巨噬细胞移动抑制因子促进有氧糖酵解与直肠癌细胞耐药性的关系

目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在结直肠癌细胞耐药中的作用和机制。方法:用5-氟尿嘧啶(5-FU)药物浓度持续递增法诱导人结直肠癌细胞株LoVo细胞构建5-FU耐药的人结肠癌LoVo/5-FU细胞。检测指标包括细胞对5-FU的敏感性(IC_(50))、细胞MIF蛋白表达、细胞葡萄糖摄取水平、细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞培养基上清中乳酸水平,分别用CCK-8法、Western blot、2-NBDG法、微孔法、试剂盒法检测。比较LoVo/5-FU细胞与亲本LoVo细胞间上述指标的差异,并检测用siRNA或慢病毒技术干扰或过表达MIF蛋白,或用PFKFB3抑制剂PFK-15抑制有氧糖酵解后,LoVo/5-FU细胞上述指标的变化。结果:成功构建LoVo/5-FU细胞,该细胞的MIF蛋白表达、对5-FU的IC_(50)、葡萄糖摄取、LDH活性和乳酸生成水平都较其亲本LoVo细胞明显升高(均P<0.05);在LoVo/5-FU细胞上,siRNA干扰MIF后表现为MIF蛋白表达、对5-FU的IC_(50)、葡萄糖摄取、LDH活性和乳酸生成水平均明显减少,而MIF蛋白过表达后表现为上述指标的明显升高(均P<0.05);用PFK-15抑制有氧糖酵解后,LoVo/5-FU细胞对5-FU的IC_(50)、葡萄糖摄取、乳酸水平均明显降低(均P<0.05),但LDH活性无明显变化(P>0.05),PFK-15对MIF过表达的LoVo/5-FU细胞也有同样作用(均P<0.05)。结论:MIF通过上调LoVo细胞有氧糖酵解,诱导其对5-FU耐药能力的增加。