糜酶介导心脏成纤维细胞增殖的信息交流机制

目的探讨糜酶介导大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖的细胞内信息交流机制。方法采用胰酶消化法分离、培养新生大鼠的CFs,通过四氮唑盐(MTT)比色法(A490值)测定细胞数目,免疫印迹法(Western blot)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、p-Smad2/3和过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的蛋白表达水平。结果糜酶促使CFs数目增加并呈剂量依赖性,15、30和60μg/L组的A490值分别为0.263±0.033、0.348±0.031和0.387±0.026,均较对照组(0.201±0.019)显著增多(P<0.01)。15、30和60μg/L糜酶组的TGF-β1蛋白表达水平分别为0.968±0.069,1.782±0.058和2.656±0.085,p-Smad2/3蛋白表达水平分别为0.506±0.019,0.629±0.038和0.883±0.031,均明显高于对照组(0.333±0.023和0.287±0.016,P<0.05或<0.01)。糜酶可减低CFs的PPARα蛋白表达水平,15、30和60μg/L糜酶组的PPARα蛋白表达分别为0.430±0.025、0.289±0.026和0.165±0.013,均较对照组(0.740±0.041)显著减少(P<0.05或<0.01)。结论糜酶能促进大鼠CFS增殖,其机制与TGF-β1和p-Smad2/3蛋白表达增加、PPARα蛋白表达减少有关,提示TGF-β1/Smad和PPARα信号通路存在信息交流。