左氧氟沙星联合哌拉西林他唑巴坦对产超广谱β-内酰胺酶耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的防耐药突变浓度及耐药机制的研究

目的:探讨左氧氟沙星(LEV)联合哌拉西林他唑巴坦(TZP)对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的防耐药突变浓度(MPC)及耐药机制,为降低细菌耐药提供依据。方法:采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定抗菌药物对36株临床分离ESBLs耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度(MIC),计算部分抑菌浓度(FIC)指数;用肉汤富集浓度为10^13CFU·L^-1 CRKP,采用琼脂平板稀释法测定LEV和TZP单用及联用对36株临床分离CRKP的MPC,并计算相应的选择指数(SI);通过PCR扩增和DNA测序法监测突变基因。结果:FIC值表明LEV联合TZP对36株临床ESBLs阳性CRKP主要表现协同和相加作用,无拮抗作用;LEV、TZP联用前后,MPC分别由32~1024 mg·L^-1、512~1024 mg·L^-1降为4~256 mg·L^-1、16~512 mg·L^-1;SI明显下降。测序结果显示,联合用药较单一用药,耐药突变菌株的基因突变率明显降低。结论:LEV联合TZP显著降低了MIC、MPC,缩小突变选择窗(MSW),耐药菌株的基因突变率明显降低,有效的减少CRKP突变菌株的产生。