多粘菌素B及其模拟肽体外抗内毒素的实验研究

方法:LPS(或FITC-LPS)100μg/L分别与PMB 100mg/L、peptide 0 100mg/L、peptide1 100mg/L、PBS,37℃孵育30min后(分别加入50mL/L NHS)刺激PBMC,用流式细胞仪检测FITC-LPS与PBMC的结合能力及CD14表达;ELISA法检测培养上清中细胞因子TNFα、IL-6含量。结果:FITC-LPS分别与PMB、peptidel孵育后,细胞膜平均通道荧光显著减少,LPS与PBMC的结合能力显著降低(分别为8.1±1.8 vs 15.8±4.5 P<0.01;8.5±2.0 vs15.8±4.5 P<0.01)。100μg/L LPS刺激PBMC3h后CD14阳性率明显增加;LPS分别与PMB和peptidel预孵育后可显著降低LPS刺激PBMC细胞膜CD14表达(分别为45.5±6.2％vs 68±5.5％ P<0.01;43.2±4.1％ vs 68±5.5％ P<0.01),LPS刺激PBMC分泌TNF-α和IL-6显著增加,LPS分别与PMB和peptidel预孵育后能显著减少细胞因子TNF-α(分别为15.30±1.0 vs 45.9±5.7 P<0.01;18.2土0.9 vs45.9±5.7 P<0.01)和IL-6分泌(分别为50.5±4.2 vs 176.4±12.1 P<0.01;58.1± 4.1 vs 176.4±12.1 P<0.01)。结论:多粘菌素B及其模拟肽(Peptidel)可能通过下调PBMC CD14表达,降低细胞因子水平来减少LPS诱导的炎症反应。