山莨菪碱对创伤性肺损伤激酶IKK的影响及意义

目的 探讨激酶IKK - β在创伤性急性肺损伤 (ALI)病理变化中可能的作用机制及山莨菪碱 (6 5 4 - 2 )的影响效应。方法 复制创伤性ALI家兔模型 ,实验动物随机分为正常对照组、创伤模型组、6 5 4 - 2治疗组。用原位杂交方法检测肺组织中IKK - β的mRNA表达 ,用凝胶电泳迁移率改变分析 (EMSA)法检测肺泡巨噬细胞 (PAM)中核因子 (NF) -κB的活性 ,用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液 (BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF -α)、白细胞介素 6 (IL - 6 )的含量。同时对各组动物动脉血气、肺湿 /干 (W /D)比值及肺组织的病理变化进行检测。结果 6 5 4 - 2治疗能明显改善创伤性ALI动物的血气 ,减少肺W/D值 ,减轻肺组织的损伤程度 ;能明显抑制创伤性ALI家兔肺组织中IKK - β的mRNA表达和PAM中NF -κB活性 ,降低BALF中TNF -α、IL - 6含量。结论 IKK - β/NF -κB/TNF -α效应在创伤性ALI的炎症反应中发挥重要作用。 6 5 4 - 2可通过抑制IKK - β的激活 ,阻止NF -κB活化 ,缓解TNF -α介导的组织损伤。

分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体的构建及表达

目的分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体的构建及表达。方法采用PCR方法在抗肝癌sFv的5端引入引导序列使其能够在真核细胞中表达并分泌,在其下游连接人TNF-α基因,构建分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因,并将该基因克隆入带有GFP报告基因的真核表达载体,用磷酸钙共沉淀法转染小鼠成纤维细胞NIH3T3进行瞬时表达。结果 DNA序列分析证实在sFv的5端引入正确的60bp引导肽序列,酶切鉴定证明成功构建了分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体,并在NIH3T3细胞中成功地表达了融合荧光蛋白。结论成功构建并表达了分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP基因,为肝癌免疫基因治疗的进一步研究奠定了基础。

褪黑素对噪声应激大鼠胃肠传输功能的影响及其机制

目的:探讨褪黑素(MT)对噪声应激大鼠胃肠传输功能的影响及可能机制.方法:将♂SD大鼠40只随机分为空白对照组、对照1,2组和实验1,2组,实验组和对照组分别在应激前30min ip MT(15 mg/kg)和等体积生理盐水.对照和实验1组和以56式冲锋枪射击时产生的120DB(A)的脉冲噪声,对照和实验1组应激1d,对照和实验2组应激3d,建立噪声应激模型.噪声应激后,观察MT在各组大鼠胃内残留率,小肠推进比,血浆中皮质醇、降钙素基因相关肽(CGRP)和胃动素(MTL)的影响.结果:对照1,2组大鼠的胃残留率(54.52%±4.53%,63.56%±5.51% vs 41.41%±7.74%)、小肠推进比(58.42%±8.77%,67.98%±6.63% vs 41.26%±6.08%),血浆皮质醇(1.99±0.08、2.59±0.09 vs 0.95±0.10),MTL浓度(158.09±10.44.180.09±14.85 vs 124.95±7.83)与空白对照组相比明显升高(P<0.01),其血浆CGRP浓度(125.24±8.5,122.02±10.36)与空白对照组(195.03±7.70)相比显著降低;实验1,2组大鼠的胃残留率(44.53%±8.93%,47.52%±4.98%)、小肠推进比(44.18%±4.36%,46.4%±4.96%),血浆皮质醇(1.27±0.14、1.63±0.09),MTL浓度(128.67±10.25,134.29±18.33)与对照组相比显著降低,其血浆CGRP浓度(191.67±10.13,190.04±11.43)与对照组相比显著升高.结论:MT对噪声引起的大鼠胃肠传输功能紊乱具有保护作用,皮质醇、CGRP和MTL在其发病机制中均起到重要作用.

食管癌中DCC基因VNTR位点多态性研究

目的探讨 DCC 基因 VNTR 位点多态性在陕西人群中的分布规律及与食管癌的遗传易感性关系.方法利用 PCR 方法对陕西正常人群个体(56例),食管癌组织(鳞癌49例).食管癌癌旁组织(34例)的 DCC 基因 VNTR位点多态性进行群体遗传学研究,并就该位点与食管癌的关系进行了关联分析.结果在陕西正常人群中 DCC 基因 VNTR 位点存在11种等位基因(A_1～A_(11)),扩增长度为167 bp～210 bp,其等位基因频率介于0.009～0.188,其中以扩增长度为205 bp(A_3),201 bp(A_4),185 bp(A_7),177 bp(A_9)较为常见,分布符合 Hardy-Weinberg 遗传平衡定律;DCC 基因 VNTR 位点在陕西正常人群中的多态信息量(PIC)为0.879,杂合度(H)为73.2%.在食管癌人群 DCC 基因 VNTR 位点中共检出10种等位基因,比正常人群少等位基因 A_2,其等位基因频率分布在0.01～0.25.癌组织与癌旁组织等位基因频率分布经比较无显著差异(x^2=3.16,P>0.05).食管癌人群 ECC 基因 VNTR 位点多态分布与正常人群有显著差异(P<0.01).其中 A_5在食管癌人群中等位基因频率明显高于正常人群,而 A_7等位基因频率则明显低于正常人群,提示 A_5和 A_7可能是食管癌易感因素.结论推测 DCC 基因 VNTR 位点多态性的改变可能在食管癌的形成中起重要作用,该位点多态性与食管癌的遗传易感性相关.

LHRH类似物对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的:观察LHRH类似物的体内抗肝癌细胞增生活性,为LHRH类似物用于肝癌的内分泌治疗提供实验依据。方法:实验选用5-7周龄♂BALB/c裸鼠20只,分治疗组(丙氨瑞林瘤内注射组)和对照组(生理盐水瘤内注射组),用人肝癌hHCC细胞系建立肝癌荷瘤裸鼠模型,观察LHRH类似物丙氨瑞林(LHRH-A)对裸鼠移植瘤生长的影响;并分别用H-E染色和免疫细胞化学技术检测瘤组织的病理组织学改变和GnRH受体及凋亡蛋白Bax表达的变化。结果:LHRH-A瘤内注射(剂量为75μg/d)可显著抑制肝癌移植瘤的生长。治疗3 wk后治疗组裸鼠肿瘤体积(1885.9±738.3mm^3)明显小于对照组裸鼠的肿瘤体积(4223.4±1027.6mm^3),两组间有统计学差异(P<0.005);LHRH-A治疗3wk后的抑瘤率可达58％;治疗组裸鼠存活期(87.8±5.3d)较对照组(64.6±6.8d)显著延长(P<0.05);治疗3wk后病理组织学发现治疗组瘤组织中癌细胞核分裂象减少,腺样癌组织、凋亡细胞数增多;治疗组瘤组织中表达GnRH受体的癌细胞数增加(72.5％ vs 56.4％,P<0.05),Bax阳性细胞比率增加(53.8％ vs 41.5％,P<0.05)。结论:LHRH-A具有显著抑制肝癌裸鼠移植瘤细胞增生的活性,LHRH受体和凋亡蛋白Bax可能参与了LHRH-A对肝癌细胞增生的抑制作用。

不同剂量腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠模型实验研究

目的探讨不同剂量腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠模型的量效关系。方法将20只成年雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组,腺嘌呤低(每日100 mg/kg)、中(每日150 mg/kg)、高(每日200 mg/kg)剂量组,每组5只。用腺嘌呤给予大鼠灌胃30 d,诱导肾阳虚不育模型。观察大鼠体征、血清性激素水平、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serumcreatinine,SCr)及睾丸、肾脏的形态学变化。结果与正常对照组相比,腺嘌呤各剂量组睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)显著降低(P<0.05),卵泡刺激素(follicle sti mulating hormone,FSH)、促黄体激素(luteotrophic hormone,LH)水平无显著性变化(P>0.05),SCr、BUN水平显著升高(P<0.05)。腺嘌呤各剂量组大鼠睾丸均出现生精小管中生精细胞排列紊乱,细胞疏松,精曲小管之间的结缔组织增多,间质细胞数量明显减少,管腔内生殖上皮变薄,精子数目减少,大部分管腔中可见脱落的精子细胞;肾小管内有大量结晶物沉着,且有异物肉芽肿形成,占据整个管腔,肾小管上皮肿胀、坏死、脱落,肾小管显著扩张成囊状,皮质、髓质间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,可见纤维素样坏死。结论低剂量腺嘌呤可导致大鼠睾丸形态学改变,而且肾脏的损害程度较轻,可成功地诱导肾阳虚不育模型。

模拟高原低压低氧对大鼠血清和胃黏膜Ghrelin表达的影响

目的:研究模拟高原低压低氧环境下大鼠血清和胃黏膜中Ghrelin表达的变化,探讨高原环境对消化系统功能的影响.方法:30只Sprague-Dawley大鼠随机均分为海平面对照组、3000和5000m模型组;采用小动物低压舱模拟不同海拔高度,舱内停留时间为24h.应用ELISA方法测定各组动物动血清中Ghrelin的浓度;用免疫组织化学方法观察大鼠胃黏膜组织中Ghrelin的定位与表达,并比较各组动物间胃黏膜Ghrelin免疫反应阳性细胞密度的差异.结果:与海平面对照组相比,3000m和5000m模型组大鼠血清Ghrelin浓度(μg/L)明显低于地面对照组(7.45±1.33,6.87±1.32vs9.31±1.65;P<0.05或0.01).Ghrelin免疫反应阳性细胞分布于大鼠胃腺X/A细胞和内分泌细胞、阳性物质定位于细胞质.与海平面对照组相比,3000m和5000m模型组大鼠胃黏膜Ghre-lin阳性细胞密度显著降低(103.9±9.55,97.7±11.22vs119.9±11.96;P<0.01或0.001).结论:模拟高原的低压低氧环境可致大鼠血清Ghrelin水平下降,胃黏膜Ghrelin分泌减少,Ghrelin可能参与模拟低压低氧环境中机体消化功能紊乱的调节.

抑制gankyrin的表达对肝癌细胞系HepG2增殖的影响

目的:探索通过RNA干涉技术抑制gankyrin的表达对肝癌细胞系HepG2增殖及细胞周期的影响.方法:建立稳定表达靶向gankyrin的shRNA的HepG2细胞系.通过Westernblotting验证基因表达的抑制效果.采用细胞计数及MTT法检测细胞的增殖能力.流式细胞仪分析细胞周期.结果:抑制gankyrin基因的表达显著抑制了HepG2细胞的生长,与转染阴性对照shRNA质粒细胞相比,细胞计数示细胞数目明显减低(d6:24.4×103±5.2×103vs123.3×103±2.8×103,P<0.05),MTT分析显示细胞增殖率明显下降(144h:7.53±0.50vs16.30±0.38,P<0.05),流式细胞分析示细胞周期阻滞在G1期(G1:71.63±3.60%vs52.57±2.82%,P<0.05).结论:在HepG2细胞中抑制gankyrin的表达可有效抑制细胞生长并导致细胞周期的阻滞.利用RNA干涉技术抑制gankyrin的表达可能会成为一种有效的肝癌基因治疗手段.

NHE1在心肌肥大,心肌纤维化和心衰中的作用

心肌肥大、心肌纤维化是多种慢性心衰的共同病理学改变,钠氢交换体1(NHE1)是多种因子介导的心肌肥大和心肌纤维化的信号转导通路上的共同途径,直接参与了其病理生理学过程,这些因子包括多种生长因子、肾上腺素能受体激动剂、血管紧张素、内皮素、凝血酶以及直接作用于细胞上的机械性张力。从理论推理和实验学证据两方面研究NHE1参与心肌肥大、纤维化和心衰的机制具有重要的意义。

抗肝癌单链免疫毒素基因修饰的PBMCs在动物体内的抑瘤作用

目的:用携带分泌型抗肝癌单链免疫毒素基因(sFv-TNF-α)的重组逆转录病毒感染人外周血单个核细胞(peripheralblood mononuclear cells,PBMCs),使其表达并分泌针对人肝癌细胞的sFv-TNF-α融合蛋白,观察转导的PBMCs/PST静脉注射后对荷肝癌裸鼠的抑瘤作用.方法:分离正常人PBMCs并用PHA和IL-2进行体外刺激培养,用感染性重组病毒产生细胞C22(PA317/PST)产生的病毒上清转导后,经尾静脉输入荷肝癌裸鼠体内,注射细胞数为每只1×106(0.2 mL),每5 d注射1次,共注射3次.定期观察记录肿瘤生长情况,注射3次后处死,取出瘤组织称质量、记录,进行统计学处理,并制备石蜡切片进行常规HE染色及免疫组化染色观察.结果:实验组肿瘤生长速率为(20.8±4.9)mg/d,对照组为(28.5±6.7)mg/d,经t检验,P＜0.05.结论:经重组逆转录病毒转导的PBMCs/PST在课鼠体内对人肝癌细胞系SMMC-7721移植瘤具有一定的生长抑制作用.

川芎嗪对肝创伤后早期大鼠残肝组织保护作用的评价

目的:研究川芎嗪干预对68%(2/3)肝切除大鼠术后残肝组织的保护作用,以及其对肝脏核因子κB(NF-κB)激活的影响.方法:60只SD大鼠随机分成3组(每组20只),均行68%(2/3)肝切除术.术后30 min分别给予以下处理:A组腹腔注射生理盐水,B组注射吡咯烷二硫代氨甲基甲酸盐(PDTC),C组注射川芎嗪.术后2 h、6 h、10 h和24 h观察各组大鼠术后一般情况和血清转氨酶变化.组织切片观察残肝组织病理状况,Western-blot方法检测NF-κB的激活.结果:C组大鼠残肝组织切片细胞水肿较A组轻:丙氨酸氨基转氨酶(ALT)在6 h(488.9 U/L±59.2 U/L)、10 h(670.0 U/L±73.4 U/L),较A组(651.6 U/L±65_3 U/L,930.0 U/L±62.9 U/L)低,P<0.05;天门冬氨酸氨基转移酶(AST)在6 h(11113.1 U/L±138.7 U/L)、10 h(1388.2 U/L±209.6 U/L),较A组(1315.0 U/L±111.0 U/L,1728.4 U/L±87_3 U/L)低,P<0.05:NF-κB的激活在术后2 h(0.78±0.04)和10 h(0.75±0.07)均低于A组(均为1),高于B组(0.68±0.09,0.66±0.04),P<0.05,6 h(0.71±0.07)低于A组(1),P<0.05,与B组(0.64±0.09)接近,P>0.05.结论:川芎嗪通过抑制NF-κB的激活,对创伤后肝组织产生保护作用,其保护作用接近于PDTC.

阿司匹林抑制去势大鼠IL-1,IL-6,TNF-α和M-CSF的表达及其防治绝经后骨质疏松作用的研究

目的探讨阿司匹林对去卵巢骨质疏松模型小鼠体内白细胞介素-1(IL-1)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)表达的影响,以及其防治骨质疏松的作用。方法选取Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为对照组(10只)和去卵巢模型组(50只),术后1周去卵巢模型组大鼠再随机分为骨质疏松组,其中,A组(0.25 mmol/L阿司匹林)、B组(0.5 mmol/L)、C组(1.0 mmol/L)和D组(1.5 mmol/L),各10只。检测各组血清和骨组织IL-1,IL-6,TNF-α和M-CSF水平,同时采用Micro-CT对骨小梁微观三维形态结构进行分析。结果骨质疏松组血清IL-1,IL-6,TNF-α,M-CSF分别为(80.15±7.18)pg/m L、(82.16±6.63)pg/m L、(30.21±4.73)pg/m L和(11.42±4.25)pg/m L,均明显高于对照组(P<0.05)。A,B,C,D组中,D组IL-1,IL-6,TNF-α和M-CSF水平最低(P<0.05)。骨质疏松组骨组织IL-1,IL-6,TNF-α和M-CSF分别为(71.24±8.10)pg/m L、(78.02±5.15)pg/m L、(26.92±3.23)pg/m L和(10.22±3.15)pg/m L,均明显高于对照组(P<0.05);A,B,C,D组中,D组IL-1,IL-6,TNF-α和M-CSF水平最低(P<0.05)。Micro-CT检测结果表明,阿司匹林治疗组腰椎椎体骨小梁厚度、骨小梁数量及骨密度均显著高于骨质疏松组。结论阿司匹林能抑制去势大鼠骨流失,这可能与阿司匹林抑制大鼠血清和骨组织IL-1,IL-6,TNF-α和M-CSF的表达有关,从而使破骨活动减弱的作用。

重组大肠杆菌生产rhG-CSF发酵工艺的研究

在 5L发酵罐中 ,研究了溶解氧 (DO)、诱导时机、接种量等因素对重组大肠杆菌DH5α/pBV2 2 0生产rhG CSF的影响 .结果表明 ,在w(DO)≥ 5 0 % ,菌体光密度D60 0 ≈ 4 .5 0 ,4 2℃诱导表达 4h的条件下 ,rhG CSF的菌体干重可达 6 .6 1g/L ,表达量为 38.1%

高压氧对鼠牙龈微血管及微循环的作用

探讨高压氧（ＨＢＯ）对牙龈微循环的作用及其机理。方法：从组织学和用激光多普勒血流仪（ＬＤＦ）分析ＨＢＯ对鼠牙龈血管数目、形态、超微结构的影响，及对牙龈血流量（ＧＢＦ）、血流速度（ＢＣＶ）和血浓度（ＢＣ）的变化，进而分析ＨＢＯ对微循环的影响规律及与组织学变化的关系。结果：ＨＢＯ治疗组的血流量、血流速度和血浓度与相应的对照组比均有显著性差异，该组的血流量增加，血流速度加快，血浓度降低，ＨＢＯ对牙龈血流速度和血流量增加较明显；ＨＢＯ治疗后牙龈固有层微血管数目明显增多，血管壁增厚，血管内皮细胞胞浆中线粒体和内质网明显增多，细胞代谢加快。结论：ＨＯＮ可增加牙龈固有层开放的血管数目，促进血管内皮细胞的代谢水平，使牙龈血流量和血流速度增加，降低血浓度；ＨＢＯ可通过调节牙龈的血管数目和内皮细胞代谢而改变牙龈微循环。

转导单链免疫毒素基因的PBMCs对人肝癌细胞SMMC-7721的体外杀伤活性

目的:用携带分泌型抗肝癌单链免疫毒素基因(sFv-TNF-α)的重组逆转录病毒感染人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMCs),使其表达并分泌针对人肝癌细胞的sFv-TNF-α融合蛋白,观察转导的PBMCs对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的杀伤作用.方法:用感染性重组病毒产生细胞C22(PA317/PST)产生的病毒上清转导人PBMCs,采用PCR和RT-PCR方法对转导的PBMCs(PBMCs/PST)进行DNA和mRNA水平的分析.PBMCs/PST与SMMC-7721共培养,MTT法检测PBMCs/PST表达产物对肝癌细胞的体外杀伤活性.结果:PCR及RT-PCR结果显示PBMCs/PST中扩增出外源目的基因对应的电泳条带.MTT法检测结果,分泌型抗肝癌单链免疫毒素对体外培养肝癌细胞SMMC-7721的杀伤率为(38.2±6.7)%.结论:分泌型抗肝癌单链免疫毒素基因可以在PBMCs中整合并稳定表达,其分泌的表达产物对SMMC-7721具有一定的体外杀伤作用.

HCV包膜糖蛋白E2基因的克隆、蛋白表达及纯化

目的:获得大量重组HCVE2蛋白,为研究E2蛋白的功能及制备其抗体奠定基础.方法:利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出831bp(384-661aa)的E2基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET32a(+)上,得到重组质粒pET32a-HCVE2,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,IFFG诱导HCVE2蛋白表达,SDS-PAGE和Westernblot检测蛋白表达,Ni-NTA偶联的琼脂糖黏附柱纯化融合蛋白.结果:经IPTG诱导后,可见分子量约55000的融合蛋白表达;表达的蛋白主要以包涵体形式存在;经Ni-NTA偶联的琼脂糖黏附柱纯化的融合蛋白与抗His抗体及HCV阳性血清具有良好的反应原性.结论:HCVE2基因的克隆、表达及其融合蛋白的纯化为进一步开展HCVE2蛋白功能和HCV受体的研究奠定了基础.

横纹肌样瘤的起源研究——高变异率BHK-21细胞致裸鼠产生恶性横纹肌样瘤的实验研究

横纹肌样瘤（ＲＴ）的起源迄今仍是世界上悬而未决的重大难题。第一例ＲＴ发现于肾脏。但迄今发现的ＲＴ均难以复制成功。在纯化３代的肿瘤阴性对照猫肾和犬肾原代细胞皮下接种裸鼠的致癌／致瘤率为０％（０／３２），肿瘤阳性对照Ｈｅｌａ细胞皮下接种裸鼠产生进行性生长恶性肿瘤的比率为１００％（４０／４０）的前提下，ＢＨＫ－２１细胞皮下接种裸鼠均产生进行性生长的恶性肿瘤（６５／６５），其中染色体众数为４０±２（比率５８％～６８％）的ＫＡ株致ＲＴ比率为５２．３８％（１１／２１），具有两个染色体众数４０±２（比率４１％～５３．５）和７２±２（比率３１％～３５％）的ＹＡ株致ＲＴ的比率为８３．３３％（１０／１２），染色体众数为７３±３（比率４２％～５０％）的成瘤细胞体外再培养ＮＭ２８／ＹＡ株致ＲＴ的比率为７１．４３％（１５／２１），染色体众数为４２（比率２８％～３０％）的Ｍ株致ＲＴ的比率为０％（０／１０），致形态类似于分化比较好的平滑肌肉瘤的恶性肿瘤的比率为１００％（１０／１０），可见ＢＨＫ－２１细胞不能用作病毒活疫苗培养基质，可替代Ｈｅｌａ细胞用作恶性肿瘤阳性对照细胞。高变异率ＢＨＫ－２１细胞株皮下接种无胸腺裸鼠大多产生恶性ＲＴ（２?

HIV毒株分离及体外感染实验研究

目的 从艾滋病病毒 (HIV)感染者 (万某 )分离获得HIV毒株 ,应用此毒株在体外攻击与HIV感染者长期无保护性行为未引发感染者 (张某 )及健康人的淋巴细胞 ,检测病毒感染细胞情况 ,研究抗感染保护的机制。方法 采用RT测定法和P2 4抗原检测法。将HIV感染者淋巴细胞与健康人淋巴细胞共培养 ,并将获得的HIV毒株体外攻击张某及健康人的淋巴细胞 ,分别观察细胞病变并检测P2 4抗原及逆转录酶的活性。结果 从万某血中分离获得了HIV 1毒株 ,连续 8周显微镜观察 ,从第 2周开始可见HIV特有的细胞病变 ,逆转录酶的活性检测和P2 4抗原检测结果从第 2周为阳性 ,说明病毒分离成功。健康人淋巴细胞自HIV 1感染后 2周开始 ,显微镜可观察到HIV 1特有的细胞病变 ,逆转录酶的活性检测和P2 4抗原检测结果均为阳性 ,表明HIV侵入。张某的淋巴细胞在HIV感染后显微镜下观察 ,始终未见特有的细胞病变 ,逆转录酶的活性检测和P2 4抗原检测结果均为阴性 ,表明HIV病毒未侵入细胞。结论 分离的毒株可以感染健康人淋巴细胞 ,说明病毒本身无变异 ;病毒不能侵入张某的淋巴细胞 ,可能是其淋巴细胞表面HIV 1受体或辅受体的基因或功能发生突变 ,导致病毒无法侵入机体。

赖氨酸阿司匹林对庆大霉素耳毒性的保护作用

目的探讨庆大霉素与赖氨酸阿司匹林混合用药对庆大霉素耳毒性的保护作用。方法健康♂豚鼠30只,随机分为3组:庆大霉素(GM)组、庆大霉素联合赖氨酸阿司匹林(GM+LAP)组和对照组。GM组:12mg·kg-1,sc,qd;GM+LAP组:GM 12 mg·kg-1+LAP 135 mg·kg-1,sc,qd。对照组:不给予任何药物。采用听性脑干反应(ABR)和耳蜗铺片观察用药前后听阈及耳蜗毛细胞形态学改变。结果GM组1、8 kHz ABR4 wk平均阈移与GM+LAP组间差异有统计学意义(P<0．05)。耳蜗铺片结果显示,GM组底圈毛细胞有损伤,与正常组比较排列不整齐,毛细胞损伤向上逐渐减轻,与听阈升高的程度相平行;而GM+LAP组的毛细胞排列整齐,无损伤。结论赖氨酸阿司匹林对庆大霉素耳毒性有保护作用。

Vero-2和MA-104细胞系染色体组型分析与致癌─致瘤性研究——在犬五联疫苗制备中替代BHK-21细胞系细胞株的筛选和检定

在用纯化３代的猫肾原代细胞（ＦＫＣ）和犬肾原代细胞（ＣＫＣ）皮下接种裸鼠无致癌致瘤性，以人类子宫颈癌细胞系（Ｈｅｌａ）超二倍体ＫＢ株、Ｘ株及超二倍体和亚四倍体ＮＭ２０／Ｘ株皮下接种裸鼠产生进行性恶性肿瘤比率分别为１０／１０，２５／２５和５／５的前提下，非洲绿猴肾细胞系亚二倍体（Ｖｅｒｏ２）ＪＣ株５～１９代和超二倍体ＹＡ株１２～１８代分别皮下接种２０和１０只裸鼠，均未产生肿瘤，恒河猴肾细胞系亚四倍体（ＭＡ１０４）ＪＣ株４代皮下接种５只裸鼠亦未产生肿瘤。不同株的Ｈｅｌａ和地鼠肾细胞系（ＢＨＫ２１）在３．３ｇ／Ｌ琼脂中均具有抛锚独立生长特性，并在终浓度３．１２５～２００ｍｇ／ｍＬ植物凝集素（ＰＨＡ）作用下出现凝集现象，而ＦＫＣ、ＣＫＣ及Ｖｅｒｏ２细胞系ＪＣ株、ＹＡ株既不具有抛锚独立生长特性，在不同浓度ＰＨＡ作用下也不发生凝集，符合非肿瘤源性细胞的特性。因此，Ｖｅｒｏ２细胞系ＪＣ株可用作病毒疫苗毒株的传代培养，而Ｖｅｒｏ２细胞系ＹＡ株和ＭＡ１０４细胞系ＪＣ株则不适宜。