SGK通过下调抑癌基因p27蛋白促进小鼠肿瘤生长

肿瘤已成为老年动物常见疾病。多种恶性肿瘤高表达血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK),但其对肿瘤生长的作用机理还未完全解析。为了探究SGK对肿瘤生长的影响及作用机制,本研究利用人乳腺癌细胞系(MDA-MB-231),通过小干扰RNA(siRNA)敲低SGK,使用二甲氧唑黄(XTT)、溴脱氧尿苷(Brdu)和软琼脂克隆形成试验检测SGK对MDA-MB-231细胞增殖和转化的影响;利用过表达系统构建小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3/HER2/SGK和NIH3T3/HER2/SGK/p27,通过XTT、Brdu、流式细胞术和软琼脂克隆形成试验探究SGK是否通过抑癌基因p27蛋白调控肿瘤细胞的增殖转化和细胞周期;使用蛋白免疫印迹(WB)和免疫荧光(IF)技术分析SGK调控p27的机制;利用裸鼠构建体内肿瘤模型,通过计算形成肿瘤的体积和免疫组织化学(IHC)技术分析SGK调控肿瘤生长的机制。结果显示,敲低SGK能够显著下调肿瘤细胞的增殖和转化(P<0.05);过表达p27能够明显降低肿瘤细胞的增殖和转化(P<0.05),且G0-G1期的细胞数量增多,而过表达SGK能够逆转这些现象;此外,过表达SGK能够诱导p27定位于细胞质。在小鼠肿瘤模型中也显示,SGK能够降低p27蛋白水平,促进肿瘤生长。结果表明,无论在体外还是体内,SGK均能够通过抑制p27促进肿瘤细胞生长,提示SGK可以作为动物肿瘤疾病诊断和预后的指标,是肿瘤相关药物研发的潜在靶点。