DOCK2在缺血性卒中大鼠小胶质细胞除极和神经发生中作用研究

目的 探究靶向胞质分裂作用因子蛋白(dedicator of cytokinesis 2,DOCK2)蛋白在缺血性卒中(IS)大鼠脑组织中对小胶质细胞除极与神经发生的影响。方法 将大鼠随机分为假手术(Sham)组,缺血性卒中(MCAO)组,IS+LC-shNC (MCAO+LV-shNC)组,IS+LV-shDOCK2 (MCAO+LV-shDOCK2)组,每组15只。7d后开展神经功能评分与Y型迷宫检测,取脑组织进行TTC染色、免疫荧光染色,取缺血侧海马组织开展RT-PCR检测、Western blot检测。结果 与Sham组相比,MCAO组与MCAO+LVshNC组大鼠脑组织中DOCK2表达增加(P<0.05),出现梗死区域,神经功能评分增加(P<0.05)。Y型迷宫中正确反应次数减少(P<0.05),正确反应时间增加(P<0.05)。此外,与Sham组相比,MCAO组与MCAO+LV-shNC组大鼠海马DG区BrdU阳性细胞数、DCX表达增加(P<0.05),小胶质细胞活化标记物iba1表达升高(P<0.05)。小胶质细胞极化标记物中,MCAO组与MCAO+LV-shNC组CD16、TNF-α、IL-1 β、iNOS mRNA表达明显增加(P<0.05),且CD206、TGF-β、Arg1、Ym1 mRNA表达增加。然而,与MCAO组相比,MCAO+LV-shDOCK2组大鼠脑组织中DOCK2表达降低(P<0.05),伴随着梗死面积减少(P<0.05),神经功能评分减少(P<0.05)。Y型迷宫中正确反应次数增加(P<0.05),正确反应时间减少(P<0.05)。与此同时,海马DG区BrdU阳性细胞数、DCX表达进一步增加(P<0.05),但iba1表达降低(P<0.05)。此外,M1型小胶质细胞标记物CD16、TNF-α、IL-1 β、iNOS mRNA表达减少(P<0.05),M2型TGF-β、Arg1、Ym1 mRNA表达进一步增加(P<0.05)。结论 敲低DOCK2蛋白表达有利于抑制小胶质细胞活化,逆转M1型小胶质细胞除极,提高M2型小胶质细胞除极化,最终起到促进神经发生,发挥神经功能与学习、记忆能力改善作用。