血管内皮生长因子对大鼠脑血管通透性的影响及丹酚酸B对其抑制作用

目的 研究血管内皮生长因子 (VEGF)对脑血管通透性的影响 ,并观察丹参水溶性成份丹酚酸B拮抗VEGF的作用。方法 动脉及侧脑室注射VEGF后 ,再注射伊文思兰 ,用分光光度法测脑内伊文思兰染色程度来反映VEGF的血管通透作用。注射VEGF前 30min ,动脉或侧脑室给药 ,观察药物抑制作用。结果 动脉及侧脑室注射VEGF剂量依赖性引起脑血管通透性升高 ,但两种给药方法无显著性差异。静脉注射丹酚酸B 0 .1mg·kg-1体重可显著抑制VEGF的通透作用 ,而侧脑室注射无明显作用。结论 丹酚酸B可显著抑制VEGF的血管通透作用 。

银杏叶提取物对溶血磷脂酰胆碱引起的脑微血管细胞损伤的保护作用

目的：研究银杏叶提取物（ＧｂＥ）对溶血磷脂酰胆碱（ＬＰＣ）引起的小牛脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＥＣ）损伤及小牛脑微血管平滑肌细胞（ＢＣＭＳＭＣ）增殖的保护作用。方法：以乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放量为指标测定ＢＣＭＥＣ损伤，用结晶紫染色法测定ＢＣＭＳＭＣ增殖。结果：ＬＰＣ５０ｎｍｏｌ／Ｌ可明显增加ＬＤＨ的释放，ＧｂＥ０，５，１０，２０，５０和１００ｍｇ／Ｌ，则ＬＤＨ释放率由４７．０％±０．７％分别下降为３９％±３％，３６．０％±１．３％，２７．０％±２．１％，１６％±６％和１３％±３％，表明ＧｂＥ呈剂量依赖性地抑制了ＬＤＨ的释放。ＧｂＥ对ＬＰＣ引起的ＢＣＭＳＭＣ的增殖抑制作用不明显。

欧芹素乙和已酮可可碱对白细胞介素-1_β诱导脑血管内皮细胞与单核细胞粘附和迁移的抑制作用

目的：研究白细胞介素－１β（ＩＬ－ １β） 对培养的牛脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＥＣ） 与单核细胞（ＭＮＣ） 粘附、迁移的影响及药物的保护作用。方法：通过测定粘附于内皮细胞单层上的ＭＮＣ及胶原层中的ＭＮＣ，计算ＭＮＣ的粘附率及迁移率。结果：ＩＬ－ １β（５００ｋＵ·Ｌ－ １） 可促进单核细胞与脑微血管内皮细胞的粘附与迁移，其促粘附与迁移作用具明显的时效关系。ＩＬ－ １β促粘附达最大效应时间为２ｈ，较对照组提高４６．１％ ；促迁移作用２ｈ 达最大值，较对照提高１１８ ．１ ％ 。欧芹素乙、己酮可可碱在浓度１ ～１００μｍｏｌ·Ｌ－１ 范围时，可剂量依赖性地拮抗ＩＬ－ １β诱导的粘附及迁移，药物浓度最高（１００μｍｏｌ·Ｌ－１） 时，抑制率达最大。

谷氨酸增加大鼠海马脑片可溶性淀粉样前体蛋白的释放

目的 观察兴奋性神经递质谷氨酸对于可溶性淀粉样前体蛋白 (sAPP)释放的影响。方法 雄性SD大鼠断头取海马后 ,于 0～ 4℃Krebs-Ringer液中快速振动切片 ,37℃预孵育后 ,置含谷氨酸或不含谷氨酸Krebs -Ringer液 (对照 )中孵育 ,于 150 0 0g离心 ,取上清 ,用二辛可宁酸法测定总蛋白含量。以Westernblot法测定 ,释放入孵育液中的sAPP。结果 正常孵育的海马脑片能够分泌基础量的sAPP ,谷氨酸刺激能够导致海马脑片释放sAPP增加 ,但没导致新蛋白的产生。结论 谷氨酸在10 -15～ 10 -3 mol·L-1浓度范围内 。

丹酚酸B对溶血磷脂酰胆碱刺激内皮细胞产生MMP-2的抑制作用

目的 研究抗氧化剂丹酚酸B对溶血磷脂酰胆碱 (LPC)诱导牛主动脉内皮细胞 (BAEC)产生MMP 2的影响。方法 采用体外培养牛主动脉内皮细胞的方法 ,用LPC单独或与丹酚酸B共同作用于BAEC ,明胶酶谱法测定细胞培养上清中基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )活性。结果 LPC显著促进BAEC产生MMP 2 ,当浓度为 0 .0 2 5 μg·L-1时有明显的刺激作用 (P <0 .0 5 ) ,0 .2 5 μg·L-1时作用增强 (P <0 .0 1)。丹酚酸B能抑制LPC刺激MMP 2产生的作用 ,抑制作用具有剂量依赖性 ,在浓度为 0 .0 1μmol·L-1抑制作用达到显著水平 (P <0 .0 5 ) ,在 0 .1μmol·L-1时抑制作用达到极显著性水平 (P <0 .0 1)。结论 LPC能刺激内皮细胞产生MMP 2 ,抗氧化剂丹酚酸B能抑制LPC的刺激作用。

5-脂氧合酶抑制剂对黑色素瘤细胞产生金属蛋白酶的抑制作用

目的 观察 5 -脂氧合酶抑制剂对黑色素瘤细胞产生金属蛋白酶的作用。方法 以Transwellchamber测定a375细胞的侵袭性 ;以免疫酶联吸附及明胶酶谱法测定a375细胞产生MMP 2、MMP 9的量。结果 在 5～ 2 0 μmol·L-1 浓度范围内 ,5 脂氧合酶抑制剂NDGA、AA86 1和MK886剂量依赖性地降低a375细胞对人工基底膜的侵袭性 ,并剂量依赖性地抑制a375细胞产生MMP 2、MMP 9。结论 5 脂氧合酶抑制剂能抑制a375细胞产生金属蛋白酶 。

给药途径对强啡肽A_(1-13)抑制吗啡依赖大鼠戒断症状的影响

目的 研究不同给药途径对强啡肽A1 13 (Dyn)抑制吗啡依赖戒断症状的影响。方法 采用剂量递增法建立大鼠吗啡身体依赖模型 ;吗啡依赖大鼠戒断症状采用sc 5mg·kg-1纳洛酮激发 ;Dyn对吗啡依赖大鼠戒断症状的影响采用侧脑室、脊髓及静脉内注射Dyn后 ,对大鼠经纳洛酮激发后 6 0min内可数和不可数的戒断症状进行评分的方法进行。结果 静脉内注射10 0 μg·kg-1Dyn可短暂抑制戒断症状 ;髓鞘内注射 4 μg·kg-1Dyn可明显抑制绝大部分的戒断症状 ;侧脑室注射Dyn对吗啡依赖大鼠戒断症状无显著的抑制作用。

N-硝基-L-精氨酸抑制大鼠吗啡身体依赖的强啡肽机制

目的 研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在抑制吗啡身体依赖形成中的作用及探讨强啡肽在该过程中的可能作用。方法 采用剂量递增皮下注射吗啡法建立大鼠吗啡身体依赖模型 ;身体依赖程度采用皮下注射 5mg·kg-1 纳洛酮激发戒断症状并对大鼠 6 0min内可数和不可数的戒断症状评分的方法进行 ;采用放射免疫法分别测定大鼠脑各分区、垂体、脊髓和血浆内免疫活性强啡肽A(ir-Dyn)的含量。结果 NO2 Arg可剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 ,其中 5mg·kg-1 NO2 Arg可显著抑制吗啡依赖大鼠大多数戒断症状 ;NO2 Arg处理可显著升高吗啡依赖大鼠脊髓、纹状体、垂体及血浆内ir-Dyn的水平。该作用可被特异性κ -受体阻滞剂norbinaltorphimine (nor-BNI)所拮抗。结论 NO2 Arg剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 。

脑缺血大鼠脑组织及血浆中microRNA-124a表达的变化

目的探讨microRNA-124a在脑缺血人鼠血浆和脑组织中表达的变化,以及其在正常大鼠不同组织和不同类型细胞中的分布。方法健康雄性SD大鼠35只,采用完全随机分组方法,3只用于检测microRNA-124a在正常大鼠各组织中的表达;候手术组、模型组各16只,其中每组8只用于检测造模前0 h和造模后2、4、8、12、24及48h血浆microRNA-124a表达,8只用于检测造模后24h缺血区脑组织micr0RNA-124a表达。采用线柃法制作大脑中动脉水久性闭塞模型,实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)和逆转录聚合酶链应法(RT-PCR)检测microRNA-124a的表达。结果①microRNA-124a在大鼠恼、主动脉、肺、肝、心、脾、肌肉及肾脏中表达量依次降低,脑中的表达量足肾的1116.68(451.94～2740.08)倍,而主动脉是肾脏的12.81(6.72～24.42)倍;在大鼠海马神经元、小胶质细胞中的表达量分别是小鼠脑做血管内皮细胞的1031.12(501.50～2120.20)和19.43(13.20～28.60)倍。②与造模前比较,模型组大鼠血浆中microRNA-124a表达量在造模后8h开始升高(P=0.02);24h达高峰(P=0,008),约为造模前的18倍,随后逐渐下降,但48h表达量仍然高于造摸前(P=0.03)。假手术组大鼠血浆中microRNA-124的表达在造模前、后不同时间点差异均无统计学意义。③造模后24 h,模型组缺血区脑组织中microRNA-124a表达量明显降低,约为假手术组的12%～28%。结论 microRNA-124a特异性表达于大鼠脑神经元中。脑缺血24 h后,血浆中microRNA-124a表达量显著增高,而脑组织中表达最显著减少,机制可能与脑损伤造成microRNA-124a大量释放入血有关。