细胞病理学继续医学教育办班模式初探

随着新的医学诊断模式的确定,细胞病理学诊断模式相继也发生了巨大变化,继续医学教育已成为细胞病理工作者更新知识,跟上科技发展的必然选择,新近,我们举办了一期“细胞学及新技术应用”继续教育学习班,从细胞病理更新观察,制定方案,具体实施,信息反馈,展望未来等多方位进行了探讨,旨在建立一套办班方法训练思路,推动细胞病理医师的继续教育。

冰乙酸性大鼠胃溃疡模型的建立及溃疡胃窦粘膜的光镜和透射电镜观察

目的建立冰乙酸性大鼠胃溃疡模型,并对溃疡胃窦的粘膜组织结构进行光镜和电镜观察。方法 31只Wistar大鼠随机分为冰乙酸0.01mL组、冰乙酸0.05mL组、冰乙酸0.01mL组,生理盐水0.01mL组、生理盐水0.05mL组、生理盐水0.01mL组,和正常对照组。以1mL注射器在各处理组大鼠胃窦前壁注入相应剂量的冰乙酸或生理盐水。对各组大鼠进行大体观察,对发生典型胃溃疡组大鼠和正常对照组大鼠的胃窦组织进行光镜、电镜观察。结果冰乙酸0.05mL组大鼠胃窦前壁粘膜面发生溃疡,冰乙酸0.01mL组鼠胃未见明显溃疡,冰乙酸0.01mL组大鼠胃窦前壁穿孔,生理盐水0.01mL组、生理盐水0.05mL组、生理盐水0.10mL组和正常对照组大鼠胃窦均无溃疡。光镜观察见冰乙酸0.05mL组大鼠胃窦溃疡部位粘膜腺体正常结构消失,溃疡边缘粘膜腺体间质充血水肿和结缔组织增,电镜观察见冰乙酸0.05mL组大鼠溃疡边缘胃窦粘膜粘液细胞、壁细胞、主细胞存在超微结构改变,并见坏死细胞和凋亡细胞等细胞。结论大体、光镜和电镜三水平的观察表明,以大鼠胃窦前壁注入0.05mL冰乙酸所建立的胃溃疡模型最为典型。

海水中火器伤早期犬血浆氧自由基和NO的变化

目的 观察海水中火器伤伤后早期犬血浆氧自由基和一氧化氮 (NO)的变化 ,为早期救治方案提供科学依据。方法 将 16只普通级毕格犬随机分为海水中致伤组 (n =14 )和地面致伤组 (n =2 ) ;海水组于海水中枪伤后救出 ,连续监测早期血流动力学变化 ,在 (33 75± 2 5 2 9)min时经中心静脉测压管采血观察丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、NO的变化。地面组作为观察对照。结果 海水中火器伤伤后与实验前相比MDA升高有非常显著性意义 (P <0 0 1) ,SOD、NO无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;地面火器伤伤后与实验前相比MDA、SOD、NO均无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,但MDA、NO呈升高而SOD呈下降趋势。火器伤伤后海水组与地面组比较MDA、SOD、NO均无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,但NO和SOD明显增高 ,而MDA明显下降。结论 海水中火器伤伤后早期MDA、SOD逆向紊乱变化是其死亡率高的原因之一 ;海水中火器伤可使机体内脂质过氧化物反应增强并产生紊乱 ,MDA是反映最灵敏的指标。

早期血流动力学监测在海水中火器伤初步救治中的应用

目的 探讨海水中火器伤伤后早期血流动力学的变化特点与初步救治 ,为提高海战救治水平及临床应用提供依据。方法 将 16只普通级毕格犬分为海水中致伤组 (n =14 )和地面致伤组 (n =2 ) ;海水组于海水中枪伤后救出 ,连续监测早期 ( 5 3.6 2± 12 .19min)血流动力学变化并采用相应救治措施。地面组作为观察对照。结果 海水组死亡率随头颅、胸、腹、肢体受伤部位不同而呈递减趋势 ,早期血流动力学出现紊乱的时间明显比地面组提前 15min ;黄金小时内死亡率 6 4 .3% ,6h内死亡率 78.6 % ,2 4h后死亡率 85 .7%。结论 海水中火器伤严重影响血流动力学的变化 ,对机体亦有损伤 ;监测黄金小时血流动力学并依据其变化进行临床救治有助于提高早期救治成功率 。

大肠肿瘤组织线粒体形态结构定量研究

目的:利用体视学方法,定量研究大肠腺癌、腺瘤及正常黏膜上皮线粒体的超微结构特点和变化规律并阐明其能量代谢的主要途径.方法:手术大肠腺癌8例、肠镜大肠腺瘤8例、大肠癌患者正常黏膜8例.按体视学原理和方法在电镜下随机摄片,以胞质为参照空间,测试腺上皮细胞中线粒体的体积密度(Vv)、表面积密度(Sv)、数密度(Nv)、平均自由程(λ)、形状因子(PE)、改良形状因子(pe)、规化形状因子(RFF)、平均体积(v)及平均表面积(s),比较这些参数在不同组织间的差异.结果:大肠腺癌、腺瘤和正常黏膜三组间比较,参数Sv,Nv,pe,REF值组间差异有显著性(F值分别为0.0 438,0.0184,0.0488,0.0 114,P<0.05).结论:大肠腺瘤线粒体增生明显,较腺癌和正常组织增大,大肠腺癌癌细胞线粒体减少.

3,4′,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖苷对大肠癌细胞系蛋白激酶C的抑制效应

目的研究3,4’,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖苷(3,4’,5,-trihydroxystibene-3-β-mono-D-glucoside,THMG)对大肠癌细胞粘附性、浸润力及蛋白激酶C活性的影响;探讨THMG抗转移作用的信号转导机制。方法利用Boyden小室法等细胞生物学技术检测4种大肠癌细胞(HR8348,Hce-8693,HT29,LoVo)在0.4,0.8,1.6和3.2mmol·L^(-1)等浓度THMG作用下的粘附率、浸润力。[γ-^(32)P]ATP掺入法测定蛋白激酶C活性。结果在3.2mmol·L^(-1)浓度时THMG对HR-8348,Hce-8693,HT-29和LoVo粘附抑制率分别为75.7％,69.4％,67.6％和78.8％,浸润抑制率分别为82.7％,85.7％,89.7％和92.7％,且随着浓度加大,粘附和浸润抑制率提高。3.2 mmol·L^(-1)THMG对HR-8348,Hce-8693,HT-29和LoVo的蛋白激酶C活性抑制率分别是35.1％,36.8％,41.5％,49.6％,呈剂量依赖性关系,与对照组比较具有统计学显著性(P<0.001)。粘附性及浸润力抑制程度与蛋白激酶C活性的抑制程度呈显著性相关(P<0.05)。结论 THMG可能通过抑制蛋白激酶C活性对信号转导系统具有调变作用,THMG对信号转导系统的影响可能是抗粘附抗侵袭效应的重要机制之一。

FAK在大肠癌中的表达及其临床意义

目的:研究黏着斑激酶(FAK)在大肠癌及癌旁组织中的表达及其与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系.方法:应用免疫组织化学LSAB法检测60例大肠癌及癌旁组织石蜡标本中FAK蛋白的表达水平.结果:FAK在癌组织中的表达明显高于癌旁组织(χ2=42.553,P=0.000),低分化癌组织较高分化、中分化组织中FAK的表达水平高(χ2=4.848,P=0.028),浸润程度越深表达越高(χ2=11.518,P=0.001),有淋巴结转移较无转移的组织的表达水平高(χ2=9.613,P=0.002).结论:FAK可能既是一种转化相关酶又是一种演变相关酶.FAK的表达量可作为肿瘤发生、发展过程中一种较有价值的病理指标.

人大肠癌转移相关基因片段的筛选和鉴定

目的:初步筛选和鉴定大肠癌转移相关基因,阐述大肠癌转移的分子机制. 方法:利用抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),在一对来自同一亲本、转移能力不同的人大肠癌细胞株SW620和SW480间,已成功构建了人大肠癌转移促进基因和转移抑制基因的两个cDNA消减文库.从以上两个文库中随机挑取约200个菌液PCR片段,利用Differential screening(DS)方法筛选真正差异表达的cDNA片段,之后通过Northern blot对部分差异cDNA 片段的DS筛选结果进行验证.最后对筛选出的差异cDNA 片段进行测序和同源检索,分析其性质并初步探讨其在大肠癌中转移中的可能机制. 结果:约200个菌液PCR片段经过DS筛选后,共获得29 个真正差异表达cDNA片段,利用Northern blot对其中4 种cDNA片段的表达情况进行验证,结果与DS筛选一致. 然后对29个差异cDNA片段进行测序和同源性分析,得到25个差异表达基因,10个为已知基因,其中5个基因在高转移细胞株SW620中差异表达,可能有促进转移的作用, 包括热休克蛋白10(heat shock protein10,HSP10)、细胞色素氧化酶Ⅱ(cytochrome C oxidaseⅡ,COXⅡ)、有丝分裂调控蛋白dis3人同源物(mitotic control protein dis3 homolog, DIS3)、骨骼肌α1-肌动蛋白(skeletal muscle actin alphal, ACTA1)及血浆淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA);另外5个基因的表达仅见于在SW480低转移细胞株,具有潜在的转移抑制作用,包括egl nine homolog 2(EGLN2)、真核翻译起始因子4A(eukaryotic translation initiation factor 4A,EIF4A)、人细胞色素氧化酶Ⅲ的类似物(similar to cytochrome c oxidase Ⅲ,COXⅢ)、谷胱甘肽S转移酶3(glutathione S-transferase mu 3,GSTM3)及线粒体DNA (mitochondrion DNA,mtDNA).10个已知基因基本上是一些与细胞生长分化、代谢合成、转录、凋亡及信号转导等相关的基因.除DIS3和SAA外,其余基因与大肠癌转移的关系在本研究中首次被报道.此外,还筛选到15个未知基因片段,通过与人基因组序列进行比对,发现其中6个基因定位于5号染色体上,包括4个可能促进大肠癌转移的基因和2个抑制基因.目前这15个未知基因片段已经被GeneBank dbEST库收录,GeneBank登陆号为CD485499- CD485513. 结论:DS技术是一种筛查表达文库的有效途径;细胞的生长分化、转录、凋亡、信号转导等变化可能在大肠癌转移过程中发挥重要作用;5号染色体上可能存在多个与大肠癌转移相关的新基因位点.