结核分支杆菌Ag85A基因真核表达株的构建

目的 构建结核分支杆菌分泌蛋白Ag85A编码基因的DNA疫苗。方法 以结核分支杆菌H3 7Rv基因组为模板 ,PCR扩增Ag85A编码基因 ,用限制性内切酶消化后 ,插入真核表达载体pVAX1中 ,转化大肠杆菌DH5α ,进行重组子筛选、鉴定。结果 以结核分支杆菌H3 7Rv基因组为模板 ,用Ag85A引物PCR扩增出 10 41bp特异性片段 ,以重组子DNA为模板用Ag85A引物PCR扩增为阳性 ,重组子经限制性内切酶消化后可见目的片段 ,所测定序列与报道的Ag85A序列一致。结论 成功地构建了结核分支杆菌Ag85A基因真核表达株 ,该DNA疫苗的免疫效果有待进一步研究。