过表达miR-122-5p通过靶向调控NOD2对帕金森病模型细胞损伤的保护作用及其机制

目的探讨微小RNA-122-5p(miR-122-5p)对帕金森病(PD)模型细胞损伤的保护作用及其分子机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立MPP+诱导SH-SY5Y细胞PD模型。分为Con组、MPP+组、MPP++miR-NC组、MPP++miR-122-5p组、MPP++si-NC组、MPP++si-NOD2组、MPP++miR-122-5p+pcDNA组、MPP++miR-122-5p+pcDNA-NOD2组。qRT-PCR与Western印迹检测miR-122-5p、核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)2的表达;流式细胞术检测细胞凋亡率。双荧光素酶基因报告法验证NOD2是否为miR-122-5p的靶基因。Western印迹法检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2的表达;采用化学比色法检测细胞内丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量。结果MPP+组SH-SY5Y细胞中miR-122-5p的表达水平明显降低,NOD2 mRNA及蛋白表达水平明显升高(均P<0.001);转染miR-122-5p mimics或si-NOD2后,细胞凋亡率显著降低,MDA含量与Bax表达水平显著降低,GSH含量与Bcl-2表达水平显著升高(均P<0.001);miR-122-5p可负性调控NOD2的表达;NOD2过表达可逆转miR-122-5p过表达对MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。结论过表达miR-122-5p通过靶向调控NOD2对PD模型细胞损伤具有保护作用,其机制可能是通过抑制细胞凋亡及增强抗氧化能力而发挥作用。