制备脱细胞全喉-下咽-食管复合支架用于咽喉重建的实验研究

目的制备新型脱细胞全喉-下咽-食管复合支架,并探讨其作为咽喉重建替代材料的可行性。方法通过成年新西兰大白兔颈总动脉灌注去离子剂制备脱细胞全喉-下咽-食管复合支架,并行HE染色、扫描电镜(SEM)、免疫原性检测及生物相容性分析;采用密度梯度离心法分离培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),CCK8法分析支架浸提液的毒性作用,并将细胞复合于脱细胞支架上,体内埋植1周后观察细胞在支架上的粘附及增殖情况。结果HE染色显示脱细胞全喉-下咽-食管支架除软骨以外的其他组织均仅剩细胞外基质(ECM),无细胞成分及结构残留,SEM电镜显示ECM的胶原纤维束,呈蜂窝状,无细胞结构,CCK8提示支架浸提液对细胞生长无明显毒性作用,且细胞可在支架上成功粘附并生长。结论通过灌注法制备低免疫原性的保留ECM的脱细胞全喉-下咽-食管支架具有可行性。