医院临床检验样本管理信息化系统开发与应用

医院实际上是个传染源密集的高风险工作场所,尤其是日常工作中涉及大量具有潜在生物危害临床检测样本的检验科,如果样本管理不善易造成病原微生物的传播和扩散,严重的会发生实验室感染、泄露并造成人员伤亡事件[1-2]。为实现生物安全的规范化管理,国家先后出台了《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2008）、《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346-2004）、《病原微生物实验室生物安全管理条例》等一系列法规，检验科也依据这蝗法规建立和完善了生物安全管理制度，但目的多数医院枉制度执行过程中仍然处在人工记录表格的费时费力状态，缺乏高效的样本监管手段。

1种血清戊型肝炎病毒荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立

目的建立一种从血清样本中基于荧光定量PCR的快速检测戊型肝炎病毒的方法。方法 (1)从GeneBank获得包含我国流行的3个基因型的100条戊型肝炎病毒序列。选择合适的序列设计合成荧光定量引物和Tanqman探针。(2)将引物从血清模板中PCR扩增片段在体外转录产物作为荧光定量PCR标准品,同时引入了微量核酸裂解液。(3)取10份临床戊肝阳性患者血清样品,用建立的方法检测,进一步验证该方法。结果该检测技术可以有效检测I型和IV型戊型肝炎阳性患者的血清样本,而对其他病毒传染病患者血清检测为阴性结果,证实该RT-PCR检测技术的特异度较高、可靠性较好。对10份临床血清样品的验证检测进一步证实了该方法快速、便捷、灵敏且重复性好。结论建立了一种适用于中国人群戊型肝炎病毒主要基因型检测的荧光定量RT-PCR检测技术。可满足戊型肝炎病毒临床早期快速诊断的需求。

T细胞免疫应答在乙型肝炎病毒感染者诊断中的应用及对免疫调节治疗的影响

目的探讨T细胞免疫应答水平的检测在乙型肝炎病毒感染者诊断以及免疫调节治疗中的价值。方法选择2013年7月至2014年2月就诊并符合纳入标准的40例患者,于治疗前及免疫调节治疗1个月、3个月采集外周血,同时选择同期健康体检者40例作为对照,分别对血清ALT、AST及T淋巴细胞亚群进行检测及统计学分析。结果与对照组比较,慢性乙型肝炎患者外周血CD3+T、CD4+T淋巴细胞亚群百分数、CD4+/CD8+T细胞比值显著降低(P<0.01),免疫调节治疗过程中,各指标均逐渐升高(P<0.01)。而慢性乙型肝炎患者血清ALT、AST及外周血CD8+T淋巴细胞亚群百分数水平则显著高于对照组(P<0.01),经免疫调节治疗,各指标水平逐渐下降(P<0.01)。慢性乙型肝炎血清中ALT、AST水平与CD8+T淋巴细胞亚群百分数(P<0.01)呈正相关;与CD4+/CD8+T比值(P<0.01)呈明显负相关。结论乙型肝炎病毒感染患者感染期及免疫调节治疗不同阶段T细胞免疫应答水平不同,对乙型肝炎病毒感染者的诊断以及免疫调节治疗有指导意义。

化学发光酶免疫分析法定量检测人血清层粘连蛋白

目的建立检测人血清层粘连蛋白(LN)的化学发光酶免疫分析法(CEIA)。方法用3μg/mL抗人LN单抗包被微孔板制成固相抗体,辣根过氧化物酶标记抗人LN单抗浓度为1∶2 000,建立检测人血清LN浓度的CEIA法。评价该法的线性范围、灵敏度、稳定性等性能指标;并与ELISA法检测LN进行比对;初步检测100例健康献血员血清LN水平。结果该法线性范围为22～1 635 ng/mL,灵敏度为12.2 ng/mL,批内、批间变异系数均<10%,检测高、中、低值LN血清的回收率分别为100.9%、95.2%和105.0%;试剂在4℃和37℃条件下至少稳定7 d;健全性良好;与ELISA法检测LN结果差异无统计学意义(t=0.299,P>0.05);100例健康献血员LN水平为(44.9±16.3)ng/mL。结论成功建立定量检测LN的CEIA法,该法性能较好,可用于临床检测。

降钙素原和C反应蛋白水平差值在早产儿败血症中的诊断价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)变化差异在早产儿败血症中的诊疗价值。方法选取该院2016年6月至2017年6月收治,且临床确诊为败血症的25例早产儿为研究对象,将其与同期在该院接受治疗的30例非败血症早产儿的检测结果做对比分析。设初次血培养时间为d0,分析d-1,d0,d1,d2和d3的PCT、CRP及白细胞(WBC)检测值及差值变化。结果败血症早产儿PCT、CRP和WBC在d-1开始升高,d0达最高值,之后逐渐下降;PCTd0、CRPd0和WBCd0均值分别为12.09ng/mL,48.13mg/L,4.63×109g/L。非败血症早产儿未发现明显变化趋势;败血症早产儿△PCTd-1-0为10.87(0.16,57.13)显著高于非败血症早产儿△PCTd-1-00.39(0.02~2.31),差异有统计学意义(P<0.05)。对于早产儿败血症诊断,△PCTd-1-0诊断价值显著高于△CRPd-1-0(P<0.05);△PCTd-1-0Cut-off值为1.49时,AUC为0.91,诊断特异性为0.96,敏感性为0.73。△CRPd-1-0Cut-off值为15.40时,AUC为0.69,对早产儿败血症诊断特异性和敏感性分别为0.86和0.69。92%的败血症早产儿(23例)PCT在治疗第3天恢复至正常水平。结论△PCT和△CRP检测可作为临床早期诊断新生儿细菌感染的重要指标。△PCT对新生儿败血症的诊治价值更高,其变化值越大,疾病的危险度越高。

两种降钙素原定量检测试剂盒的比较研究

目的：比较马鞍山国声生物技术有限公司研制的降钙素原（PCT）定量检测试剂盒（免疫层析法）与已批准上市的同类产品检测结果的符合率和定量检测的等效性，判断其研制产品是否符合临床使用要求。方法选取2014年3～4月收集的各类临床标本122例，分别用两种方法进行检测，比较两种试剂盒的检测结果。统计软件采用Bland‐Altman方法分析、回归分析、组内相关分析及Pearson积距相关分析，分析两种检测方法的一致性。结果cutoff值为0．5ng／mL时，两种试剂盒分析的一致性为99．18％；cutoff值为2ng／mL时，两种试剂盒分析的一致性为95．08％。一致性限度值为（0．2057，0．0884），小于专业界值±0．5。Pearson相关系数为0．9795，Spearman相关系数为0．9721，两种试剂盒的检测结果显著相关（P＜0．01）。结论两种试剂盒具有等效性。