肝脏肿瘤标本资源库的建立、维护及管理

目的探讨建立以肝癌组织样本为主的肝脏外科生物样本库及相关数据信息化管理的方法和标准化操作规程,为临床与基础研究提供高质量的临床标本资源平台。方法收集肝脏肿瘤手术患者的血液标本(血清、血浆、白细胞)、组织标本(癌、癌旁、远端正常组织),将处理好的血液标本于-80℃冰箱保存,新鲜组织置液氮保存,定期随机抽取液氮保存的肿瘤组织样本进行RNA、DNA的提取及鉴定。结果现收集并保存有完整临床信息及随访资料的肝脏肿瘤患者血液标本22 103份,组织标本3 319例,其中肝脏肿瘤组织标本807例,包括肝脏恶性肿瘤762例,良性肿瘤23例,肝硬化组织22例。随机抽取组织RNA、DNA鉴定均符合标本质量标准,能够满足后续实验要求。结论初步建立标准化、规范化的肝脏肿瘤标本库,制定了标准化的标本库维护和管理规程,为肝脏肿瘤基础和临床研究提供了宝贵的实验材料。

术前天冬氨酸氨基转移酶血小板比值对肝细胞癌切除术预后的分析

目的:探讨天冬氨酸氨基转移酶血小板比值(APRI)与肝细胞癌(HCC)手术预后的关系。方法:回顾分析在我院接受根治性切除术的228例HCC患者的临床资料。利用ROC曲线获得APRI值最佳截点为1.62,将患者分为低APRI组(APRI<1.62)和高APRI组(APRI≥1.62),比较分析两组患者的临床数据及预后。结果:术前APRI值同术前AST、PLT、HBsAg阳性率、肝脏纤维化、门脉癌栓密切相关。低APRI组患者术后总生存率(50%)显著高于高APRI组(31%)的患者(P<0.01)。多因素分析显示术前APRI值、肿瘤最大横径、肿瘤数目、门静脉癌栓、肿瘤的TNM分期及分化程度均是影响HCC患者术后总生存率的独立预后因素(P<0.05)。结论:术前外周血APRI值同接受根治性手术的HCC患者的预后密切相关,是其独立的预后因素。

重度肺动脉高压患者行肝脏移植手术一例

患者,女,45岁,68kg,因＂间断乏力4年,加重伴腹胀3d＂入院,诊断：自身免疫性肝炎肝硬化失代偿合并腹水,贫血。拟行肝移植手术。既往无心肺病史,患者自述入院前未出现过呼吸困难、气促、胸闷、胸痛等症状,入院20d出现大量腹水后偶有呼吸困难。RR 18次/分,HR 65次/分,BP120/75mm Hg。ECG无异常。胸部X线片示双肺纹理增粗。腹部超声示肝硬化、大量腹水。实验室检查：RBC 2.73×1012/L,Hb 80g/L,Plt 36×109/L,PTa 51%,Alb 15g/L,TBIL 12.2μmol/L,肾功能及电解质正常。

流感病毒为载体重组病毒株rHCV/FLU的构建及初步评价

目的构建及拯救以流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株r HCV/FLU并对其进行评价。方法利用反向遗传学技术,选择流感病毒A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,将HCV 1b亚型的E1抗原基因经序列优化插入到PR8流感病毒NS1片段的特定位置,构建重组质粒p NS1-HCV,测序正确的重组质粒p NS1-HCV与PR8的7个重组质粒p HW191-PB2、p HW192-PB1、p HW193-PA、p HW194-HA、p HW195-NP、p HW196-NA、p HW197-M转染共培养的COS-1和MDCK细胞,经拯救、筛选、鉴定获得流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株,命名为r HCV/FLU,并通过血凝试验、RT-PCR、Western blot、电镜观察病毒形态等方法对重组病毒鉴定。接着,重组病毒接种SPF鸡胚扩大培养、超滤浓缩、蔗糖密度梯度离心纯化。纯化获得的重组病毒抗原,滴鼻免疫Balb/c小鼠,0 d、14 d免疫2次,设置104TCID50、105TCID50、106TCID503个剂量组,初步评价其免疫效果。结果成功拯救重组病毒株r HCV/FLU,血凝效价(HA)为29-10,病毒滴度Log10(TCID50/ml)为6.5。滴鼻免疫小鼠二免后14 d取小鼠血清及脾淋巴细胞,3个剂量组针对流感病毒的血抑(HI)效价均值分别为80、640和1 280,初步证明重组病毒株r HCV/FLU在小鼠体内能够产生较强体液免疫和细胞免疫应答反应。结论成功制备的重组病毒株r HCV/FLU在动物体内具有较好的免疫效果,为新型HCV疫苗的研制提供新的研究策略。

基因间长链非编码RNA?524346在肝细胞癌中的?表达及临床意义

目的检测基因间长链非编码RNA 524346(long intergenic non-coding RNA 524346,LincRNA 524346)在肝细胞癌患者组织(癌、癌旁)及细胞系(正常肝细胞系LO2及肝癌细胞系SMMC-7721、HepG2和Huh7)中的表达情况,探讨LincRNA 524346与肝细胞癌临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR法(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测LincRNA 524346在61例肝细胞癌患者癌组织、配对癌旁组织以及肝癌细胞系的表达水平,分析其与肝细胞癌患者临床病理特征之间的相关性。用受试者工作曲线(receiver operating characteristics,ROC)评价肝细胞癌组织中LincRNA 524346的表达水平在肝细胞癌早期诊断中的效能。结果 LincRNA 524346在83.6%(51/61)肝细胞癌患者的癌组织中较配对癌旁组织表达下调,差异有统计学意义(P<0.01);LincRNA 524346的表达水平与肝细胞癌患者的病理分期(P=0.021)、肿瘤数目(P=0.013)、是否合并门静脉癌栓(PVTT)(P<0.01)、肝硬化(P=0.005)和微静脉浸润(MVI)(P<0.001)具有显著相关性。结论 LincRNA 524346在肝细胞癌组织中表达降低,其有望作为潜在肝细胞癌早期诊断、转移的分子标志物。

肝癌肝切除术中肝血流阻断方法的临床研究

目的:探讨肝癌切除术中不同肝血流阻断方法的合理选择。方法:回顾性分析124例肝癌肝切除患者资料,根据术中血流阻断方法分为A组(51例行全肝入肝血流阻断),B组(38例行选择性入肝血流阻断),C组(24例行选择性出入肝血流阻断),D组(11例行半肝血流完全阻断)。比较4组患者手术时间、肝脏缺血时间、术中出血、输血量,术后肝功恢复情况、术后并发症发生率及病死率等。结果:各组间术前基本情况无统计学差异(均P>0.05)。各组在肝缺血时间、术后并发症发生率及病死率等方面无统计学差异(均P>0.05);C组和D组手术时间明显长于A组(均P<0.05),但术中出血量、输血量均少于A组和B组(均P<0.05);A组术后丙氨酸转氨酶(ALT)总胆红素(TBIL)与水平升高较为明显,前者与其余3组间差异均有统计学意义,后者与B组间差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:肝血流阻断方法的合理选择须由肿瘤大小、位置,术前肝功能状况、潜在肝病、心脑血管状态等因素综合决定,而最重要的是依靠术者的经验与判断力。

近25年我国胆管支气管瘘文献分析:附213例报告

目的:探讨我国胆管支气管瘘(BBF)患者的临床特点。方法:检索1989—2013年发表有关BBF的中文文献,提取患者的临床资料并进行汇总分析。结果:最终纳入51篇文献,共213例BBF患者。BBF患者男女比例为1.22:1,平均年龄为(50.4±11.1)岁,70.1%有既往手术史。BBF患者常见的临床表现有咳胆色素痰(96.5%)、咳嗽(94.5%)、发热(83.8%)、腹痛(79.3%)、胸闷/胸痛(76.2%)、黄疸(59.2%)、呼吸困难(13.5%);原发病因中包括胆管结石(41.8%)、肝包虫(31.0%)、胆道蛔虫(5.6%)、原发性或转移性肝脏肿瘤(5.2%)、外伤(4.7%)、肝脓肿(4.2%)、先天性病因(2.3%)、多种因素(1.9%)、其他单因素(1.9%)及胆囊结石伴胆囊穿孔(1.4%)。90.6%患者接受了外科手术治疗,总体治愈率为89.5%,好转率为3.3%,病死率为6.2%。结论:BBF较为罕见,原发病因较复杂;痰液胆色素检验及ERCP等可快速明确诊断;患者及时接受外科手术等治疗可取得良好的治愈效果。

手助腹腔镜改良Sugiura术治疗门静脉高压症的临床分析

目的：比较手助腹腔镜与开腹改良Sugiura术治疗门静脉高压症的近期临床疗效。方法：2011年1月-2012年3月，将需行改良Sugiura术的56例门静脉高压症患者随机分为手助腹腔镜组和开腹组，每组28例，比较两组术中及术后各项临床指标。结果：两组患者手术均获成功，无术中并发症发生。两组手术时间和术后并发症发生率差异无统计学意义（均P〉O．05），而手术切口、术中出血量、肛门排气时间、腹腔引流液量、术后住院天数比较，手助腹腔镜组均低于开腹组，差异均有统计学（均P〈O．05）。术后随访1～13（平均7．32）个月，两组食管胃底曲张静脉消除率均为100％，均未出现上消化道再出血。结论：手助腹腔镜行改良Sugiura术既具有与开腹改良Sugiura术相同的临床疗效，又具有腹腔镜手术微创的优点。