眼眶血流超声诊断视网膜中央动脉阻塞的临床应用探讨

目的探讨眼眶血流超声(OCDI)诊断视网膜中央动脉阻塞的临床应用价值。方法选择2015年1月至2021年9月中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院收治的34例(34眼)视网膜中央动脉阻塞患者的临床资料,其中年龄<60岁者15例(15眼),≥60岁者19例(19眼)。另纳入同期健康者30名(30眼)作为对照组。通过OCDI检测患者的患侧眼和健侧眼视网膜中央动脉血流动力学指标,包括收缩期峰值血流速度(PSV)、舒张末期血流速度(EDV)、阻力指数(RI)及搏动指数(PI)。通过Kappa一致性检验分析荧光素眼底血管造影术(FFA)检查结果与OCDI检查结果的一致性。分析OCDI检查为阴性的视网膜中央动脉阻塞患者的临床特征。结果视网膜中央动脉阻塞患者患侧眼PSV、EDV水平低于健侧眼,RI、PI水平高于健侧眼,差异有统计学意义(P<0.05)。年龄≥60岁的视网膜中央动脉阻塞患者患侧眼PI水平显著高于对照组(P<0.05),但与健侧眼比较差异无统计学意义(P>0.05),PSV、EDV及RI指标在患侧眼、健侧眼和对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。年龄<60岁的视网膜中央动脉阻塞患者患侧眼PSV、EDV水平显著低于健侧眼和对照组(P<0.05),PI、RI水平显著高于对照组(P<0.05),但与健侧眼比较差异无统计学意义(P>0.05)。OCDI与FFA诊断视网膜中央动脉阻塞结果具有较好的一致性(Kappa=0.807,P<0.001)。OCDI诊断阴性者发病至就诊时间迟于阳性者,差异有统计学意义(P<0.05),其患侧眼与健侧眼PSV、EDV及RI比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论视网膜中央动脉阻塞患者的视网膜中央动脉的血流动力学均发生显著改变,OCDI检查有助于视网膜中央动脉阻塞的早期诊断。

一种改良的Sprague Dawley新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法

目的改良SpragueDawley(SD)新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法。方法取新生1~2d的SD,分2d完成视网膜Müller细胞的提取,第1天将眼球浸泡于含体积分数1%双抗的无血清高糖达尔伯克改良伊戈尔培养基(DMEM)中,置于37℃、含体积分数5%CO2的培养箱内过夜;第2天,去培养基,以2.5g·L^-1胰蛋白酶消化眼球1h,分离视网膜组织,加入含体积分数1%双抗和体积分数10%胎牛血清的高糖DMEM培养基,制备细胞悬液接种培养;24h后换液,6~8d后传代,传至第4代,细胞免疫荧光染色法鉴定Müller细胞纯度。结果Müller细胞贴壁生长良好,细胞体宽大,细胞质丰富,细胞核呈圆形或椭圆形,无神经元共生长,Müller细胞纯度>95%。结论改良的SD新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法操作简单,细胞纯度高。

改良法制作的视网膜切片内核层神经元的形态和电学特性

目的:探讨低温琼脂包埋振动切片机切片法制作的大鼠视网膜切片内核层神经元的形态和基本电生理学特性。方法:采用低温琼脂包埋振动切片机切片的方法制作大鼠视网膜切片,对内核层的神经元进行膜片钳全细胞记录,同时在胞内液中加入荧光黄观察记录细胞的形态。结果:该方法制作的视网膜切片切面平整、细胞活性好、保留了细胞之间的突起联系,能够根据细胞胞体的大小、位置初步辨别细胞的种类。在视网膜切片上荧光黄显示的细胞形态表明,双极细胞胞体呈梭形,突起主要沿纵向延伸;而水平细胞和无长突细胞胞体圆形或椭圆形、胞体较大,分别位于内核层的最外层和最内层。水平细胞和无长突细胞的静息膜电位(RMP)和膜电容(Cm)明显高于双极细胞。给予时程40ms,步阶10mV从-60mV至+40mV的电压刺激,41.7%的视锥双极细胞和64.7%的无长突细胞表现出内向钠电流和外向钾电流,其他细胞则只表现出外向钾电流。结论:采用低温琼脂包埋振动切片机切片的方法操作简单,制作的切片质量稳定可靠,使得在视网膜切片上对包括水平细胞在内的不同内核层神经元进行膜片钳记录成为可能。进一步研究视网膜内核层神经元的电生理学特性,有助于揭示视觉信号的发生、传导和调控机制。

配对免疫球蛋白样受体B在视神经损伤与修复中的作用研究进展

中枢神经系统(CNS)损伤后再生十分困难,其修复与再生一直是医学研究的难点和热点。视神经是特殊的CNS,关于视神经损伤修复的研究,不仅对视相关疾病意义重大,也对CNS相关疾病有很好的借鉴意义。髓磷脂相关抑制因子(MAI)对CNS再生的抑制是视神经损伤后再生困难的关键因素之一。配对免疫球蛋白样受体B(PirB)是3种主要的MAI的共同受体,许多研究发现,PirB在包括视神经在内的CNS中广泛表达,并具有调控神经元发育、生长导向及可塑性等作用,阻抑CNS中PirB表达可以促进中枢神经再生修复。深入了解PirB的功能可能为神经再生带来新的希望。