胆管结扎大鼠肝纤维化模型中HSC的分离和培养及PAR_S的表达

目的探讨胆管结扎诱导的大鼠肝纤维化模型的制备和改良的Friedman方法分离和培养肝星状细胞（HSC），以及HSC蛋白酶活化受体（PARs）的表达与HSC活化的关系。方法采用结扎大鼠胆管诱导肝纤维化动物模型，应用改良的Friedman方法和Nycodenz一步密度梯度离心法分离肝纤维化大鼠HSC。病理学检测大鼠肝纤维化分级，免疫组化检测Desmin α-SMA和PARs在HSC的表达，实验同时设立阴性对照。结果模型组大鼠肝纤维化病理学分级第1周为0，第2～3周多为1～2级，第4、5周为2～3级，第6周肝组织结构破坏，肝细胞变性坏死，炎性细胞浸润，病理学分级多为4级。改良的Friedman方法大鼠肝脏可获得5×10^6～1×10^7个细胞，存活率在96％以上，纯度平均为95％～96％。免疫组化检测α-SMA和PARs在培养的HSC于7、14天其表达逐渐增多，二者表达呈一致关系。结论结扎大鼠胆管建立的肝纤维化模型形成时间较短，实验中无有毒物质接触，是肝纤维化的理想模型；改良的Friedman方法分离和培养HSC，在保证HSC纯度的同时，提高了产量和活率，是研究HSC的有效方法；PARs的表达与HSC活化相关。