厦门地区2960对育龄夫妇地中海贫血筛查及基因检测结果分析

目的初步了解并分析厦门地区育龄青年地中海贫血（地贫）流行情况及其基因分布特征，为地贫基因诊断、遗传咨询及减少地贫漏诊和误诊提供理论依据。方法对2013年4月至2016年4月来本院进行孕前优生健康检查的2960对育龄夫妇进行血常规、血红蛋白电泳、血清铁、铁蛋白筛查，筛查阳性患者通过“PCR＋膜杂交法”进行地贫基因检测。结果2960对育龄夫妇经血液学筛查结果中阳性共1160例（占19．59％），检出地贫基因携带者408例，占6．89％；其中α地贫基因携带者286例，占4．83％，最常见的地贫基因型为-SEA／α α占全部α地贫基因携带者的74．13％；β地贫基因携带者114例，占1．93％，最常见的地贫基因型为CD41—42（-TCTT）和IVS-2—654（C→T），分别占全部β地贫基因携带者的34．21％和32．46％；α地贫复合β地贫基因携带者8例，占0．14％。结论厦门地区地贫基因突变类型复杂多样，α地贫基因携带者最常见的基因型为-SEA／α α ，β地贫基因携带者最常见的基因型为CD41-42（-TC皿和IVS-2—654（C→T）；对于血液学筛查阳性的人群，进一步进行地贫基因诊断，可避免漏诊误诊，更好的为临床地贫诊断和遗传咨询提供依据。

芹菜素通过PI3K/Akt信号通路诱导Hela细胞凋亡

目的:初探芹菜素(Apigenin)对人宫颈癌细胞Hela的抑制机制。方法:MTT法检测Apigenin对Hela细胞的增殖抑制作用,实时无标记细胞分析技术测量Apigenin对Hela细胞生长曲线的影响。Western blot检测Apigenin对Hela细胞中PI3K/Akt信号通路的影响。结果:与阴性对照组相比,Apigenin能显著抑制Hela细胞的增殖(P<0.01),当药物浓度为20μmol/L时抑制率达到(80.5±5.3)%,IC50值为(6.8±0.8)μmol/L。细胞生长曲线反映,Apigenin减缓了Hela细胞的增殖,对数期细胞经20μmol/L Apigenin处理后,细胞数量迅速下降。Western blot结果显示,Apigenin能显著抵抗IGF-1引起的Akt激活但并不能降低PI3K的磷酸化水平。同时Apigenin还能降低Bcl-2/Bax比例,提高Caspase-3活性,启动细胞线粒体凋亡。结论:Apigenin可以通过PI3K/Akt信号通路促进Hela细胞的凋亡。

藤黄酸对人肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察藤黄酸(Gambogic acid)对人肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测藤黄酸对786-O细胞的增殖抑制作用。流式细胞术检测藤黄酸对786-O细胞凋亡的影响。Western blotting检测藤黄酸对786-O细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及NF-κB通路相关蛋白p65、IκB表达的影响。荧光显微镜观察藤黄酸对NF-κB活性的影响。结果:藤黄酸对786-O细胞的增殖抑制率具有显著的剂量依赖性,在作用48h后其IC50值为(3.4±0.3)μmol/L。细胞凋亡实验发现,藤黄酸能有效的诱导786-O细胞凋亡,随药物浓度增加细胞凋亡比例逐渐增大,当药物浓度达到4.0μmol/L时凋亡率为(68.1±3.6)%。Western blotting发现藤黄酸能引起Bax蛋白的上调和Bcl-2蛋白的降解,与此同时能抵抗TNF-α诱导导致的IκB降解;荧光显微成像则进一步发现藤黄酸能阻止NF-κB入核。结论:实验表明,藤黄酸能诱导786-O细胞凋亡,主要机制可能是通过其对NF-κB的信号通路的抑制实现的。

姜黄素对Hsp90的结合及抑制作用

目的:研究姜黄素对Hsp90的结合及抑制作用。方法:采用分子模拟对接、等温滴定微量热法及Octet技术检测姜黄素与Hsp90的结合机制。采用变性荧光素酶再复性法检测姜黄素对Hsp90的抑制作用。结果:分子模拟对接结果显示姜黄素与Hsp90的ATPase区域有特异性结合。等温滴定微量热法及Octet测定二者的结合常数分别为2.84×104L/mol和9.79×104L/mol。荧光素酶复性法确定姜黄素能通过对Hsp9 0的抑制作用阻止其对变性荧光素酶进行修复,与阳性对照GA相比(IC50值为1.14μmol/L),姜黄素对Hsp90的IC50值为7.51μmol/L。结论:姜黄素与Hsp90有较强的结合且对其分子伴侣功能具有一定的抑制效果。

P1P^K血型不合引起习惯性流产的血清学及分子生物学研究1例

目的对1例疑为P1PK血型不合引起习惯性流产患者进行血清学及分子生物学研究,明确患者血型及抗体特异性,阐述其分子遗传机制。方法采用血清学方法鉴定患者及3个家系成员ABO、P1PK血型及血清中意外抗体;PCR扩增编码P1P^k的α1,4-半乳糖基转移酶基因(α1,4-galactosyltransferase gene,A4GALT)第3外显子编码区序列,测序分析DNA序列,并做家系调查。结果血清学试验证实患者及其姐姐均为P1PK血型系统的p表型,患者血清中存在抗-PP1PK(抗-Tja)抗体,测序结果显示患者及其姐姐均在第3外显子出现903C>G(CCC>CCG)的等位基因突变。结论患者为罕见的p表型,由P1PK血型不合导致血清中产生的抗-PP1PK抗体引起患者习惯性流产,A4GALT基因第3外显子的903C>G突变可能是患者p表型形成的分子基础。

负压封闭引流技术中负压值对治疗效果的影响研究

[目的]研究创面负压封闭引流技术中负压值对治疗效果的影响,为设置合理有效的负压值提供依据。[方法]对我院2010年6月—2012年4月收治的45例创面情况相似的病人采用VSD治疗,随机分成3组,观察1组应用较高的负压值(-370mmHg^-350mmHg),观察2组应用中间负压值(-270 mmHg^-250 mmHg),观察3组应用较低的负压值(-170 mmHg^-150 mmHg),观察创面引流量、疼痛评分、堵管发生次数和肉芽组织生长时间。[结果]负压值对引流量、病人疼痛程度产生正影响,对堵管发生次数有负影响,在-170 mmHg^-150 mmHg区间内,负压值对缩短肉芽生长时间有显著影响。[结论]负压值选择-370 mmHg^-250mmHg较为合理,同时在临床护理实践中要根据病情合理设定负压值。

Bm亚型鉴定1例及相关知识复习

目的鉴定1例Bm亚型并复习相关知识。方法综合应用血清学实验方法，包括血型鉴定、不规则抗体筛查及直／间接抗人球蛋白试验、吸收放散实验、被测者唾液血型物质测定，对1例ABO血型系统Bm亚型进行鉴定。结果被测者ABO血型鉴定结果为正定型为O型，反定型为B型；不规则抗体筛查试验结果阴性；直接、间接抗人球蛋白试验结果阴性；红细胞吸收放散试验中，原标化抗B试剂效价从1：32降低至1：16，放散液抗B效价1：16，即被测者红细胞含有极弱的B抗原；唾液血型物质检测中，原标化的抗B、抗H效价均从1：32降低至1：16，故唾液中同时含有B物质和H物质。结论该被测者ABO血型为Bm亚型，综合应用血清学实验方法可有效提高ABO血型检测结果的准确性。

156例高血铅男性患者精液质量及性激素水平分析

目的探讨高血铅对男性精液质量及性激素水平的影响。方法选择156例高血铅男性患者为高铅组，对照组为180例已生育健康正常男性。采用SQA—V型精子质量分析系统对队上两组实验对象精液标本的各项主要参数进行对比分析，同时采用化学发光法进行血清泌乳索（PRL）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）和雌二醇（E2）检测。结果高铅组男性的精子密度、活率、前向运动率及正常精子形态率分别为（54．16±18．89）×10^6／ml、（42．47±15．72）％、（26．50±10．08）％和（9．67±6．12）％，均明显低于对照组的（68．33±27．81）×10^6／ml、（57．90±19．87）％、（35．03±8．82）％和（13．38±8．25）％；高铅组男性血清FSH和LH分别为（11．57±5．19）mlU／ml、（9．76±4．05）mlU／ml，明显高于对照组的（7．50±3．26）mlU／ml、（5．41±2．53）mIU／ml；高铅组男性T水平为（2.31±1.16）ng／ml，明显低于对照组的（6．97±2．28）ng／ml；两组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论高血铅会对男性精液质量及性激素水平产生不良影响，造成男性生育能力下降。

Heregulin通过Her2激活SKBR3细胞内IKK/NF-κB信号通路

目的:初探Her2激动剂Heregulin(HRG)对人乳腺癌SKBR3细胞内IKK/NF-κB信号通路的激活机制。方法:Western blotting法检测HRG对SKBR3细胞中PI3K/Akt/IKK信号通路的影响。以TNF-α/RIP1/IKK这条经典信号通路为对照,引入各通路中关键蛋白(PI3 K、RIP1及IKK)的抑制剂,对比各抑制剂对两条通路的影响。实时无标记细胞分析技术监测HRG对SKBR3细胞增殖的促进作用及IKK抑制剂TPCA1对HRG的拮抗作用。结果:HRG与TNF-α均能激活IKK引起NF-κB入核,RIP1的抑制剂Necrostatin-1能阻断由TNF-α引起的IKK活化,但不能阻断由HRG引起的IKK活化,表明HRG并非通过传统的途径激活IKK。PI3K抑制剂LY294002能阻断由HRG引起的IKK激活,PI3K是Her2信号通路的关键蛋白之一,因此推测HRG是经由PI3K/Akt信号通路,完成对IKK/NF-κB通路的激活。细胞生长曲线反映,HRG能促进SKBR3细胞的增殖,TPCA1对HRG具有拮抗作用,对数期细胞经100 nmol/L的TPCA1处理后,细胞增殖受到抑制,数量迅速下降。结论:HRG可以通过Her2/PI3K/Akt途径激活SKBR3细胞内IKK/NF-κB信号通路。

《护士台风灾害救护知识手册》的制作与应用

[目的]编写《护士台风灾害救护知识手册》并探讨其应用效果。[方法]以布卢姆教育目标学理论为依据,结合台风救护训练经验,组织专家规范台风灾害救护知识培训内容,并制订详细教学计划,对140名护士进行培训。[结果]护士参加学习后对台风灾害救援的认知及情感测试得分明显高于学习前(P<0.01),参加学习后的护士止血、包扎、固定、转运、心肺复苏术等技术考核一次通过率均超过90%。[结论]采用《护士台风灾害救护知识手册》对护士进行科学规范的培训可提高护士应对台风灾害的救护水平。

内镜保胆取石手术的探讨

胆囊是人体的重要器官,有储存、浓缩胆汁,调节胆道压力的作用,同时还是人体的免疫器官.随着我国人民生活水平的提高,胆囊结石的发病率还有继续上升的趋势.胆囊切除治疗胆囊结石的理论由德国医生Langenbuch于1882年所创,100多年来,一直是治疗胆囊结石的主要手术方式,但在大量的胆囊结石患者中,是否均需作手术,做何种手术是当今胆道外科中的热点问题.目前治疗胆囊结石的主要方法是胆囊切除,然而随着科学技术的发展,人们对疾病预后的要求越来越高,不仅要治疗疾病,而且还要保留或不损伤某些器官.过去,科学技术不发达,医疗设备、器械落后,胆囊切开取石手术方法简单粗糙,结石取净率低,复发率高,旧的取石保留胆囊的手术方法已被遗弃.近十余年来,由于高科技微创外科器械、设备和内镜诊疗技术的发展应用以及术后护胆防石措施的改善,部分胆囊结石和胆囊息肉患者的保胆愿望得以实现.

肝胃间隙囊性淋巴管瘤一例

患儿5岁5月男性,因“纳差3年,加重伴呕吐3月.”入院;患儿缘于2011年无明显诱因出现纳差,无腹痛、腹胀、腹泻、返酸、嗳气等不适,未予重视;2014年2月左右纳差加重,伴饭后呕吐,呕吐物为胃内容物,自行服用中药（具体不详）,上述症状无缓解,在当地医院治疗无明显好转,为进一步诊治今就诊我院,门诊查CT示肝胃间隙巨大囊性占位,考虑囊性淋巴管瘤可能,遂于2014年5月5日收入我院肝胆外科.入院查体：腹部正常,未见肠形及蠕动波,未见腹壁静脉曲张,全腹软,无腹肌紧张,无压痛反跳痛,未触及包块,肝脾肋下未触及,胆囊未触及明显异常,墨菲氏征（一）,双肾未触及,腹部叩诊呈鼓音,移动性浊音阴性,肝区无叩击痛,脾区无叩击痛,双侧肾区无叩击痛.肠鸣音正常.

特异性自身抗体引起交叉配血不合1例分析

随着输血事业的逐步发展,输血工作也越来越复杂化,多样化。而交叉配血试验是确保输血安全最关键的环节。自身抗体导致的交叉配血困难是临床输血工作中经常遇到的难题之一,同时自身抗体的鉴定又为临床提供了很重要的输血治疗依据,本文就1例特异性自身抗体引起交叉配血不合患者导致的临床输血困难进行阐述分析如下。

缺血性脑血管病合并脑微出血患者认知功能与UA、hs-CRP的关系分析

目的探讨UA、hs-CRP水平与缺血性脑血管病合并脑微出血患者认知功能的关系,了解其危险因素对缺血性脑血管病合并脑微出血患者认知功能造成的影响。方法选取2016年1月至2018年1月收治的100例缺血性脑卒中患者,按照患者是否合并CMB分为脑卒中组以及脑卒中合并CMB组,每组50例。对全部患者的认知功能采取蒙特利尔量表认知功能评分,并根据免疫散射比浊法对hs-CRP进行检测,根据尿酸酶法对UA进行检测,对其相关性进行分析,并对缺血性脑血管病合并脑微出血患者认知功能障碍的危险因素进行分析。结果脑卒中合并CMB组与脑卒中组相比,抽象思维、语言能力、注意力和计算力、定向力、视空间及执行功能以及延迟回忆评分均明显降低。脑卒中合并CMB组患者血清中UA、hs-CRP明显高于脑卒中组患者,其血清中UA、hs-CRP分别为(254.12±35.23)μmol/L、(11.03±4.83)μmol/L;且缺血性脑血管病合并脑微出血患者UA浓度与MoCA评分呈负相关(r=-0.348,P=0.031),hs-CRP浓度与MoCA评分呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.261,P=0.004);缺血性脑血管病合并脑微出血患者UA与hs-CRP水平呈正相关(r=0.180,P=0.023)。Logistic多因素分析结果显示,教育年限(OR=0.712,P=0.022)属于缺血性脑血管病合并脑微出血认知功能障碍的独立保护因素,糖尿病(OR=17.455,P=0.024)、高血压(OR=25.360,P=0.019)、既往史卒中或短暂性脑缺血发作史(OR=5.312,P=0.020)、尿酸(OR=1.754,P=0.003)、超敏C-反应蛋白(OR=2.483,P=0.004)等属于缺血性脑血管病合并脑微出血认知功能障碍的独立危险因素。结论 UA、hs-CRP可能是影响缺血性脑血管病合并脑微出血患者认知功能障碍的关键因素;UA、hs-CRP浓度的变化与神经心理量表评测相结合,可作为评估患者认知功能的有效诊断指标。

体外冲击波联合康复治疗对早中期膝骨关节炎病人Coll2-1、COMP水平的影响病人

目的探讨体外冲击波联合康复治疗对早中期膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)病人的治疗效果及其对关节液中胶原蛋白2-1(Collagen2-1,Coll2-1)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)水平的影响。方法选取2014年6月至2016年12月间收治的72例膝骨关节炎病人,随机分为对照组(36例)和观察组(36例),对照组病人给予关节腔内注射玻璃酸钠治疗,观察组给予体外冲击波治疗,且两组均给予康复理疗措施。分别在治疗前及治疗后2个月时,采用活动时疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分、骨关节炎病人疼痛指数(Lequesne index)和美国西部安大略和麦克马斯特大学(the Western Ontario and Mc Master Universities,WOMAC)骨关节炎指数评价两组的疗效,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定关节液中Coll2-1、COMP的含量。结果两组病人治疗后的VAS评分、Lequesne指数、WOMAC评分均明显降低(P均<0.05),治疗后观察组各项评分明显低于对照组(P均<0.05)。治疗后两组病人关节液中Coll2-1、COMP的水平均比治疗前显著下降(P均<0.05),观察组下降程度明显优于对照组(P均<0.05)。结论体外冲击波联合康复治疗对膝骨关节炎病人的疗效较好,可明显减轻关节疼痛,改善膝关节活动功能,且明显降低病人关节液中的Coll2-1、COMP水平。

心电散点图在心律失常快速诊断中应用价值分析

目的:探讨心律失常应用心电散点图进行快速诊断的临床价值。方法:回顾性分析笔者所在医院120例体检患者临床资料,并采用动态心电图记录仪记录受检对象24 h心电信号,然后再利用计算机自动检测技术对患者心电情况进行分析,绘制患者24 h心电散点图。将心电散点图诊断结果与临床诊断结果进行比较和分析。结果:室上性早搏诊断符合率96.43%(27/28),室性早搏诊断符合率89.29%(25/28),心房颤动诊断符合率100%(9/9),差异传导诊断符合率80%(4/5)。室上性早搏组和室性早搏组的斜率分别与其他组相比较,差异有统计学意义(P<0.05),心房颤动组与差传组的斜率相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:心电散点图应用于心律失常快速诊断中具有较高临床价值,应用简单快捷,图形直观,尤其对室性早搏、室上性早搏、心房颤动和差异传导的诊断上优势明显。

miR-78抑制心肌部分梗死模型大鼠心肌纤维化机制探讨

目的探讨microRNA-78(miR-78)抑制心肌部分梗死模型大鼠心肌纤维化的作用机制。方法采用结扎左前降支建立大鼠心肌梗死模型,分析miR-78在模型大鼠心肌梗死部位的表达,采用miR-78前体慢病毒载体过表达来分析miR-78在大鼠心肌梗死过程中的作用。评价心肌功能,并测定纤维化相关因子Ⅰ胶原(COL1)和ACTA2表达水平。从新生的大鼠中分离出心肌纤维化细胞,进行荧光素酶试验,转染野生型或突变型GATA43’UTR质粒和miR-78,研究GATA4和miR-78表达水平之间的关系。并通过转染GATA4特异性小干扰RNA验证COL1和ACTA2表达水平的变化。结果与假手术组相比,手术组I区和B区的miR-78表达水平均显著降低(P<0.05),术后2周的表达水平降低最明显,术后4周表达水平略有升高。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)结果显示,premiR-78组的miR-78水平明显高于转染对照组(P<0.05);转染对照组梗死面积约为50%,但miR-78过表达后,梗死面积明显减少至约30%。假手术组左室射血分数(LVEF)约为60%,术后降至约20%;左室缩短率(LVFS)由手术前的30%左右减少到手术后的15%左右,miR-78表达水平明显恢复。心肌梗死诱导后COL1 m RNA和ACTA2 m RNA表达水平均明显升高(P<0.05),而miR-78过表达时两者均受到抑制(P<0.05)。当靶序列发生突变(mut-GATA43’UTR)时,miR-78的过表达对荧光素酶活性影响不显著(P>0.05);Si-GATA4组与对照组相比,GATA4 m RNA显著下调表达水平(P<0.05);当GATA4被抑制时,COL1和ACTA2的蛋白水平均被抑制。结论miR-78可抑制心肌部分梗死模型大鼠心肌纤维化,作用机制可能为下调GATA4表达,导致COL1和ACTA2的表达下调。

滋心阴胶囊联合西药治疗冠心病心绞痛患者的机理探讨

目的:研究滋心阴胶囊联合西药治疗冠心病心绞痛患者疗效,并探讨其中机理。方法:将2015年11月至2016年11月102例冠心病心绞痛患者,采用随机数字表法按1:1分组,51例接受常规西药治疗者归为对照组,51例接受常规西药+滋心阴胶囊治疗者归为联合组,比较两组临床疗效、心电图、血液流变学以及氧化应激水平变化。结果:治疗后,两组心绞痛发作次数和硝酸甘油片使用量明显降低,且观察组降低幅度大于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组心绞痛缓解总有效率94.12%,心电图改善率90.20%,对照组为80.39%和74.51%,两组差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者全血粘度、血浆粘度、纤维蛋白原水平、红细胞聚集指数和红细胞聚集面积均显著降低,红细胞变形指数显著升高,两组血清总抗氧化能力(TAC)、超氧化物歧化酶(SOD)水平显著上升,脂质过氧化物(LPO)和丙二醛(MDA)水平显著下降,且治疗后联合组上升或下降幅度显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者在治疗期间均无未见明显不良反应。结论:滋心阴胶囊用于冠心病心绞痛治疗,可明显提升临床疗效,改善患者症状,其作用机理可能与改善患者血液流变学水平,降低机体氧化应激反应有关。

抑制热休克蛋白90活性对HepG2细胞迁移的影响和相关机制

目的:通过抑制热休克蛋白90(heat shock protein 90 beta,Hsp90β)的活性,检测其对HepG2细胞迁移的影响。方法:使用已知的Hsp90抑制剂Ganetespib靶向抑制Hsp90β蛋白活性,检测Hsp90β抑制后细胞内Akt介导的细胞迁移相关信号通路的影响;RT-PCR实验检测Ganetespib对MMP-9及COX-2基因的调节作用;划痕实验检测抑制Hsp90β活性对细胞浸润侵袭作用的影响。结果:Ganetespib对Hsp90的表达量影响较小(P>0.05),但能有效降低Akt的磷酸化程度,且该程度与Ganetespib用量呈正相关(P<0.01);对Akt/NF-κB信号通路检测发现Ganetespib能显著降低IκB的磷酸化水平,进而阻止NF-κB入核发挥转录作用;此外,RT-PCR检测显示受Ganetespib的影响,NF-κB的下游转录基因MMP-9及COX-2均出现不同程度的下调[MMP-9下降(42.7±3.7)%,P<0.01;COX-2下降(45.3±5.2)%,P<0.01];划痕实验表明,HepG2细胞的迁移率受Ganetespib的影响,与其剂量呈正相关。结论:Hsp90β对HepG2细胞迁移活性有重要的影响,其机制可能是通过阻断Akt/IKK介导的NF-κB转录活性实现的。

3.0T MR扩散加权成像在乳腺浸润性导管癌鉴别诊断中的价值

目的回顾性分析3.0T MR扩散加权成像对乳腺浸润性导管癌的诊断价值。方法纳入我院经手术病理证实为青年型乳腺病变的患者106例,所有病例均行3.0T MR扩散加权成像以及X线检查,对病灶的MRI特点进行分析。结果青年型良恶性病变的形态表现以及两者的边缘特征有显著统计学意义(P<0.05);青年乳腺良恶性病变T1WI和T2WI信号强度分布有差异,但是两指标在良恶性中的信号分布差异无显著统计学意义(P>0.05);恶性病变的ADC值显著低于良性病变(P<0.05);3.0T MR扩散加权成像显示诊断乳腺浸润性导管癌的敏感度为97.6%,特异度为77.8%,阳性预测值为87.2%,阴性预测值为95.5%,准确度为89.9%,各项指标均高于X线检查。结论3.0T MR扩散加权成像检查可为乳腺浸润性导管癌的诊断提供极其重要的依据,能提高疾病的鉴别诊断。