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miRNA-126对肺癌A549细胞的增殖、迁移、侵袭及EGFR/AKT/mTOR信号通路的影响 被引量:41
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作者 唐夏莉 焦德敏 +2 位作者 陈君 王剑 陈清勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期458-463,共6页
目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-126对肺癌A549细胞功能的影响及相关的作用机制。方法:利用脂质体试剂Lipofectamine 2000将miRNA-126转染入肺癌A549细胞中,采用real-time PCR法检测转染后各组细胞中miRNA-126的表达;MTT法检测细胞活... 目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-126对肺癌A549细胞功能的影响及相关的作用机制。方法:利用脂质体试剂Lipofectamine 2000将miRNA-126转染入肺癌A549细胞中,采用real-time PCR法检测转染后各组细胞中miRNA-126的表达;MTT法检测细胞活力;台盼蓝拒染实验检测细胞存活数目;细胞集落培养实验观察转染后细胞集落形成;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;Western blot法检测EGFR/AKT/mTOR通路中各蛋白水平的变化。结果:Real-time PCR结果显示,转染miRNA-126组细胞中的miRNA-126表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01),而阴性对照组与空白对照组无显著变化;A549细胞转染miRNA-126模拟物后,细胞增殖和集落形成能力均呈明显下降(P<0.01);肺癌细胞的迁移和侵袭能力也受到明显抑制(P<0.01);Western blot结果显示,转染miRNA-126组细胞中EGFR/AKT/mTOR通路相关蛋白p-EGFR、p-AKT和p-mTOR的水平均有明显降低(P<0.01)。结论:miRNA-126可以显著降低肺癌A549细胞中p-EGFR、p-AKT和p-mTOR的蛋白水平,进而可能抑制其细胞增殖和迁移侵袭能力。 展开更多
关键词 微小RNA-126 EGFR/AKT/mTOR通路 肺癌 细胞增殖
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姜黄素通过下调nectin-4抑制肺癌PC-9细胞的迁移和侵袭 被引量:9
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作者 陈君 焦德敏 +3 位作者 唐夏莉 王剑 李优 陈清勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期271-277,共7页
目的:探讨姜黄素对肺癌PC-9细胞迁移和侵袭的抑制作用及其与nectin-4表达的关系。方法:用MTT、划痕修复和Transwell小室实验检测姜黄素对肺癌PC-9细胞活力、迁移和侵袭能力的影响;用Western blot技术检测姜黄素对nectin-4表达及AKT通路... 目的:探讨姜黄素对肺癌PC-9细胞迁移和侵袭的抑制作用及其与nectin-4表达的关系。方法:用MTT、划痕修复和Transwell小室实验检测姜黄素对肺癌PC-9细胞活力、迁移和侵袭能力的影响;用Western blot技术检测姜黄素对nectin-4表达及AKT通路的影响;经siRNA干扰nectin-4后观察姜黄素对PC-9细胞活力、迁移、侵袭及AKT通路的影响。结果:姜黄素能抑制PC-9细胞活力,10、20μmol/L姜黄素组与对照组相比,划痕修复率降低,穿膜细胞数目显著下降。姜黄素作用肺癌PC-9细胞24 h后,nectin-4表达下调。转染siNectin-4 48 h和72 h后,siNectin-4组比对照组的细胞活力显著降低(P<0.01),划痕修复率及穿膜细胞数目显著下降(P<0.01)。姜黄素与siNectin-4均抑制了PC-9细胞AKT通路的激活。姜黄素与siNectin-4联用时细胞活力降低(P<0.01),划痕修复率、细胞侵袭能力及AKT磷酸化水平下降。结论:在肺癌PC-9细胞中,姜黄素通过下调nectin-4表达、调控下游AKT通路来抑制细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 姜黄素 肺癌 细胞迁移 细胞侵袭 Nectin-4
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心理干预对支气管镜检查患者的影响分析 被引量:5
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作者 卢佳燕 王佳 陈翠珍 《医学理论与实践》 2019年第4期588-590,共3页
目的:探讨对支气管镜检查患者给予心理干预后对其依从性、焦虑情况、术后并发症以及不适感产生的影响。方法:选择我院2016年5月—2018年6月收治的112例支气管镜检查患者作为实验对象;采用数字奇偶法分组后进行支气管镜检查期间护理措施... 目的:探讨对支气管镜检查患者给予心理干预后对其依从性、焦虑情况、术后并发症以及不适感产生的影响。方法:选择我院2016年5月—2018年6月收治的112例支气管镜检查患者作为实验对象;采用数字奇偶法分组后进行支气管镜检查期间护理措施的分析;对照组(56例):选择一般护理措施完成;观察组(56例):选择一般护理+心理干预措施完成;最终就两组支气管镜检查患者的依从性、焦虑情况、术后并发症以及不适感展开对比。结果:观察组患者依从率显著高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组患者术后并发症发生率以及不适感发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组患者焦虑表现显著优于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论:护理人员对于支气管镜检查患者选择心理干预措施进行护理,对于依从性提升、焦虑缓解、术后并发症减少以及不适感降低可以获得确切效果,从而证明心理干预措施应用的可行性。 展开更多
关键词 心理干预措施 支气管镜检查 依从性 焦虑情况 术后并发症 不适感
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地西泮注射液与生理盐水及5%葡萄糖注射液之间的配伍禁忌 被引量:4
4
作者 卢佳燕 《医学信息(中旬刊)》 2011年第7期3313-3313,共1页
地西泮为有机化合物,分子式C16H13ClN2O,分子量284.76。白色结晶粉末。熔点125~126℃。几乎不溶于水,溶于丙酮。作用与利眠宁相似。有镇静、抗惊厥、使横纹肌松弛等作用,适用于精神抑郁性焦虑、紧张、不安、失眠等症。对抗惊厥和对顽... 地西泮为有机化合物,分子式C16H13ClN2O,分子量284.76。白色结晶粉末。熔点125~126℃。几乎不溶于水,溶于丙酮。作用与利眠宁相似。有镇静、抗惊厥、使横纹肌松弛等作用,适用于精神抑郁性焦虑、紧张、不安、失眠等症。对抗惊厥和对顽固性癫痫抑制作用很显著。可由对氯苯胺和苯甲酰氯等合成。 展开更多
关键词 地西泮 生理盐水 5%葡萄糖注射液 配伍禁忌
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NP方案治疗NSCLC24例疗效观察
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作者 冯清仪 解好群 《中华今日医学杂志》 2003年第15期7-8,共2页
目的:观察NP方案治疗NSCLC的疗效和毒性反应。方法:治疗NSCLC24例NBV25mg/m^2,VD,dl,8;DDP60—80mg/m^2,VD,dl。结果:24例中CR2例(8.3%),PRl0例(41.7%),总有效率CR+PR50%。主要毒性反应是骨髓抑制和局部静脉炎,白细... 目的:观察NP方案治疗NSCLC的疗效和毒性反应。方法:治疗NSCLC24例NBV25mg/m^2,VD,dl,8;DDP60—80mg/m^2,VD,dl。结果:24例中CR2例(8.3%),PRl0例(41.7%),总有效率CR+PR50%。主要毒性反应是骨髓抑制和局部静脉炎,白细胞下降和局部静脉炎发生率分别为70.8%、54.2%。结论:NP方案用于治疗NSCLC有较好的疗效和耐受性,值得临床推广、应用。 展开更多
关键词 NP方案 治疗 NSCLC 毒性反应 非小细胞肺癌 诺维本 顺铂
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综合护理干预对老年晚期肺癌患者生存质量的影响 被引量:18
6
作者 陈翠珍 卢佳燕 张小真 《海南医学》 CAS 2019年第1期132-134,共3页
目的探讨综合护理干预对老年晚期肺癌患者生存质量的影响。方法选择2015年1月至2017年2月中国人民解放军第一七四医院呼吸内科收治的82例老年肺癌患者为研究对象,根据随机数表法分为两组,每组41例,所有患者均接受化疗治疗,对照组予肺癌... 目的探讨综合护理干预对老年晚期肺癌患者生存质量的影响。方法选择2015年1月至2017年2月中国人民解放军第一七四医院呼吸内科收治的82例老年肺癌患者为研究对象,根据随机数表法分为两组,每组41例,所有患者均接受化疗治疗,对照组予肺癌常规护理,观察组应用综合护理干预,干预时间为1个月。干预前后采用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)评分并进行比较;采用卡氏生存质量评分(KPS)评价患者的生存质量。结果干预后,观察组患者的SAS、SDS评分分别为(50.6±3.2)分、(52.6±2.9)分,明显低于对照组的(54.2±4.1)分、(56.8±4.6)分,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的KPS评分为(76.6±13.0)分,明显高于对照组的(68.3±11.2)分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论综合护理干预可以有效改善老年晚期肺癌患者焦虑、抑郁等负性情绪,提高生存质量。 展开更多
关键词 肺癌 化疗 生存质量 护理干预
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协同护理模式在肺癌晚期疼痛患者中的应用 被引量:2
7
作者 余赞 仇甜 +2 位作者 刘欢 唐珊 郭艳姝 《临床合理用药杂志》 2018年第13期131-132,共2页
目的观察协同护理模式在肺癌晚期疼痛患者中的应用效果。方法选取2015年1月-2017年6月医院收治的肺癌晚期疼痛患者84例,以随机数字表法均分成观察组和对照组各42例。对照组采用常规护理干预,观察组则在对照组的基础上采用协同护理模式... 目的观察协同护理模式在肺癌晚期疼痛患者中的应用效果。方法选取2015年1月-2017年6月医院收治的肺癌晚期疼痛患者84例,以随机数字表法均分成观察组和对照组各42例。对照组采用常规护理干预,观察组则在对照组的基础上采用协同护理模式干预。分别比较2组干预前后疼痛情况,不良反应发生情况,满意度以及干预前后生活质量情况。结果干预后2组VAS评分均明显低于干预前,而观察组明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。护理后观察组便秘、恶心发生率均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组满意度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后观察组生理领域、心理领域、社会领域、环境领域评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论协同护理模式干预可有效减轻肺癌晚期疼痛患者的疼痛程度,同时有利于降低不良反应发生率,提高患者满意度及生活质量。 展开更多
关键词 肺癌晚期 疼痛 协同护理模式 满意度
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支气管肺泡冲洗治疗老年性严重肺部感染疗效观察
8
作者 刘艳萍 廖建宁 王素美 《福建医药杂志》 CAS 2007年第3期8-10,共3页
目的探讨床旁纤维支气管镜吸痰及支气管肺泡冲洗对老年严重肺部感染的疗效。方法58例患者随机分为治疗组和对照组,治疗组常规纤维支气管镜检查后,反复冲洗,注入被稀释的敏感抗生素。结果治疗组治愈率50.00%,有效率92.86%;对照组治愈率33... 目的探讨床旁纤维支气管镜吸痰及支气管肺泡冲洗对老年严重肺部感染的疗效。方法58例患者随机分为治疗组和对照组,治疗组常规纤维支气管镜检查后,反复冲洗,注入被稀释的敏感抗生素。结果治疗组治愈率50.00%,有效率92.86%;对照组治愈率33.33%,有效率76.67%;两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论保持呼吸道通畅,消除呼吸道黏性分泌物,改善通气和换气是治疗肺部感染的关键。在老年性严重的肺部感染患者,若排痰无力,分泌物多,可考虑辅助纤维支气管镜肺泡冲洗治疗,以提高治愈率。 展开更多
关键词 肺部感染 支气管肺泡冲洗 支气管镜
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G5振动排痰仪在肺部感染患者治疗中的应用和护理
9
作者 洪雪蓉 《医学信息(下旬刊)》 2011年第9期193-194,共2页
目的:通过对肺部感染患者进行振动排痰仪或徒手叩击辅助排痰治疗,观察两组患者肺部感染情况的治疗效果,对比两组辅助排痰方法的治疗效果。方法:将随机选取的96名肺部感染的住院患者分为2组,治疗组使用65振动排痰仪进行胸背部叩击... 目的:通过对肺部感染患者进行振动排痰仪或徒手叩击辅助排痰治疗,观察两组患者肺部感染情况的治疗效果,对比两组辅助排痰方法的治疗效果。方法:将随机选取的96名肺部感染的住院患者分为2组,治疗组使用65振动排痰仪进行胸背部叩击振动辅助排痰,对照组予以传统徒手叩背辅助排痰,观察2组患者肺部感染好转效果。结果:使用振动排痰仪的患者在治疗1周后肺部哆音以及痰量均明显减少,排痰效果显著由于传统的徒手叩击辅助排痰。结论:振动排痰仪辅助排痰效果明显优于传统的徒手叩击方式,可以提高常规抗感染的效果,促进患者病情好转,值得推广和运用。 展开更多
关键词 排痰 医疗仪器 临床应用 护理
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延续护理在提高慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭患者自我管理能力中的作用 被引量:6
10
作者 卢佳燕 陈翠珍 +1 位作者 张小真 胡小凤 《慢性病学杂志》 2019年第2期216-217,共2页
目的探讨对慢性阻塞性肺疾病(COPD)伴有呼吸衰竭患者给予延续护理后在提高自我管理能力方面获得的临床效果。方法选取中国人民解放军第一七四医院2016年3月—2018年6月收治的86例COPD伴有呼吸衰竭患者作为研究对象,采用抽签法分为采用... 目的探讨对慢性阻塞性肺疾病(COPD)伴有呼吸衰竭患者给予延续护理后在提高自我管理能力方面获得的临床效果。方法选取中国人民解放军第一七四医院2016年3月—2018年6月收治的86例COPD伴有呼吸衰竭患者作为研究对象,采用抽签法分为采用常规护理的对照组和采用常规护理基础上进行延续护理的观察组,每组43例。比较两组COPD伴有呼吸衰竭患者心理健康评分及自我管理能力评分。结果护理前,两组COPD伴有呼吸衰竭患者在心理健康评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);护理后,观察组COPD伴有呼吸衰竭患者显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。护理前,两组COPD伴有呼吸衰竭患者在自我管理能力评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);护理后,观察组COPD伴有呼吸衰竭患者显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论护理人员对COPD伴有呼吸衰竭患者采用延续护理,对患者心理健康的改善及自我管理能力的提高效果明显。 展开更多
关键词 延续护理 慢性阻塞性肺疾病 呼吸衰竭 自我管理能力
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Na^+/H^+交换蛋白-1基因调控人肺癌细胞酸碱平衡和凋亡的研究 被引量:4
11
作者 厉为良 钱桂生 +1 位作者 黄桂君 吴国明 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期691-692,共2页
关键词 肺癌细胞 酸碱平衡 细胞凋亡 Na^+/H^2+交换蛋白-1 基因调控
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白细胞介素-17和转化生长因子-β2在哮喘中的表达及意义 被引量:4
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作者 严杰 沈青 +2 位作者 宋嘉 吴丽君 侯振海 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期302-305,共4页
目的探讨哮喘患者外周静脉血白细胞介素-17(IL-17)和转化生长因子-β2(TGF-β2)的表达及其意义。方法收集2014年2月至2016年5月中国人民解放军第一一七医院呼吸内科72例哮喘急性发作患者为哮喘组,18例健康者为对照组。采用ELISA法分别进... 目的探讨哮喘患者外周静脉血白细胞介素-17(IL-17)和转化生长因子-β2(TGF-β2)的表达及其意义。方法收集2014年2月至2016年5月中国人民解放军第一一七医院呼吸内科72例哮喘急性发作患者为哮喘组,18例健康者为对照组。采用ELISA法分别进行IL-17、TGF-β2检测,哮喘患者进行规范化梯度治疗3个月后复测IL-17、TGF-β2、肺功能。结果随着哮喘严重程度的增加,患者IL-17、TGF-β2浓度逐渐增加,第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)逐渐下降,差异有统计学意义(F=37.794、27.557、44.993,P<0.01)。各组间IL-17、TGF-β2差异有统计学意义(P<0.01)。IL-17、TGF-β2水平与患者年龄、体质量指数(BMI)无相关性(P>0.05),与FEV1%pred呈负相关(r=-0.794、-0.468,P<0.01)。IL-17与TGF-β2水平呈正相关(r=0.527,P<0.01)。治疗3个月后,72例哮喘患者IL-17、TGF-β2较治疗前降低,FEV1%pred升高,差异有统计学意义(t=11.619、9.371、12.948,P<0.01);IL-17、TGF-β2水平仍高于对照组,FEV1%pred低于对照组,差异有统计学意义(t=11.007、14.501、8.396,P<0.01)。结论哮喘患者TGF-β2、IL-17表达水平与哮喘发病呈正相关。TGF-β2、IL-17的测定对哮喘严重程度、炎症水平及气道重建程度的评估有参考价值。 展开更多
关键词 白细胞介素-17 转化生长因子-Β2 哮喘 急性发作期 相关性分析
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心理护理干预在改善老年支气管哮喘患者负情绪及提高满意度中的作用 被引量:7
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作者 王佳 卢佳燕 +1 位作者 高建坤 陈翠珍 《慢性病学杂志》 2019年第2期266-268,共3页
目的探讨心理护理干预对老年支气管哮喘患者的负情绪及护理满意度的影响,为提高护理效果作参考。方法选取2016年10月—2018年6月中国人民解放军第一七四医院接受治疗的86例老年支气管哮喘患者,随机分为对照组和观察组,各43例。对照组患... 目的探讨心理护理干预对老年支气管哮喘患者的负情绪及护理满意度的影响,为提高护理效果作参考。方法选取2016年10月—2018年6月中国人民解放军第一七四医院接受治疗的86例老年支气管哮喘患者,随机分为对照组和观察组,各43例。对照组患者给予常规护理,观察组给予心理护理。护理前后,观察并比较两组患者焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)评分及护理满意度。结果护理前,两组SAS和SDS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);护理后,两组SAS和SDS评分均低于本组护理前,且两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者总满意率为97.67%,明显高于对照组的83.72%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论老年支气管哮喘患者实施心理护理干预的效果更加显著,可进一步改善患者负情绪,提高患者护理满意度。 展开更多
关键词 老年 支气管哮喘 心理护理干预 负情绪 满意度
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慢性阻塞性肺疾病加重风险与血纤维蛋白原、C 反应蛋白和白细胞的关系 被引量:1
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作者 鄢锟 童林荣 +1 位作者 李琳琳 刘艳萍 《临床内科杂志》 CAS 2015年第5期325-326,共2页
近年来,慢性阻塞性肺疾病(COPD)的系统性炎症标记物成为热点,临床需要有更多的客观指标来评估 COPD,为其诊治提供更多的帮助。有研究表明,血纤维蛋白原(Fib)、C 反应蛋白(CRP)和白细胞计数(WBC)等均可作为炎症介质用以评估C... 近年来,慢性阻塞性肺疾病(COPD)的系统性炎症标记物成为热点,临床需要有更多的客观指标来评估 COPD,为其诊治提供更多的帮助。有研究表明,血纤维蛋白原(Fib)、C 反应蛋白(CRP)和白细胞计数(WBC)等均可作为炎症介质用以评估COPD 病情[1],但其与 COPD 高风险急性加重的关系,尚待进一步探讨。 展开更多
关键词 纤维蛋白原 C 反应蛋白 慢性阻塞性肺疾病
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鲍曼不动杆菌DsbC蛋白的原核表达及纯化 被引量:1
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作者 谢娜 钱云峰 +2 位作者 许卫国 雷蕾 李冉辉 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第2期164-167,共4页
目的克隆鲍曼不动杆菌二硫键形成蛋白C(DsbC)基因,制备重组DsbC蛋白,为研究其活性奠定基础。方法通过NCBI获得DsbC蛋白序列,分析其生物学性质。采用PCR方法扩增无信号肽DsbC基因,并将其连接到表达质粒pET28a,构建重组质粒pET28a-DsbC,... 目的克隆鲍曼不动杆菌二硫键形成蛋白C(DsbC)基因,制备重组DsbC蛋白,为研究其活性奠定基础。方法通过NCBI获得DsbC蛋白序列,分析其生物学性质。采用PCR方法扩增无信号肽DsbC基因,并将其连接到表达质粒pET28a,构建重组质粒pET28a-DsbC,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后用IPTG诱导DsbC蛋白的表达,采用镍离子亲和层析法纯化目的蛋白。结果 DsbC具有一个信号肽,由2个相同的DsbC蛋白分子构成二聚体。PCR扩增去掉信号肽的DsbC基因大小为636bp,构建的重组质粒pET28a-DsbC经PCR测序验证正确。重组质粒转化DE3后经IPTG诱导,表达分子质量单位为26.1×10^3的DsbC蛋白,经镍柱纯化得到单一电泳条带的重组蛋白。结论使用基因工程的方法表达并经镍柱层析得到高纯度的鲍曼不动杆菌DsbC蛋白,为进一步研究其活性奠定了基础。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 二硫键形成蛋白C 基因克隆 蛋白表达及纯化
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沙眼衣原体LpxA基因克隆及生物信息学分析 被引量:1
16
作者 李德坤 雷蕾 李冉辉 《生物技术》 CAS 2018年第1期44-48,共5页
[目的]克隆沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)LpxA基因并分析其生物学特性。[方法]根据Ct LpxA基因序列设计特异性引物,利用PCR扩增LpxA基因,并把LpxA基因连接到p MD18-T载体,挑取阳性克隆进行PCR和DNA测序验证。最后使用生物信息学软... [目的]克隆沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)LpxA基因并分析其生物学特性。[方法]根据Ct LpxA基因序列设计特异性引物,利用PCR扩增LpxA基因,并把LpxA基因连接到p MD18-T载体,挑取阳性克隆进行PCR和DNA测序验证。最后使用生物信息学软件分析LpxA蛋白的生物学性质。[结果]从Ct基因组中PCR扩增得到840 bp的Ct LpxA基因,该基因共编码280个氨基酸。LpxA蛋白无信号肽,定位在细菌细胞质。二级结构预测得知α-螺旋占19.6%,延伸链占32.8%,β-转角为11.4%,无规卷曲为36%。三级结构预测得知3个相同的LpxA分子组成同源三聚体。预测得知LpxA蛋白有11个B细胞表位。[结论]克隆得到Ct LpxA基因,并预测了其结构和功能。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 LpxA蛋白 基因克隆 生物信息学
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穿透支原体铁蛋白的原核表达、纯化及生物信息学分析
17
作者 何玲 雷蕾 +1 位作者 李冉辉 曾焱华 《生物技术》 CAS 2018年第4期350-354,共5页
[目的]表达纯化穿透支原体(Mycoplasma penetrans)铁蛋白(Ferritin)并利用生物信息学方法分析该蛋白的生物学特性。[方法]从NCBI网站上查到Mpe Ferritin的DNA和蛋白序列,并合成Ferritin基因,设计PCR引物,以合成基因为模板扩增Ferritin片... [目的]表达纯化穿透支原体(Mycoplasma penetrans)铁蛋白(Ferritin)并利用生物信息学方法分析该蛋白的生物学特性。[方法]从NCBI网站上查到Mpe Ferritin的DNA和蛋白序列,并合成Ferritin基因,设计PCR引物,以合成基因为模板扩增Ferritin片段,将其与pET15b载体连接,将连接产物转化到大肠杆菌Top10感受态细胞。挑取阳性菌落,利用PCR和测序验证,提取质粒pET15b-Ferritin并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导目的蛋白表达,并使用Ni2+亲和法纯化Ferritin蛋白。然后用生物信息学方法分析Ferritin蛋白的生物学特性。[结果]Mpe Ferritin基因全长为540 bp,编码180个氨基酸。成功构建重组质粒pET15b-Ferritin,表达并纯化得到Ferritin蛋白。Ferritin蛋白定位于细胞质,无信号肽。它的α-螺旋占71.5%,β-转角占6.7%,延伸链占5.0%,无规卷曲占16.8%。由24个同源Ferritin蛋白分子组成24聚体。[结论]通过基因工程方法纯化得到Ferritin蛋白并分析了Ferritin的生物学性质。 展开更多
关键词 穿透支原体 Ferritin蛋白 基因克隆 蛋白表达与纯化 生物信息学
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