白藜芦醇对CoCl_2诱导H9C2心肌细胞损伤的保护作用研究

目的探讨白藜芦醇(Resveratrol,RES)对二氯化钴(CoCl_2)诱导H9C2心肌细胞损伤保护作用的机制。方法 500μmol/L CoCl_2处理H9C2心肌细胞24h以建立H9C2心肌细胞缺氧损伤模型。实验分组:空白对照组(control);模型损伤组(0.1%DMSO培养液预处理H9C2细胞24h后,500μmol/L CoCl_2继续处理H9C2细胞24h);低剂量RES组(12.5μmol/L RES预处理H9C2细胞24h后,500μmol/L CoCl_2继续处理H9C2细胞24h);中剂量RES组(25μmol/L RES预处理H9C2细胞24h后,500μmol/L CoCl_2继续处理H9C2细胞24h);高剂量RES组(50μmol/L RES预处理H9C2细胞24h后,500μmol/L CoCl_2继续处理H9C2细胞24h)。采用MTT法评价H9C2心肌细胞活力。Hoeschst 33342染色观察H9C2细胞核形态的变化。采用流式细胞技术检测H9C2细胞线粒体膜电位的变化、细胞内活性氧的产生及细胞凋亡的情况。Western blot检测H9C2细胞中凋亡相关蛋白的变化。结果 MTT结果显示,RES浓度依赖性抑制CoCl_2诱导的H9C2细胞活力的降低;Hoeschst 33342染色观察显示,RES浓度依赖性抑制CoCl_2引起的H9C2细胞凋亡形态的出现;流式细胞术显示,RES浓度依赖地抑制CoCl_2诱导的H9C2细胞内活性氧的产生、线粒体膜电位的降低、细胞凋亡的增加;Western blot检测结果显示,RES浓度依赖性抑制CoCl_2引起的H9C2细胞中促凋亡蛋白(Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9)的增加和抑凋亡蛋白(Bcl-2)的降低。结论 RES对CoCl_2引起的H9C2心肌细胞损伤具有保护作用,其机制可能是通过抑制CoCl_2引起的活性氧增加、线粒体膜电位降低进而阻碍H9C2细胞线粒体凋亡的发生而实现的。