RORα过表达病毒载体尾静脉注射对多柔比星诱导小鼠心脏毒性的抑制作用及其机制

目的观察维甲酸相关孤核受体α(RORα)过表达病毒载体尾静脉注射对多柔比星(DOX)诱导小鼠心脏毒性(DIC)的影响,并探讨其可能的机制。方法将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为Con组、DIC组、DIC+RORα组、DIC+RORα+EX527组,每组20只。DIC+RORα组和DIC+RORα+EX527组经尾静脉注射过表达RORα基因的腺相关病毒9型(AAV9)载体,DIC组经尾静脉注射AAV9空白对照载体;AAV9载体注射3周后,除Con组外均采用尾静脉注射DOX的方法建立DIC小鼠模型;DIC+RORα+EX527组每次DOX注射后腹腔注射沉默信息调节因子(SIRT1)信号通路特异性阻断剂EX527。各组分组处理后4周,经胸超声心动图检查测算左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS),处死后取眼眶血和心肌组织。采用HE染色观察心肌组织病理情况,ELISA法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTnI)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),TUNEL染色后计算细胞凋亡率,二氢乙锭法检测心肌组织活性氧(ROS)表达,比色法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)表达,免疫荧光染色观察心肌组织巨噬细胞浸润和NF-κB p65表达,Western blotting法检测心肌组织cleaved Caspase-3、RORα、SIRT1蛋白表达并计算Ac-NF-κB p65/NF-κB p65、Ac-Foxo1/Foxo1,实时荧光定量PCR法检测心肌组织RORα、SIRT1 mRNA表达。结果与Con组比较,DIC组小鼠心肌纤维排列紊乱且断裂明显,心肌细胞空泡化显著;与DIC组、DIC+RORα+EX527组比较,DIC+RORα组小鼠心肌纤维断裂及心肌细胞空泡化均减轻。LVEF、LVFS及心肌组织SOD、GSH-Px:Con组>DIC+RORα组>DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。血清CK-MB、LDH、cTnI、IL-1β、IL-6、TNF-α及心肌组织细胞凋亡率、cleaved Caspase-3蛋白、ROS、MDA、巨噬细胞浸润、NF-κB p65:Con组<DIC+RORα组<DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。RORαmRNA及蛋白:Con组、DIC+RORα组、DIC+RORα+EX527组>DIC组(P均<0.05)。SIRT1 mRNA及蛋白:Con组、DIC+RORα组>DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。Ac-Foxo1/Foxo1、Ac-NF-κB p65/NF-κB p65:Con组、DIC+RORα组<DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。结论RORα过表达病毒载体尾静脉注射可以减轻DOX诱导的小鼠DIC,其机制可能与激活SIRT1信号通路从而抑制心肌组织氧化应激损伤和炎症反应有关。

先天性心脏病微创治疗临床路径评价体系构建

目的 构建先天性心脏病微创治疗临床路径评价体系。方法 对2001—2021年Cochrane Library、PubMed数据库和中国知网(CNKI)数据库收录的先天性心脏病微创治疗评价研究相关文献进行量化分析,描述评价指标引用情况,结合先天性心脏病微创治疗临床路径相关诊疗指南,融入专家论证共识,构建评价指标体系。结果 数据库共检出332篇有效文献,包括外文文献44篇、中文文献288篇;评价指标分析得到业务指标32项,卫生经济学指标7项。将分析结果结合微创治疗临床路径诊疗指南以及专家论证共识,最终形成了由5项一级指标(医疗效率指标、治疗相关指标、医疗质量指标、医疗费用指标、医疗服务指标)和31项二级指标组成的先天性心脏病微创治疗临床路径评价体系。结论 本研究构建的先天性心脏病微创治疗临床路径评价指标体系后续可帮助各心脏中心将临床路径实施情况进行可视化对比,找出差异问题,从而提高救治效率,改善治疗效果,减少住院费用,减轻患者家庭和社会负担。

姜黄素通过AMPK/FUNDC1缓解LPS诱导的心肌细胞损伤

目的 阐明AMPK/FUNDC1在姜黄素(curcumin, Cur)减轻脂多糖诱导的心肌细胞毒性中的作用及机制。方法将分离的乳鼠心肌原代细胞(neonatal mouse cardiomyocytes, NMCMS)构建脂多糖损伤模型。以CCK-8细胞活力检测试剂盒检测细胞活力、ROS检测试剂盒检测ROS生成量、ATP检测试剂盒检测线粒体ATP生成、JC-1荧光染色观察线粒体膜电位、Western blot法检测自噬标志蛋白的表达情况。结果 与Con组比较,LPS处理后显著降低心肌细胞活力且ROS水平显著增加,同时AMPK的磷酸化水平及线粒体自噬标志蛋白FUNDC1的表达显著降低。Cur处理后这种改变被显著逆转,从而保护NMCMS免受LPS诱导的心肌细胞毒性损伤。而siAMPK的加入则部分抵消Cur对心肌细胞的保护作用,此外线粒体自噬抑制剂3-MA及线粒体自噬激活剂rapamycin处理后表明,FUNDC1作为AMPK的下游的关键调控分子,参与Cur对LPS诱导的心肌损伤的保护作用。结论 Cur通过激活AMPK/FUNDC1信号通路,缓解LPS诱导的心肌细胞毒性。

新生儿先天性动脉导管未闭与新生儿母亲糖尿病相关性的Meta分析

目的通过Meta分析探究新生儿先天性动脉导管未闭(patent ductus arteriosus,PDA)与新生儿母亲糖尿病(infants of diabetic mothers,IDM)的相关性,为新生儿PDA预防提供理论依据。方法计算机检索Web of Science、PubMed、Scopus、Embase、Cochrane、ProQuest、OVID、CNKI、WanFang、VIP、SinoMed数据库,检索词:动脉导管未闭、动脉导管开放、先天性动脉导管未闭、糖尿病、妊娠期糖尿病。检索时间为建库至2021年8月。由两位研究者独立筛检出符合纳入标准的文献,提取文献资料、评价文献质量。以医嘱诊断为准,将新生儿分为PDA组和非PDA组。按病例所在区域、研究设计、糖尿病类型进行亚组分析。采用Stata 14.0进行统计分析。结果最终纳入Meta分析的文献共11篇(样本总数为1014399例)。Meta分析显示,新生儿PDA组IDM患病率是新生儿非PDA组的1.25倍,差异无统计学意义[RR=1.25,95%CI:(0.97~1.61),P=0.086]。按病例所在区域分组的亚组分析结果显示,亚洲组新生儿PDA的发生与是否存在IDM无关[RR=1.05,95%CI:(0.92~1.21),P=0.471],欧洲组新生儿PDA患儿母亲IDM的患病率是新生儿非PDA组的2.45倍,差异有统计学意义[RR=2.45,95%CI:(1.98~3.02),P<0.001];队列研究亚组与病例对照研究亚组、妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)亚组与孕前糖尿病(pregestational diabetes mellitus,PGDM)亚组相比较,均提示新生儿PDA的发生与是否存在IDM无关。敏感性分析显示研究结果稳定可靠,无显著发表偏倚。结论新生儿PDA的发生与是否存在IDM无关。