大鼠肝部分切除术后肝细胞生长因子、转化生长因子-β1水平变化及脾动脉结扎对大鼠肝再生的影响

目的测定肝部分切除术后大鼠血清肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,探讨脾动脉结扎对大鼠肝再生的影响。方法将90只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组):单纯开腹并游离脾动静脉及肝周韧带;对照组(Ph组):建立经典的70%肝部分切除模型;实验组(Ph+Sal组):在Ph组基础上,行脾动脉结扎。分别于术后24、48、72 h,取出大鼠肝脏并计算肝体比、使用免疫组织化学检测肝组织中HGF、TGF-β1的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中HGF、TGF-β1的水平。结果Sham组大鼠术后24、48、72 h肝体比变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)、血清中TGF-β1水平差异无统计学意义(P>0.05),3组大鼠术后24、48、72 h血清中HGF水平差异无统计学意义(P>0.05),Sham组术后同时间[(35.28±7.02)、(35.20±9.01)、(35.15±7.10) pg/ml]与Ph组[(456.16±15.90)、(426.22±13.90)、(418.55±12.21) pg/ml]、Ph+Sal组[(470.15±14.60)、(438.12±12.05)、(410.15±11.20) pg/ml]血清HGF水平差异有统计学意义(P<0.05)、Ph和Ph+Sal血清中TGF-β1水平随时间逐渐增高,术后同时间血清中TGF-β1水平均高于Sham组(P<0.05),Ph组大鼠术后同时间肝体比显著小于Ph+Sal组,差异有统计学意义(P<0.05);Ph组大鼠术后24、48、72 h血清中TGF-β1水平均高于Ph+Sal组大鼠(P<0.05)。结论脾动脉结扎可降低门脉压力,同时可能通过升高HGF水平、降低TGF-β1水平,促进肝再生,表明脾动脉结扎可以促进肝再生。

赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1在肝细胞型肝癌组织的表达及对细胞增殖及侵袭力的影响

目的观察赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(LSD1)在肝细胞型肝癌组织中表达,以及下调LSD1基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及侵袭力的影响。方法选取我院及河南省肿瘤医院择期行手术治疗的肝细胞型肝癌患者91例,免疫组织化学法检测肝癌和癌旁组织中LSD1蛋白表达,培养人肝癌HepG2细胞,分为LSD1干扰序列组、阴性对照组和空白组,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)术检测细胞中LSD1基因表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞侵袭力,Western blot法检测细胞中LSD1、Snail、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)表达。结果肝癌组织中LSD1蛋白阳性表达率为81.32%,高于癌旁组织的35.16%(P<0.01);肝癌组织中LSD1蛋白表达与分化程度、TNM分期和血管浸润明显相关(P<0.05);LSD1干扰序列组细胞中LSD1 mRNA相对表达量为1.19±0.10,低于阴性对照组和空白组(2.29±0.14、2.34±0.11,P<0.01),LSD1干扰序列组24、48、72、96 h时吸光度(A)值分别为0.23±0.05、0.32±0.08、0.38±0.08、0.52±0.03,低于阴性对照组(0.38±0.08、0.49±0.05、0.67±0.04、0.77±0.10)和空白组(0.33±0.03、0.52±0.09、0.70±0.08、0.78±0.07,P<0.05);LSD1干扰序列组侵袭细胞数(86.3±3.9)低于阴性对照组(110.6±9.4)和空白组(117.7±7.0,P<0.05);LSD1干扰序列组细胞中LSD1、Snail和N-cadherin蛋白相对表达量(0.25±0.03、0.30±0.02、0.32±0.03)低于阴性对照组(0.77±0.06、0.76±0.10、0.67±0.04)和空白组(0.84±0.14、0.74±0.07、0.69±0.06,P<0.05),而E-cadherin蛋白相对表达(0.71±0.05)高于阴性对照组(0.37±0.02)和空白组(0.34±0.04,P<0.05)。结论LSD1蛋白在肝细胞型肝癌组织中呈高表达,可能通过上皮-间充质转化(EMT)过程而在人肝癌HepG2细胞增殖和侵袭中发挥重要作用。