MALDI-TOF-MS检测哈维弧菌前处理条件的探索及聚类分析

目的 对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测哈维弧菌的前处理条件进行优化,并通过聚类分析初步探讨质谱对哈维弧菌溯源性的价值。方法 本研究首先利用rpoB测序对33株哈维弧菌进行确证,然后利用MALDI-TOF-MS采集哈维弧菌蛋白指纹图谱。并通过培养基的选择、培养时间及样本处理方法对检验前操作程序进行优化。最后,利用MALDI-TOF-MS对33株哈维弧菌进行聚类分析,探讨质谱对细菌溯源性的价值。结果 本研究所用3种培养基的选择对哈维弧菌的鉴定结果差异无统计学意义(P>0.05)。培养时间18、24h哈维弧菌的鉴定结果优于48h的鉴定结果,差异有统计学意义(P<0.05)。但培养18、24h之间鉴定结果差异无统计学意义(P>0.05)。甲酸提取法的效果明显优于直接涂抹法,差异有统计学意义(P<0.05)。基于MALDI-TOF-MS法的聚类分析,能哈维弧菌病感染病原体的溯源提供理论依据。结论 MALDI-TOF-MS法操作简单、快速,可实现对哈维弧菌的准确鉴定和溯源性分析,在海洋渔业和海水养殖业将会发挥重要作用。