^99Tc^m-Annexin B1探测荷瘤鼠化疗后肿瘤细胞凋亡的实验观察

目的:探讨^(99)Tc^m-Annexin B1探测化疗后肿瘤细胞凋亡的潜力与可行性。方法:乳腺癌细胞MDA-MB-435荷瘤小鼠经大剂量(30mg/kg)紫杉醇单次化疗后,注射^(99)Tc^m-Annexin B1,计算化疗后不同时间(0、5、10、15、20和25h)每克肿瘤组织摄取^(99)Tc^m-Annexin B1的百分注射剂量率(%ID/g)。肉瘤细胞W256荷瘤大鼠经大剂量(200mg/kg)环磷酰胺单次化疗后24h注射^(99)Tc^m-Annexin B1,对照组荷瘤大鼠注射生理盐水;行SPECT平面显像观察肿瘤摄取情况。结果:乳腺癌荷瘤小鼠化疗后15h,肿瘤摄取^(99)Tc^m-Annexin B1达高峰,由0h的(0.15±0.013)%ID/g上升至(0.22±0.026)%ID/g。肿瘤对^(99)Tc^m-Annexin B1的摄取与肿瘤细胞凋亡指数(AI)具有相关性,r=0.88,P<0.01。W256细胞荷瘤大鼠化疗后24h显像发现,肿瘤对^(99)Tc^m-Annexin B1的摄取较对照荷瘤大鼠显著升高,对照组的肿瘤与非肿瘤摄取比值(T/B)为1.39±0.21,化疗组为2.57±0.43。结论:^(99)Tc^m-Annexin B1对探测化疗后肿瘤细胞凋亡具有潜力与可行性。

^(99m)Tc-Annexin B1的制备及其探测细胞凋亡的实验研究

目的制备99mTc-Annexin B1并对其体外、体内生物分布以及探测体内细胞凋亡的潜力进行评价。方法应用99mTc直接标记蛋白质的方法制备99mTc-Annexin B1。采用与活化人血小板结合实验检测99mTc-Annexin B1的体外生物活性。在正常小鼠体内进行生物分布研究。采用地塞米松诱导小鼠胸腺凋亡的动物模型和anti-Fas单抗诱导小鼠肝脏凋亡的动物模型检测99mTc-Annexin B1探测体内细胞凋亡的潜力,并用TUNEL染色证实细胞凋亡。结果直接标记法制备的99mTc-Annexin B1具有很高的放射化学纯度和很好体外稳定性。与活化人血小板的结合实验表明,99mTc-Annexin B1具有与PS结合的体外生物活性。99mTc-Annexin B1在体内具有较快的清除特性,主要聚集于肾脏。地塞米松诱导18h后,小鼠胸腺对99mTc-Annexin B1的摄取显著高于对照小鼠胸腺的摄取。Anti-Fas诱导后2h时后,小鼠肝脏对99mTc-AnnexinB1的摄取显著高于为对照动物的肝脏摄取。结论99mTc-Annexin B1具有与PS结合的体外生物活性和探测体内细胞凋亡的潜力,是一种新的细胞凋亡显像剂。