小鼠烧伤后胰岛素抵抗及安定-氯胺酮的影响

目的 研究烧伤小鼠 2 4h内胰岛素及胰岛素敏感性的时相变化特点 ,初步探讨安定 -氯胺酮麻醉对创伤后胰岛素抵抗的影响。方法 将 90只BALB/C小鼠随机分为正常对照组、麻醉对照组、烧伤组、预处理组 (麻醉后 15min烧伤 )及后处理组 (烧伤后 15min麻醉 )。烧伤组给予背部Ⅲ度 15 %～ 2 0 %烧伤 ,伤后 2、4、6、12、2 4h采血 ;麻醉对照组、预处理组及后处理组均采用安定和氯胺酮麻醉 ,烧伤或麻醉后 4h采血。测定血糖水平 ,采用放免法测定血清胰岛素。结果 烧伤组血糖、胰岛素明显升高 ,其中血糖 2～ 4h达到高峰 ,以后逐渐下降 ,而血清胰岛素 6～ 12h达到高峰 ,至 2 4h仍显著高于正常对照组 ,烧伤组各时相点胰岛素敏感指数均显著低于正常对照组 ,其中 4h最低 ,以后逐渐恢复 ;预处理组、后处理组血糖和胰岛素显著高于正常对照组 ,但比烧伤组 4h明显低 ,而后处理组显著高于预处理组 ;同样发现 ,预处理组胰岛素敏感指数显著高于后处理组 ,但均比正常对照组低 ,比烧伤组 4h高。结论 严重烧伤后早期产生明显的胰岛素抵抗 ,血糖和胰岛素均明显升高 ,而胰岛素敏感性显著降低 ;安定 -氯胺酮麻醉预处理对其具有抑制作用 ,甚至烧伤后给予也有一定作用。

清醒小鼠严重颅脑闭合性撞击伤后外周血TNF-α IL-1β皮质醇和肝脏GR蛋白表达的变化

目的研究小鼠严重闭合性脑创伤后外周血中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化与肝脏糖皮质激素受体(GR)变化的关系。方法利用BIM-III型小型多功能动物撞击机对小鼠清醒致伤,于致伤后30min、2h、8h、24h、48h、72h采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组外周血清中细胞因子的含量,放免法检测皮质醇含量,WesternBlot免疫印迹法检测肝脏GR的蛋白水平的变化。结果致伤后外周血中TNF-α、IL-1β、皮质醇较对照组有明显升高,均具有两个峰值特征;GR在致伤2h后开始出现蛋白水平表达降低,72h仍未完全恢复正常。结论严重颅脑外伤后外周组织存在糖皮质激素抵抗,与TNF-α、IL-1β关系密切。

mRNA致敏树突细胞对胃癌的免疫治疗作用研究

目的:了解DC在胃癌胃黏膜中的功能状态,探讨DC用于胃癌等实体瘤防治的可能性,旨在为胃癌的治疗探索一条新的途径. 方法:利用致敏DC治疗胃癌,以观察其对荷胃癌小鼠的免疫治疗效果. 结果:荷胃癌小鼠经胃癌细胞RNA致敏的DC治疗后,小鼠腹水产生率、肿瘤转移率、动物的存活率、平均瘤体质量等指标分别为75%(6/8)、25%(2/8)、75%(6/8)、(2.04±0.33 g),均优于对照组(P<0.01);局部组织中IL-12、IL-18 和IFN γ的基因表达水平都明显升高(P<0.01);肿瘤局部CD4+、CD8+细胞数量分别为0.71±0.25/μm2和0.67±0.22/μm2, P<0.05),TIL细胞毒活性明显增强. 结论:胃癌RNA致敏的DC,能促进胃癌抗原的提呈并启动和增强局部的抗瘤免疫功能,改善临床症状和生存质量, 对荷胃癌小鼠具有一定的免疫治疗效果.

小鼠烧伤早期肝组织AP-1 DNA结合活性的变化

目的 观察烧伤小鼠早期肝组织AP - 1DNA结合活性的时相变化特点 ,初步探讨烧伤早期应激和炎症反应的分子机制。方法 将 36只BALB/C小鼠随机分为正常对照组和实验组 ,实验组给予背部Ⅲ度 15 %～ 2 0 %烧伤。分别于伤后 2、4、6、12、2 4h用EMSAs测定肝组织AP - 1的DNA结合活性。结果 烧伤后 2hAP - 1的DNA结合活性与正常对照组相比无显著差别 ,4h后AP - 1的DNA结合能力逐渐升高 ,12h达到最大值 ,以后逐渐恢复 ,至 2 4h仍显著高于正常对照组。结论 烧伤早期引起小鼠肝组织AP - 1的DNA结合活性显著增强。

VEGF_(165)正反义表达载体的构建及其对人胃癌细胞VEGF表达的调节

目的构建 VEGF_(165)(vascular endothelial growth factor,血管内皮生长因子)正、反义表达载体,将其转染人胃癌细胞,观察其对胃癌细胞 VEGF 在 mRNA 和蛋白质水平表达的调节作用.方法用限制性内切酶将 VEGF_(165) cDNA 从 pGEM-hVEGF_(165)克隆载体上切下来,以正、反方向插入质粒 pCDNA_3中,构建VEGF_(165)正、反义真核表达载体;用限制性内切酶和 Sanger 双脱氧终止 DNA 测序法证明 VEGF_(165)正、反义表达载体目的基因的序列和方向的正确性;用脂质体将 VEGF_(165)正、反义表达载体转染人胃癌细胞,用 RNA 斑点杂交及免疫荧光流式细胞仪检测 VEGF mRNA 和蛋白质的表达水平.结果酶谱分析及 DNA 测序表明 VEGF_(165)正、反义真核表达载体目的基因的序列及方向正确;转染正义表达载体后 VEGF mRNA和蛋白质表达水平增加(蛋白免疫强度为75.4%;P<0.05 vs 对照组,31.6%),转染反义表达载体后 VFGF mRNA 和蛋白表达水平降低(蛋白免疫强度为8.9%;P<0.05 vs 对照组).结论成功地构建了 VEGF_(165)正、反义真核表达载体;构建的载体能在胃癌细胞内有效表达,调节血管内皮生长因子的水平.

肿瘤辐射敏感性与细胞凋亡

辐射敏感性是肿瘤细胞复杂的生物学现象 ,在辐射诱导的细胞反应中具有不同的组织细胞类型特异性。肿瘤辐射敏感性与辐射诱导的细胞凋亡密切相关 ,并受 p5 3及其相关蛋白、Bcl- 2基因家族蛋白、Fas及神经鞘磷脂 -神经酰胺介导的信号途径、caspases级联反应等调控。