芝麻素对人外周血中γδT细胞体外增殖及杀伤胃癌细胞株BCG-823作用的影响

目的探讨芝麻素对人外周血中γδT细胞体外增殖及杀伤胃癌细胞株BCG-823作用的影响。方法分离健康志愿者外周血单个核细胞,经GT-T551无血清培养基(含诱导γδT细胞的细胞因子)诱导培养10 d后,采用异硫氰酸荧光素进行标记,流式细胞仪检测γδT细胞的表型。用不同浓度(0μg/mL、0.156μg/mL、0.313μg/mL、0.625μg/mL、1.250μg/mL、2.500μg/mL、5.000μg/mL、10.000μg/mL、20.000μg/mL、40.000μg/mL、80.000μg/mL、100.000μg/mL)的芝麻素诱导γδT细胞48 h,采用细胞计数法检测γδT细胞增殖情况;选择增殖效果较好的芝麻素浓度诱导γδT细胞48 h,采用流式细胞术检测γδT细胞中穿孔素、颗粒酶B及CD107a的表达水平;采用乳酸脱氢酶法检测γδT细胞对胃癌细胞株BCG-823的杀伤活性。结果培养前外周血中γδT细胞百分率约为6.14%,培养10 d后外周血中γδT细胞百分率高达90.34%。与对照组(0μg/mL芝麻素组)相比,0.156μg/mL、0.313μg/mL、0.625μg/mL、1.250μg/mL、2.500μg/mL芝麻素组的γδT细胞增殖率均升高(均P<0.05),其中芝麻素浓度为1.250μg/mL时γδT细胞增殖率最高;而当芝麻素浓度达到5.000μg/mL以上时,对γδT细胞的生长起抑制作用。0.625μg/mL、1.250μg/mL、2.500μg/mL芝麻素组γδT细胞的颗粒酶B表达水平均高于对照组(P<0.05);0.156μg/mL、0.313μg/mL、0.625μg/mL、1.250μg/mL及2.500μg/mL芝麻素组γδT细胞的穿孔素表达水平均高于对照组(均P<0.05);0.313μg/mL、0.625μg/mL、1.250μg/mL及2.500μg/mL芝麻素组γδT细胞的CD107a表达水平均高于对照组(均P<0.05)。作用48 h后,0.156μg/mL、0.313μg/mL、0.625μg/mL、1.250μg/mL、2.500μg/mL、5.000μg/mL芝麻素组γδT细胞对胃癌细胞BCG-823的杀伤活性均高于对照组(均P<0.05)。结论采用适宜浓度的芝麻素诱导人外周血γδT细胞,可增加γδT细胞的增殖率及其对胃癌细胞BCG-823的杀伤作用,这可能与其上调γδT细胞的颗粒酶B-穿孔素通路和CD107a表达有关。