柱前衍生-电化学检测HPLC法测定大鼠脑内的谷氨酸和γ-氨基丁酸

目的 :建立大鼠脑组织内谷氨酸和γ 氨基丁酸的HPLC测定方法。方法 :大鼠脑组织匀浆液低温离心 ,上清液经甲醇沉淀蛋白并稀释至合适浓度后与邻苯二醛在亚硫酸钠存在下发生衍生化反应 ,衍生物经HPLC分离 ,电化学检测。结果 :谷氨酸在 0 .1～ 2 .0 μg·ml- 1 ,γ 氨基丁酸在 0 .0 5～ 1.0 μg·ml- 1 浓度范围内 ,线性关系良好。谷氨酸测定的日内和日间变异系数(RSD )分别小于 3.4%和 4.5 % ,γ 氨基丁酸测定的日内和日间变异系数 (RSD )分别小于 4.2 %和 8.6 %。两者回收率分别为95 .9%～ 10 2 .3%和 10 7.2 %～ 110 .0 %。谷氨酸和γ 氨基丁酸的最小检出浓度均为 5ng·ml- 1 。SD大鼠小脑、皮层、丘脑、海马内谷氨酸的含量分别为 96 0 .2、10 6 8.0、46 0 .2和 846 .6 μg·g- 1 ;γ 氨基丁酸的含量分别为 186 .0、16 5 .4、149.3和 188.6 μg·g- 1 。结论 :本法简便、灵敏、准确 ,可用于大鼠脑组织内谷氨酸和γ

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中的硝苯地平

目的 建立测定人血浆中硝苯地平的高效液相色谱-大气压化学源-质谱联用（HPLC-Ms）的方法。方法 液相分离采用Diamonsil C18分析柱，柱温：30℃，以甲醇-水（70：30）为流动相，流速为1．2ml／min，进样量20μl；采用四极杆质谱检测器，大气压化学电离源（APCI），雾化气（N2）压力为60p，干燥气（N2）流速为4．0L·min^-1，干烘气（N2）温度为350℃，毛细管电压4KV，碎片电压为75V，峰宽0．10，负离子方式检测，在选择离子监测（SIM）模式下检测质荷比（m／z）为345．0（硝苯地平）和359．1（内标尼群地平）的准分子离子[M—H]^-。结果血浆中无内源性物质干扰测定，每个样品的分析时间〈8．5min；硝苯地平在1．25—160ng·ml^-1范围内呈良好的线性关系，回收率为96．0％-99．5％，日内RSD〈4．49％，日间RSD〈10．03％。结论本方法操作简便、选择性好、准确、灵敏，可用于硝苯地平的药代动力学研究，

中药药物动力学研究进展

本文对近年来有关中药药物动力学研究的国内外文献进行了总结、分析。综述了以有效成分为指标和以药效为指标两种研究中药药物动力学的基本方法 ,并列举了实例 ;介绍了中药药物动力学研究中采用的三维高效液相色谱、高效毛细管电泳、色谱 -质谱联用和色谱 -核磁共振联用等新技术 ;讨论了中药胃肠动力学、证治药动学和中药血清药理学等新概念 ;

头孢氨苄分散片人体药动学及相对生物利用度

目的 :研究健康人体内头孢氨苄分散片药动学及相对生物利用度。方法 :12名健康志愿受试者自身交叉口服头孢氨苄分散片和头孢氨苄片 5 0 0mg后 ,采用高效液相色谱法测定血清中头孢氨苄浓度。 结果 :头孢氨苄分散片和片剂的体内过程均符合一房室模型 ,AUC分别为 :(132 8.0± 30 3 .9)和 (130 4.4± 2 6 6 .7) μg·ml-1·min ;Tmax分别为 (2 6 .6± 15 .1)和 (4 6 .6± 9.2 )min ;Cmax分别为 (13.2± 4.9)和 (10 .2± 2 .9) μg·ml-1。经方差分析 ,两药Tmax间差异有显著性 ,其他药动学参数间差异无显著性 ;对于lnAUC ,双向单侧t检验表明 ,头孢氨苄分散片与片剂具有生物等效性。结论 :头孢氨苄分散片与头孢氨苄片剂具有生物等效性 ,头孢氨苄分散片的相对生物利用度为 (10 6 .6± 33.6 ) %。

高效液相色谱法测定人血清中格列吡嗪的浓度

目的 建立高效液相色谱法测定人血清中格列吡嗪的浓度。方法 采用反相高效液相色谱法 ,以甲苯磺丁脲为内标 ,经Diamonsil-C18(4 .6mm× 2 0 0mm ,5mm)色谱柱分离 ,流动相为 0 .0 1mol·L-1磷酸二氢铵缓冲液 (pH3.5 ) -乙腈 (5 7∶4 3) ,流速为 1.0ml/min ;二极管阵列检测器 (DAD)检测波长为 2 75nm。 2 0名志愿者口服格列吡嗪 (10mg)片后 ,测定不同时间血清内格列吡嗪的浓度。结果 在 2 5～ 16 0 0 μg·L-1浓度范围内 ,格列吡嗪和内标峰高的比值与浓度呈良好的线性关系 (r =0 .9998) ;格列吡嗪平均回收率为 10 0 .5 % ,日内、日间RSD均小于 5 % ;平均萃取回收率为 87.8%。结论 方法简便、快速准确、重现性好 。

血浆中硫普罗宁的测定及其片剂人体生物等效性研究

目的研究硫普罗宁片在健康人体内的相对生物利用度。方法采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)测定了18名健康男性受试者交叉po200mg的硫普罗宁参比制剂和受试制剂后不同时间血浆中硫普罗宁的浓度,求出主要药动学参数,并进行方差分析和双单侧t检验。结果HPLC-MS测定血浆中硫普罗宁的线性范围为0.02～5mg.L-1,定量下限为0.02mg.L-1。日内、日间精密度(RSD)均小于13%,相对回收率介于96%～106%之间。硫普罗宁片参比制剂和受试制剂主要药动学参数:ρmax分别为(3.54±0.75)和(3.27±1.03)mg.L-1;tmax分别为(4.6±1.1)和(4.3±1.0)h;AUC0-96h分别为(18.2±4.5)和(17.6±5.9)mg.h.L-1;AUC0-∞分别为(20.4±5.5)和(19.9±6.9)mg.h.L-1;t1/2分别为(39.4±14.3)和(41.8±16.5)h。tmax经非参数秩和检验,受试制剂与参比制剂无统计学显著性差异;ρmax、AUC0-96h、AUC0-∞经对数转换后进行方差分析,受试制剂与参比制剂无统计学显著性差异,双向单侧t检验结果表明,受试制剂ρmax的90%可信限落在参比制剂70%～143%之间,受试制剂AUC的90%可信限落在参比制剂80%～125%之间;以AUC0-96h计算,受试制剂硫普罗宁片的相对生物利用度为(95.7±26.1)%。结论两种硫普罗宁片制剂具有生物等效性。

RP-HPLC法测定人血清中醋酸甲地孕酮浓度

目的 :建立高效液相色谱法测定人血清中醋酸甲地孕酮浓度。方法 :分析柱为YWG -C1 8(10 μm ,4.6mm× 2 5 0mm) ;流动相为水 -乙腈 (40∶6 0 ) ;流速为 1.0ml min ;紫外检测波长为 2 88nm ;用乙酸乙酯作为提取液。结果 :血清中醋酸甲地孕酮浓度在1～ 12 8ng·ml- 1 范围内线性关系良好 (r =0 .9997) ;醋酸甲地孕酮高、中、低 3个浓度的日内、日间变异系数分别小于 10 %和20 % ;平均回收率为 98.5 5 % ;最低检测血药浓度为 0 .5ng·ml- 1 。结论 :本方法准确、方便 ,灵敏度高 ,适合用于临床血药浓度监测和药代动力学研究。

反式曲马朵及其活性代谢物氧去甲基曲马朵对映体的血浆蛋白结合

目的 研究反式曲马朵 (transT)及其活性代谢物氧去甲基曲马朵 (M1)对映体的血浆蛋白结合。方法 大鼠腹腔注射单剂量盐酸transT ,1h后取血 ,离心超滤法制备血浆超滤液 ,高效毛细管电泳法测定血浆及其超滤液中transT和M1对映体的浓度 ,配对 t-检验比较对映体间的浓度与血浆蛋白结合率。结果 血浆中 (+) - transT的总浓度和游离浓度均高于(- ) -transT ,(+) -transT的血浆蛋白结合率低于 (- ) -transT。M1两对映体的总浓度、游离浓度和血浆蛋白结合率无明显区别。结论 transT与血浆蛋白结合具有立体选择性 。

药物控/缓释制剂生物等效性评价

本文介绍了控 /缓释制剂生物等效性评价的方法、规范和研究进展 ,重点介绍试验设计、结果表达、统计学处理等方面 ;讨论了个体生物等效性。

HPLC-电化学检测法测定大鼠脑内的去甲肾上腺素和5-羟吲哚乙酸

目的 建立大鼠脑内单胺递质及其代谢产物的测定方法。方法 大鼠脑组织匀浆液用高氯酸沉淀蛋白后 ,上清液直接用于HPLC分析。采用Irregular HC18色谱柱 ,流动相组成为 0 .1mol·L-1NaH2 PO4 甲醇 0 .0 1mol·L-1EDTA - 0 .2mol·L-1辛基磺酸钠 (87∶15∶1∶2 .5 ,pH3.7) ,流速为 0 .8ml/min ,温度为 35℃ ,电化学检测器工作电压为 0 .8V。结果 去甲肾上腺素和 5 羟吲哚乙酸分别在 6 .8～ 6 80ng·ml-1和 3.8～ 380ng·ml-1范围内线性关系良好 ,去甲肾上腺素测定的日内和日间的RSD分别为7.5 %和 8.1% ,5 羟吲哚乙酸测定的日内和日间的RSD分别为 2 .0 %和 7.5 % ,两者回收率分别为 10 3.0 %和 6 1.6 % ,检测限分别可达 2ng·ml-1和 1ng·ml-1。结论 本法用于脑内单胺递质及其代谢物的测定 ,快速、简便。