基于网络药理学与分子对接探究中兽药复方乳康颗粒治疗奶牛乳房炎的作用机制

【目的】探究中兽药复方乳康颗粒(RKG)治疗奶牛乳房炎的作用机制。【方法】通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)、中医药百科全书(ETCM)平台获取中兽药复方乳康颗粒中黄芪、王不留行、益母草的有效成分及靶点,利用Cytoscape v 3.7.2构建中兽药复方乳康颗粒中药-成分-靶点网络图,从NCBI、OMIM、GeneCards、MalaCards平台获取奶牛乳房炎靶点,使用Cytoscape v 3.7.2中的Bisogenet插件对中兽药复方乳康颗粒成分靶点及奶牛乳房炎的靶点进行综合分析,构建蛋白互作(PPI)网络图,并使用DAVID进行GO功能和KEGG通路富集分析,探讨其治疗奶牛乳房炎的作用机制。采用分子对接对网络药理学预测结果进行初步验证。【结果】通过网络药理学筛选出槲皮素、山奈酚、异鼠李素等23个中兽药复方乳康颗粒相关的活性成分,文献检索得到奶牛乳房炎相关靶点有肿瘤坏死因子(TNF)、Toll样受体4(TLR4)、白细胞介素17A(IL17A)等49个,通过Bisogenet插件对其进行PPI分析后得到中兽药复方乳康颗粒作用于奶牛乳房炎的关键靶点77个,涉及到靶点肿瘤蛋白P53(TP53)、核因子κB P65(RELA)及乳腺癌1号基因(BRCA1)等。GO功能富集分析结果表明,生物过程富集在DNA修复、蛋白质泛素化等;主要通过泛素蛋白连接酶结合、ATP结合等分子功能发挥作用;细胞组分条目涉及胞浆、细胞质和细胞核等。KEGG通路富集分析结果表明,中兽药复方乳康颗粒主要调节丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)、PI3K-Akt等信号通路。分子对接结果表明,槲皮素、山奈酚、异鼠李素与BRCA1、RELA和TP53之间均形成了氢键,且结合能<-3 kJ/mol,其中RELA与上述成分亲和力最强。【结论】网络药理学分析表明,中兽药复方乳康颗粒主要通过槲皮素、山奈酚、异鼠李素等有效成分作用于TP53、MAPK、BRCA1、RELA等靶点,调节MAPK、PI3K-Akt等信号通路,从而达到治疗奶牛乳房炎的作用。

固相萃取-高效液相色谱法测定禽类可食性组织和蛋中氨丙啉残留

该文建立了固相萃取-高效液相色谱法检测鸡、鸭、鹅的可食性组织(肌肉、肝脏、肾脏、脂肪)和蛋中氨丙啉残留的分析方法。样品中的氨丙啉经三氯乙酸-乙腈溶液提取,固相萃取柱净化。色谱柱为亲水性C18色谱柱,使用甲醇-乙腈-6mmol/L1-庚烷磺酸钠溶液为流动相进行等度洗脱,检测波长为268nm。氨丙啉在0.1~10μg/mL呈良好的线性关系,r^(2)为0.999。该方法对鸡、鸭、鹅的肌肉中氨丙啉的检出限为150μg/kg,定量限为250μg/kg;鸡、鸭、鹅的肝脏、肾脏、脂肪、蛋中氨丙啉的检出限为250μg/kg,定量限为500μg/kg。这些空白组织中添加水平分别为定量限0.5倍、1倍、2倍最大残留限量时,各组织中氨丙啉的平均回收率在74.65%~96.24%之间,其日内和日间相对标准偏差分别小于15%。该方法准确度和精密度高,适用于禽类可食性组织和蛋中氨丙啉残留的检测,为日常工作中食品质量控制提供了一种可行的方法。

高效液相色谱法测定天然植物饲料原料中绿原酸含量

本文旨在建立一种高效液相色谱法测定天然植物饲料原料中绿原酸含量的分析方法。样品用甲醇水溶液(1:1,V/V)提取后,滤过,高效液相色谱法测定。色谱柱为岛津InertSustain C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.4%醋酸溶液为流动相,梯度洗脱。柱温25℃,流速1.0 mL/min,检测波长330 nm。结果表明:该方法在0.025~0.5 mg/mL内线性良好,R^(2)=0.999 9;该方法具有较好的重复性、准确度和精密度,加样回收率为93.08%~104.86%,相对标准偏差(RSD)小于3.07%,可用于测定天然植物饲料原料中绿原酸含量。

高效液相色谱法测定天然植物饲料原料中甘草酸含量

试验旨在建立一种高效液相色谱法测定天然植物饲料原料中甘草酸含量的分析方法。样品用甲醇-0.2 mol/L乙酸铵溶液-冰醋酸(67:33:1,V/V/V)提取后,过滤,高效液相色谱法测定。色谱柱为岛津InertSustain C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.2 mol/L乙酸铵溶液-冰醋酸(67:33:1,V/V/V)为流动相,柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测波长为250 nm。结果表明:该方法在0.01~0.2 mg/mL内线性良好,r2大于0.999。该方法具有较好的重复性、准确度和精密度,加样回收率为92%~105%,相对标准偏差小于1.35%,可用于测定天然植物饲料原料中甘草酸含量。

基于数据挖掘分析含苍术防治瘟疫病方剂的用药规律

通过数据挖掘方法,对书籍资料中防治瘟疫病的方剂进行整理并分析其用药规律,以期为中药苍术的临床应用及新型中药制剂开发提供参考与借鉴。收集书籍资料中含苍术防治瘟疫病的处方,利用统计分析、关联规则分析和聚类分析等数据挖掘方法,对处方所涉及药物的用药频次、四气、五味、归经、关联规则等用药规律进行分析。结果:共收集65首处方,涉及中药195味,药性以温性为主,药味以辛为主,归脾、胃、肺经;高频中药由苍术、甘草、厚朴等11味中药构成;核心用药与高频中药一致。瘟疫病治疗时需根据病情合理用药施治,本研究得到的核心用药组合与瘟疫病上中下三焦对应,符合瘟疫病发生发展的规律,为苍术在临床中防治瘟疫病方面的应用提供了一定的参考。

复方癸甲氯铵溶液的消毒效果评价

为了明确复方癸甲氯铵溶液对大肠埃希菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)的消毒效果,本试验采用悬液定性杀菌试验、悬液定量杀菌试验、使用液稳定性试验和金属腐蚀性试验进行观察和评估。结果显示,复方癸甲氯铵溶液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的最低有效杀菌浓度分别为1∶12800和1∶25600,该浓度下杀菌最快有效时间均为10 min;复方癸甲氯铵溶液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌作用2.5 min,杀菌率可达100%,杀灭对数值≥5;在第0~3天内,随时间的延长复方癸甲氯铵溶液pH有下降趋势,且消毒效果稳定,可满足杀菌要求。复方癸甲氯铵溶液对不锈钢和铝基本无腐蚀性,对碳钢和铜有轻度腐蚀性。结果表明,复方癸甲氯铵溶液在较低浓度条件下即能快速有效杀灭细菌,且稳定性好、腐蚀性小。本试验对复方癸甲氯铵溶液的临床应用具有指导意义。

复方癸甲氯铵消毒剂杀菌影响因素及对空气现场消毒效果研究

研究温度、pH、有机物等因素对复方癸甲氯铵消毒剂杀菌效果的影响,并在猪舍和鸡舍验证消毒剂的实际消毒效果,为临床使用提供指导。结果显示,在2℃时,复方癸甲氯铵作用1 min对大肠埃希氏菌杀菌率高于99.9%,其余不同温度下不同作用时间的杀菌率均为100.0%;在不同温度下对金黄色葡萄球菌作用,不同时间的杀菌率均为100.0%;在不同pH条件下,复方癸甲氯铵消毒剂对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的杀菌率均为100.0%。在不同有机物浓度条件下,该消毒剂对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的杀菌率均为100.0%。对空气现场消毒结果显示,在猪舍和鸡舍中该消毒剂1∶500、1∶1000以及1∶2000稀释后在10 min、30 min、60 min的消毒效果与对照药物效果相当。综上所述,该复方癸甲氯铵消毒剂对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的杀灭效果基本不受温度、pH和有机物的影响。

12种抗菌药物抗大肠埃希氏菌的增效剂筛选试验

筛选氟苯尼考等12种临床常用抗菌药物的抗大肠埃希氏菌增效剂。采用微量稀释法分别测定12种抗菌药物和丁香酚等8种可能成分的最小抑菌浓度(MIC);棋盘稀释法测定可能成分与抗菌药物联用抑菌浓度(FIC)指数,确定可能成分对抗菌药物的协同或相加、无关或拮抗作用。根据MIC和FIC指数分析发现,丁香酚、尼泊金酯钠、羧甲壳聚糖、没食子酸酯和乙基麦芽酚不仅具有抑菌作用且与多数抗菌药物联用对大肠埃希氏菌有明显的协同或相加作用,仅与少数抗菌药物联用存在无关或拮抗作用。丁香酚与庆大霉素等8种、尼泊金酯钠与金霉素等10种、羧甲壳聚糖与庆大霉素等11种、没食子酸酯与多西环素等9种、乙基麦芽酚与庆大霉素等12种抗菌药物具有协同或相加作用,可以作为抗大肠埃希氏菌类抗菌药物的抗菌增效剂候选药物,临床上联合使用可增加抗菌药物的疗效,降低抗菌药物在临床抗大肠埃希氏菌感染的用量。

不同配方山苍子精油溶液剂的抑菌效果评价

通过气质联用的方法检测了山苍子精油中的主要活性成分柠檬醛的含量,并且通过山苍子精油原油的抑菌圈试验,考察了山苍子精油原油对菌金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠埃希氏菌(8099)和白色念珠菌(ATCC 10231)的抑菌效果。通过考察辅料的溶解度,配制了6种不同配方的山苍子精油溶液剂。用最小抑菌浓度(MIC)方法检测了6种不同配方的山苍子精油溶液剂对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌的抑菌效果。结果显示,使用的山苍子精油中柠檬醛的含量为19.87μg/mL。山苍子精油对3种菌株的抑菌圈直径均>20 mm,表明此3种菌对山苍子精油的抑制极为敏感。通过MIC结果可知,溶液剂A、溶液剂D和溶液剂C对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好,MIC为1.95μL/mL;溶液剂B和溶液剂C对大肠埃希氏菌的抑菌效果最好,MIC为125.00μL/mL。而这6种山苍子精油溶液剂对白色念珠菌均无抑菌效果。6种不同配方的山苍子精油溶液剂对革兰氏阳性菌的抑菌效果普遍高于革兰氏阴性菌。

茵山莲水提物对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

为探讨茵山莲水提物对四氯化碳(CCl_(4))诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制,以对后续茵山莲的深入研究及临床转化提供理论指导。将60只ICR小鼠随机分为6组,每组10只,分别为空白对照组、模型对照组、联苯双酯对照组、茵山莲低(1.17 mg·g^(-1))、中(2.34 mg·g^(-1))、高(4.68 mg·g^(-1))剂量组,按不同剂量药物每天灌胃1次,给药7 d。在末次给药1 h后,除空白对照组以外,其余各组小鼠腹腔注射0.2%四氯化碳构建急性肝损伤模型。12 h后小鼠眼球采血并分离血清,收集肝组织。采用生化分析检测血清总蛋白(TP)和谷胱甘肽S转移酶(GST)活性,肝组织中GST、琥珀酸脱氢酶(SDH)、过氧化氢酶(CAT)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,利用HE染色和Masson染色观察肝组织病理及肝纤维化情况,采用蛋白免疫印迹法和免疫组织化学法检测肝组织白介素1beta(IL-1β)、肿瘤坏死因子alpha(TNF-α)、血管生成因子A(VEGFA),金属基质蛋白酶9(MMP9)及转录因子NF-κBp65、蛋白激酶IKK、p38MAPK等蛋白表达及定位情况。结果表明,与模型对照组相比,2.34 mg·g^(-1)茵山莲水提物能显著降低小鼠血清GST水平,显著升高肝内CAT水平,各组间T-SOD无显著差异,但2.34 mg·g^(-1)茵山莲水提物组小鼠与空白对照组、模型对照组在肝GST、SDH和血清TP水平上无显著差异。2.34 mg·g^(-1)茵山莲水提物能缓解CCl_(4)诱导的小鼠肝病理损伤和纤维化病变,抑制肝IL-1β、TNF-α、VEGFA、NF-κBp65和IKK的表达。提示茵山莲水提物可能通过NF-κB和p38MAPK通路抑制肝氧化应激和炎症水平,从而缓解小鼠急性肝损伤。

黄马通淋口服液质量标准研究

在来源处方肾炎片质量标准的基础上,对黄马通淋口服液进行全面的质量评价,提高和完善黄马通淋口服液的质量标准。选取了不同产地的药材制备出10批黄马通淋口服液的样品,进行性状、pH值,相对密度的检查,采用盐酸镁粉颜色反应定性鉴别黄马通淋口服液中的黄酮类化合物,采用TLC法对黄马通淋口服液中一枝黄花进行定性鉴别,并采用HPLC法测定毛蕊花糖苷含量。选用Agilent Zobax Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.2%磷酸(20∶80)为流动相,检测波长为330 nm,柱温为30℃,流速为每分钟1.0 mL,进样量为10μL。10批黄马通淋口服液均为棕色至棕褐色液体,pH值在4.7~5.2,相对密度在1.05~1.11;在盐酸镁粉颜色反应中,溶液显示出橙黄色,说明制剂中含有黄酮类化合物;在薄层鉴别中一枝黄花有良好的鉴别特征;有效成分毛蕊花糖苷浓度在10.36~207.20μg/mL时,进样浓度与峰面积之间存在良好的线性关系(r=0.9992);平均加样回收率为101.96%,RSD=1.99%。盐酸镁粉反应中颜色反应明显,易辨别。在薄层鉴别中一枝黄花有良好的鉴别特征,方法操作简便、阴性对照无干扰;毛蕊花糖苷的含量测定方法简便、准确、可靠,可用于控制黄马通淋口服液的质量。

仔猪断奶应激综合征与腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证对比研究

仔猪断奶后1~2周,通常发生食欲差、消化功能紊乱、腹泻、生长缓慢、饲料利用率低、精神状况以及外貌表现不佳等一系列变化的现象,总称仔猪断奶应激综合征。其病死率较高,即使耐受也会严重影响到仔猪后期生长发育和成年后的生产性能,临床治愈率不高,并缺乏合适的实验动物模型用以研究。经文献分析,仔猪断奶应激综合征和腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证在病因、病机和证型上有共同之处。因此该文就仔猪断奶应激和腹泻型肠易激综合征动物模型的病因、病机、证型和相关实验动物模型做一综述,为应用腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证动物模型研究临床复杂性疾病仔猪断奶应激综合征提供支持。