神经节脂褐素荧光显微镜观察切片制作

螺旋神经节脂褐素荧光显微镜观察切片制作李玉，方耀云对于从切片观察耳蜗螺旋神经节细胞中所存在的脂褐素的研究，国内尚未见报道。最近，我们将人颞骨切片中的火棉胶去除，在荧光显微镜下观察５例８～８４岁的人体耳蜗螺旋神经细胞中脂褐素的含量，取得初步成功。现将其...

白血病颞骨组织病理学观察

报告１４例（２８耳）各类白血病患者颞骨组织病理所见，主要特点为岩尖、中耳粘膜下有白血病细胞浸润：中耳粘膜增厚；中耳粘膜下、乳突腔、内听道、外淋巴间隙及岩尖等部位均有不同程度出血。认为中耳、外淋巴间隙大量出血可导致耳聋、眩晕，一旦有耳聋和鼻出血等症状，提示病程已至晚期。化疗和抗生素的应用可减轻浸润和出血的程度，并明显降低中耳炎的发生率。