人TPO全长分子在大肠杆菌中的表达及其活性分析

利用反转录－ＰＣＲ从人胎肝中获得编码血小板生成素（ｈＴＰＯ）全长ｃＤＮＡ，在大肠杆菌中表达了人ＴＰＯ全长分子。电镜观察结果，目的蛋白在菌体内以包涵体形式存在，表达量约占菌体总蛋白的２７％；表达产物经初步纯化后，与ＣＯＳ－７细胞中表达的人ＴＰＯ３５３个氨基酸全长分子分别做ＢＡＬＢ／ｃ小鼠体内活性分析，结果表明，原核与真核系统表达的ＴＰＯ均具有明显促进血小板生成的作用。这为进一步研究ＴＰＯ的糖基化与其生物学活性及半衰期关系打下基础。

一种高活性人新型TNF的研制

肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）除抗肿瘤活性外，还具有其它广泛的生物学活性，但因其严重的毒副作用极大地限制了它的临床应用。在ＴＮＰ结构与功能关系研究的基础上，该文作者利用ＰＣＲ技术构建了一种新型人ＴＮＦ的编码基因，并使其在大肠杆菌中进行了高效表达。活性测定结果表明，新型ＴＮＦ对Ｌ９２９细胞的细胞毒活性较天然型人ＴＮＰ增高了约７１４倍。