良性胆管狭窄568例的分类和外科治疗

良性胆管狭窄(benign biliary strictures,BBS)是胆道外科处理中的难点之一,也是影响胆道外科手术疗效的主要因素之一。BBS包括先天性、创伤性、放射性。

模拟失重大鼠肝组织中NF-κB的表达及意义

目的:研究模拟失重环境下大鼠肝脏组织中NF-κB的表达及意义.方法:成年♂Wistar大鼠84只,随机分为模拟失重组和对照组,每组又分别设1、2、3、4、5、6和7d共7个时相点,每时相点模拟失重和同步对照各6只大鼠.采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型.各组大鼠肝组织中NF-κB表达分别应用Western blot和免疫组化PV-6001法进行检测.结果:在尾悬吊1-2d期间,大鼠焦躁不安,饮食量减少,精神较差,活动减弱,2-3d后有所适应,逐渐恢复稳定状态.模拟失重环境下大鼠肝脏NF-κB表达水平明显升高,1、2d悬尾组大鼠肝组织中NF-κB表达率明显高于对照组(F=271.36,P<0.01),其后,NF-κB表达水平呈明显下降趋势(F=60.68,P<0.05),5-7d悬尾组NF-κB表达水平接近对照组,差异无统计学意义.NF-κB阳性产物主要见于实验大鼠肝细胞内,亦见于炎细胞及Kupffer细胞内,可分为胞质型、核型、核浆型等三个类型,单独或混合存在.结论:模模拟失重使大鼠肝脏组织中NF-κB表达发生明显变化,提示在失重环境中肝脏NF-κB的早期高表达和逐渐恢复过程与失重应激反应及失重耐受有密切关系.

肝硬变大鼠肝部分切除术后残肝TGF-α、HGF、PCNA和IGFBP-1s mRNA的变化

目的:探讨肝硬变状态下肝部分切除术后肝细胞和KCTGF-α、HGF、PCNA和IGFBP-1s的mRNA表达,进一步阐明KC在肝细胞再生中的作用。方法:复制我们建立的大鼠肝硬变肝切除模型,分离肝细胞和KC,提取RNA,采用Northern杂交。结果:KC其HGF mRNA表达较肝细胞为早,在术后6h点达到高峰,但肝细胞TGF-α mRNA表达含量明显高于KC的表达。肝细胞IGFBP-1s mRNA的表达含量低,术后6h点相对较高,KC IGFBP-1s mRNA未见表达。肝细胞PCNA mRNA的表达在术后6h其含量达到最低点,明显受抑制。结论:HGF和TGF-α mRNA表达与肝硬变大鼠的肝细胞再生密切相关,而TGF-α是肝细胞再生中最重要的物质。IGFBP-1s mRNA表达降低反应了肝硬变大鼠术后肝细胞代谢明显受损,而PCNA mRNA表达可提示肝细胞增生能力。

大鼠肝部分切除术后肝窦内皮细胞对肝细胞增生的影响

目的:探讨大鼠肝部分切除术后肝窦血管内皮细胞(LSEC) 对再生肝细胞增生的影响. 方法:建立Wistar大鼠70%的肝切除模型和肝窦血管内皮细胞、肝细胞分离与培养方法,在术后不同的时相点分离残肝的肝细胞和肝窦血管内皮细胞,进行培养.实验分组: 肝部分切除组(PO)和假手术组(SO);肝细胞培养分两组:A组(肝细胞)、B组(肝细胞+LSEC上清液),利用放射免疫法测定肝细胞DNA合成率、免疫组化方法测定肝细胞PCNA表达指数的变化. 结果:在术后的6、24 h,B组的肝细胞的PCNA表达指数较A组显著升高(5.9±0.1 vs 8.9±0.1 P<0.05;38.6±2.6 vs 58.0±3.9 P<0.01).而且B组肝细胞的DNA合成量较A组显著升高(226±18 vs 8.9±0.1 P<0.05;38.6±2.6 vs 58.0±3.9 P<0.011. 结论:体外实验证实肝部分切除术后肝窦内皮细胞上清可以促进肝细胞的增生,促进肝细胞的DNA合成,增强再生肝细胞增生活性.

mtTFA、NRF-1对冷保存-再灌注肝移植大鼠线粒体DNA ATPase6基因表达的调节

目的:研究线粒体DNA上游调节基因mtTFA和NRF-1对冷保存肝移植大鼠肝细胞线粒体DNA ATPase6基因表达的影响,探讨mtTFA和NRF-1对冷保存肝移植大鼠肝细胞线粒体DNA调节作用及其机制.方法:Wistar大鼠186只,采用改良"二袖套法"制作大鼠肝移植模型,动物随机分为A组:冷保存30min;B组:冷保存6h;C组:冷保存12h;和D组(假手术对照组),分别于制模后于12h、24h、3d、5d、7d采集标本,保证每时相点存活大鼠6只.观察各组大鼠肝脏ATP含量.采用RT-PCR方法检测mtDNA ATPase6 mRNA、mtTFA和NRF-1 mRNA的表达变化.结果:冷保存再灌注后早期(12h),A、B、C三组mtTFA mRNA表达降低,与A、B组相比,C组最为显著(0.57±0.05vs0.87±0.11,0.69±0.10,P<0.05),NRF-1 mRNA表达变化与mtTFA mRNA相一致.24h后各组mtTFA及NRF-1 mRNA表达开始升高,ATPase6表达和肝组织ATP含量也升高,并且升高趋势与mtTFA及NRF-1 mRNA表达增高基本一致.结论:mtTFA和NRF-1可能通过基因转录调节ATPase6基因表达,改变线粒体呼吸链转运电子、合成ATP的能力.

缩胆囊素对胆管癌细胞凋亡的影响

缩胆囊素(Cholecystokinin,CCK)是具有代表性的消化道激素之一.现有的资料证实其具有生长因子特性,对某些消化道肿瘤细胞的生长有明显的刺激作用,进而参与消化道肿瘤的发生、发展.CCK 与胰腺癌的关系研究较多,它对致癌剂诱发胰腺癌有确切的促进作用,对多数培养的胰癌细胞系及其移植瘤的生长有促进作用.Okada et al

胆道疾病对左旋氧氟沙星的胆药浓度的影响

目的:观察左旋氧氟沙星(LVFX)在胆道手术后患者的胆药浓度及其影响因素。方法:13例施行胆道手术并行T-管引流的患者poLVFX200mg,q8h,连服5d,用HPLC法测定LVFX在血浆、胆汁中的药物浓度。结果:胆囊结石降低胆汁中药物浓度;胆道梗阻程度与胆汁药物浓度有密切相关性,梗阻程度愈高,药物浓度愈低。结论:胆道疾病(特别是结石性胆道疾病)所造成的胆道梗阻状态在很大程度上影响LVFX在胆道的浓度,梗阻状态下低胆汁药物浓度将不利于感染的治疗。

细胞因子与肝再生

肝脏实质细胞与非实质细胞的相互作用是肝脏对外界刺激的最基本的生理和病理应答,非实质细胞在肝部分切除术后肝再生的应答过程中起着重要的调节作用,调节着肝细胞的代谢和生长,而细胞与细胞之间相互作用的桥梁主要来自于细胞因子,细胞因子在肝再生过程中又起着非常重要的作用.目前研究较多的细胞因子主要有肝细胞生长因子(HGF)、肿瘤坏死因子(TNF-a)、转化生长因子α(TGF-a)、转化生长因子β(TGF-β)、表皮生长因子(EGF)、白介素(IL-1,IL-6)等.现将有关研究进展综述如下.

肝外胆管梗阻患者血清内毒素水平与生长激素及其结合蛋白的关系

肝外胆管梗阻(extrahepatic bile duct obstruction,EBDO)可导致机体复杂而严重的病理生理改变[1-3].而机体消化吸收障碍和高分解代谢引起的营养障碍是EBDO患者高并发症率和高死亡率的主要因素之一[1-4],但EBEO时引发营养障碍的分子机制尚未完全阐明[5].生长激素(growth hormone,GH)-胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor-I,IGF-I)轴已确认在调节营养代谢中发挥重要作用[6,7],而肝脏是GH/IGF-I轴的中心器官[8].已知营养障碍可显著抑制GH的分泌,体内注射内毒素可明显下调生长激素受体(GH receptor,GHR)的表达,引起GH抵抗[9].但EBDO时是否存在GH分泌不足和GH抵抗及其临床意义尚未见报道.我们观察EBDO患者GH-IGF-I轴的变化及其与肝酶学、胆红素水平、蛋白质合成功能及内毒素水平的关系,以探讨GH-IGF-I轴在EBDO患者病理生理改变中的意义.

Th_1/Th_2细胞与移植免疫耐受

随着器官移植手术的开展,如何诱导宿主对移植器官的特异性免疫耐受引起人们越来越多的关注.近年来随着研究的深入,特别是对一些"免疫特惠器官”的研究,逐渐提出了如免疫偏离、克隆清除、克隆不应答、免疫抑制等诱导免疫耐受的途径[1,2].但人们发现诸如克隆不应答、克隆清除并不能完全解释自身免疫耐受及移植免疫耐受的机制.然而免疫抑制的理论得到了大多数学者的承认,并进行了广泛、深入的研究[3].现在免疫学的研究进展不仅证实了外周免疫抑制性T淋巴亚群的存在,而且研究的重点集中在CD4+的Th1/Th2亚群的转换与免疫耐受之间的关系.

p21基因过表达对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

1材料和方法1.1材料2.1kb 的 P21全长 cDNA 片段由 Wade HarPer 教授惠赠,真核表达载体 PCLneo 和 T_4DNA 连接酶(Promega),Xho Ⅰ、Stu Ⅰ等内切酶(北方同正生物工程公司),DMEM 培养基、阳离子脂质体 DOTAP(Roche),小牛血清(华美公司),P21,P53mAb(中山公司),所用引物均由上海生物工程公司合成,

脾静脉结扎诱导继发性脾功能亢进犬动物模型的评价

目的:介绍并评价脾静脉结扎诱导的继发性脾功能亢进犬动物模型。方法:18只健康成年杂种狗随机分为Ⅰ组(对照组n=4)、Ⅱ组(脾静脉结扎n=10)和Ⅲ组(脾静脉结扎+脾切除,n=4),通过结扎狗的脾静脉主干和脾静脉属支引起淤血性脾肿大;脾静脉结扎后第3周第Ⅲ组行脾切除术。定期观察动物外周血细胞变化以及影像学、组织病理学改变。结果:脾静脉结扎后1wk内外周血红细胞、血小板开始下降,第3周末二者下降明显(Ⅰ组红细胞和血小板计数分别为(6.8+1.2)×10^(12)/L、(398±58)×10~9/L,Ⅱ组为(5.1±0.7)×10^(12)/L、(230±86)×10~9/L,分别P<0.01和P<0.05);红细胞和血小板减少、脾脏肿大可持续9wk以上;但脾静脉结扎后白细胞水平无显著改变,脾切除术后2wk红细胞和血小板逐渐恢复正常。脾静脉结扎3wk后脾脏组织病理学改变逐渐符合慢性脾脏淤血改变。结论:脾静脉结扎方法简单,可以建立确切的继发性脾功能亢进,可以作为脾功能亢进外科或介入治疗的较理想模型。

低温联合还原型谷胱甘肽对肝细胞缺血-再灌注损伤中bcl-2及bax的影响作用

目的观察低温联合还原型谷胱甘肽对缺血-再灌注诱导的L02肝细胞凋亡的影响,并探索相关分子机制。方法MTT比色法检测低温联合还原型谷胱甘肽对细胞活力的影响;试剂盒检测低温联合还原型谷胱甘肽对细胞丙二醛(MDA)水平、乳酸脱氢酶(LDH)释放及超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响;激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧簇(ROS)生成;Western blot法检测低温联合还原型谷胱甘肽对bcl-2及bax蛋白表达水平的影响。结果低温联合还原型谷胱甘肽能明显抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞活力降低(P<0.05);低温联合还原型谷胱甘肽处理细胞能明显抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞MDA生成增加、LDH水平增高及SOD活力降低(P<0.05);低温联合还原型谷胱甘肽处理细胞能明显抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞内bcl-2蛋白表达水平降低及bax蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论低温联合还原型谷胱甘肽可能通过上调bcl-2的表达及下调bax的表达抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞凋亡发生。

选择性门静脉栓塞后肝癌二期切除

目的探讨 B 超引导下经皮经肝细针穿刺术前选择性门静脉栓塞(POSPVE)后不能手术切除的原发性肝癌(HCC)二期切除的可能性.方法 26例不能手术切除的 HCC 患者行 POSPVE,观察手术成功率及术后不良反应、肝功能改变、各肝叶体积及肝切除率的动态变化、二期手术切除率等指标.结果 POSPVE 成功24例(92.3%),右侧门静脉支栓塞的21例栓塞后1wk、2wk、3wk,右肝体积逐步减少,左肝体积逐步增大,肝切除体积分数由术前的66%减至术后1w 时的65%、2w时的63%、3w 时的61%.POSPVE 后出现不同程度的肝区隐痛、恶心呕吐、低热和以肝酶、胆红素升高为主的肝功能减退.POSPVE 后2wk-3wk,12例(46.2%)完成了肝切除术.结论 POSPVE 扩大肝癌肝切除手术的适应症,提高手术的安全性,具有临床实用价值.

ERCP对诊断腹腔镜胆囊切除术后胆道并发症的诊断价值

从1992-09/1999-06,我院对168例行LC术后出现腹痛等症状的患者选择性地进行逆行胰胆管造影术(Endoscopic retrograde cholangio-pancreatograph,ERCP),发现各种胆道并发症106例,现报告如下。 1 材料和方法 本组168例,其中女125例,男43例,年龄范围21岁～74岁,平均49岁。LC术前诊断为胆囊结石者160例,胆囊息肉者6例,非结石性胆囊炎者2例,122例患者在本院进行LC,46例患者在外院行LC,从行LC到行ERCP的时间为13d～6a,平均26mo。LC后的主要临床表现有右上腹疼痛或胆绞痛48例,黄疸病史27例,反复发作的胆管炎25例,胆源性胰腺炎23例,胆漏或可疑的胆管损伤21例,肝功能异常16例,其他症状8例。

胆总管十二指肠瘘47例临床分析

目的 探讨胆总管十二指肠瘘的发生原因、确诊方法及治疗措施。方法 对 47例患者进行经内镜逆行胰胆管造影 (ERCP)及内镜直视下观察 ,并与B超、CT结果进行对照。结果ERCP检查 380 0例次中确诊 47例 (1 2 4% ) ,其中 34例合并结石 ,19例伴有胆道积气。 38例进行手术治疗 ,其中胆总管切开取石 7例 ,胆总管空肠吻合 31例 (其中 4例行肝门部胆管狭窄整形 ,5例行肝叶切除术 )。结论 ERCP对于胆总管十二指肠内瘘是最可靠的诊断方法 ,能清楚显示胆道系统的全貌 ,对治疗方案的选择有重要的指导价值。

p21^(WAF1)和p53基因在胆管癌组织中的表达研究

目的 探讨p2 1WAF1、p5 3基因与胆管癌发生发展的关系。方法 采用免疫组化方法 ,检测 48例胆管癌和 8例伴慢性炎症的胆管壁组织中p2 1WAF1、p5 3蛋白表达情况。结果 胆管癌中p2 1WAF1、p5 3阳性表达率分别为 2 5 %和 5 4% ,而伴炎症的胆管组织阳性表达率分别为 88%和 0。p2 1WAF1蛋白表达与胆管癌的分化程度、有无淋巴结转移或远处转移以及TNM分期呈显著相关性 ;而p5 3则与这些指标无关 ,与p2 1WAF1蛋白表达无相关性。结论 胆管癌的发生发展可能与p2 1WAF1、p5 3等多基因表达异常有关 ,p2