缺血预处理对大鼠移植胰缺血再灌注损伤的保护作用及其与细胞凋亡的相关性

目的:探讨缺血预处理对大鼠移植胰缺血再灌注损伤的早期保护作用及其与细胞凋亡的相关性.方法:正常大鼠6只为对照组,糖尿病SD大鼠24只随机分为缺血再灌注组(I/R组,n=6)和缺血预处理组(IPC组,n=18),IPC组又根据不同方法分为3个亚组:IPC1组(缺血5min再灌注5min1次,n=6)、IPC2组(缺血5min再灌注5min2次,n=6)和IPC3组(缺血5min再灌注5min3次,n=6),I/R组和IPC组均行单纯胰腺移植,24只SD大鼠为供体;检测各组再灌注前、后血糖;再灌注后2h血清中TNF-α和NO的含量、移植胰组织中SOD,MPO和MDA含量;用TUNEL法观察移植胰组织细胞凋亡情况,WesternBlot法检测移植胰组织Bax和Bcl-2蛋白表达情况.结果:再灌注后IPC1(14.3±1.1vs12.1±0.9mmol/L.P<0.05)组、IPC2(12.1±0.9vs16.5±1.4mmol/L,P<0.01)和IPC3组(14.7±1.3vs12.1±0.9mmol/L,P<0.05)相对于I/R组血糖低;IPC2组较IPC1组(12.1±0.9vs14.3±1.1mmol/L,P<0.05)和IPC3组(12.1±0.9vs14.7±1.3mmol/L.P<0.05)血糖低.再灌注后IPC1(1.41±0.17vs1.79±0.25kU/L,P<0.05)组、IPC2(1.05±0.16vs1.79±0.25kU/L,P<0.01)和IPC3组(1.43±0.20vs1.79±0.25kU/L,P<0.05)较I/R组血清中TNF-α含量低;IPC2组较IPC1组(1.05±0.16vs1.41±0.17kU/L,P<0.05)和IPC3组(1.05±0.16vs1.43±0.20kU/L,P<0.05)TNF-α含量低.再灌注后IPC1(13.13±2.87vs8.91±1.23μg/L,P<0.05)组、IPC2(18.79±2.39vs8.91±1.23μg/L,p<0.01)和IPC3组(14.36±1.78vs8.91±1.23μg/L,P<0.05)较I/R组血清中NO含量高;IPC2组较IPC1组(18.79±2.39vs13.13±1.87μg/L,P<0.05)和IPC3组(18.79±2.39vs14.36±1.78μg/L,P<0.05)NO含量高.再灌注后IPC1(179.82±19.54vs153.47±17.67mU/g,P<0.05)组、IPC2(213.64±22.97vc153.47±17.67mU/g,P<0.01)和IPC3组(181.68±20.32vs153.47±17.67mU/g,P<0.05)较I/R.组移植胰组织中SOD活性高;IPC2组较IPC1组(213.64±22.97vs179.82±19.54mU/g,P<0.05)和IPC3组(213.64±22.97vs181.68±20,32mU/g.P<0.05)SOD活性高.再灌注后IPC1(0.70±0.26vs0.87±0.31mmol/g,P<0.05)组、IPC2(0.46±0.18vs0.87±0.31mmol/g,P<0.01)和IPC3组(0.67±0.15vs0.87±0.31mmol/g,P<0.05)较I/R组移植胰组织中MDA含量低;IPC2纽较IPC1组(0.46±0.18vs0.70±0.26mmol/g,P<0.05)和IPC3组(0.46±0.18vs10.67±0.15mmol/g,P<0.05)MDA含量低.再灌注后IPC1(0.81±0.23vs0.96±0.34A/g,P<0.05)组、IPC2(0.51±0.16vs0.96±0.34A/g,P<0.01)和IPC3组(0.78±0.22vs0.96±0.34A/g,P<0.05)较I/R.组移植胰组织中MPO活性低;IPC2组较IPC1组(0.51±0.16vs0.81±0.23A/g,P<0.05)和IPC3组(0.51+0.16vs0.78+0.22A/g,P<0.05)MPO活性低.再灌注后IPC1(25.21±3.47vs35.65±4.78%,P<0.01)组、IPC2(15.47±2.09vs35.65±4.78%,P<0.01)和IPC3组(24.89±3.56vs35.65±3.78%,P<0.01)较I/K组移植胰组织中AI值低;IPC2组较IPC1组(15.47±2.09vs25.21±3.47%,P<0.05)和IPC3组(15.47±2.09vs24.89±3.56%,P<0.05)AI值低.再灌注后I/R组胰组织Bax蛋白高表达,Bcl-2蛋白低表达,IPC各组再灌注后移植胰组织Bax蛋白低表达,Bcl-2蛋白高表达,而IPC2组Bcl-2蛋白表达最高Bax蛋白表达最低.结论:缺血预处理对大鼠移植胰的缺血再灌注损伤具有早期保护作用,可能于提高SOD的活性、增加内源性NO的合成、下调TNF-α和减轻PMNs黏附与聚集有关;缺血预处理可以减少移植胰缺血再灌注后的细胞凋亡,可能于减轻PMNs黏附与聚集、减少氧自由基、上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白有关;缺血5min再灌注5min2次是最佳的大鼠移植胰缺血预处理诱导办法.

胃癌耐药相关抗体MGr1筛选文库获得的基因MGr1-Ag1在胃癌组织中表达的研究

目的:为研究肿瘤的多药耐药现象,应用胃癌耐药相关的单克隆抗体MGr1筛选肿瘤耐药细胞表达文库获得的一个稳定阳性克隆的cDNA片段MGr1-Ag1,检测MGr1-Ag1在胃癌组织中的分布及表达水平.方法:利用原位杂交技术,对MGr1-Ag1mRNA在胃癌组织中的分布进行了检测,以了解其在胃癌中的表达情况及意义.结果:MGr1-Ag1mRNA定位在胃腺体细胞的胞质中,为蓝色小颗粒,呈弥漫性分布.MGr1-Ag1mRNA在SGC7901/VCR阳性信号明显高于SGC7901,胃癌与癌旁组织相比,MGr1-Ag1mRNA的阳性表达率均有显著差异(P<0.05).MGr1-Ag1mRNA在胃癌(50.00%)、癌旁组织(71.42%)、高分化腺癌(68.75%)和中分化腺癌组织(57.14%)中的阳性表达率无显著差别,但高分化组和中分化组都与低分化腺癌组织(10.00%)差别显著(P<0.05).此外,MGr1-Ag1mRNA还分布于小肠及大肠腺体内,因例数偏少,未做统计.结论:MGr1-Ag1与胃癌的分化程度有关,随着组织的分化程度增高,MGr1-Ag1mRNA的阳性表达率增加.

急性一氧化碳中毒患者脑脊液S-100β蛋白测定及临床意义

目的 测定急性一氧化碳中毒患者脑脊液 (CSF)S - 10 0 β蛋白变化 ,探讨其临床意义。 方法 采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测 35例急性一氧化碳中毒患者及 2 0例无神经系统疾病而需外科手术的腰麻患者CSFS - 10 0 β蛋白含量。结果 对照组与病例组患者CSF中S - 10 0 β蛋白含量分别为 (0 0 3± 0 0 1) μg/L ,(0 6± 0 36 ) μg/L (P <0 0 1) ;病例组CSF中S - 10 0 β蛋白含量与哥拉斯格昏迷评分呈相关性 ,相关系数 r为 - 0 975 (P <0 0 1) ;迟发性脑病发生组与未发生组CSF中S - 10 0 β蛋白含量分别为 (0 9± 0 18) μg/L ,(0 33± 0 16 ) μg/L (P <0 0 1)。 结论 检测急性一氧化碳中毒患者CSF中S -10 0 β蛋白含量的变化 ,有助于评估急性期脑组织受损的严重程度及预测迟发性脑病的发生。