禽白血病病毒p27基因在原核细胞的表达及生物学特性的初步分析

将禽白血病病毒(ALV)的p27基因克隆入表达性载体pET28a,在大肠杆菌以HisTag融合蛋白的形式获得了高效表达。以表达产物免疫家兔,制备了抗ALVp27的多克隆抗体,经亲和纯化后,用此抗体建立了对ALV抗原的双抗体夹心法ELISA,并对疑似病料进行了实验室诊断。检测结果与IDEXX的禽白血病抗原检测试剂盒符合率达到98.6%,证明表达产物保留了天然p27蛋白的相关抗原性。交叉试验和群特异性试验证明,此方法具有良好的特异性,并且可以检测出A、BJ、亚群的禽白血病病毒p27抗原。用此ALV抗体和所建立的ELISA方法成功地进行了禽白血病病毒抗原的实验室诊断。