新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之五——SPF级SD大鼠血液生化参考值的建立

目的建立新药慢性毒性试验SD大鼠血液生化正常参考值。方法采用全自动生化测定仪对不同年龄、不同性别SPF级SD大鼠的血液生化值进行了测定。结果取得不同年龄、性别SD大鼠血液生化值平均值及正常参考值范围。多数生化指标受年龄及性别因素影响。其中,不同性别总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、甘油三酯(TG),不同年龄碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)变化最具规律性。结论在新药慢性毒性试验中,雌、雄SD大鼠血液生化指标不宜合并统计,在比对正常参考值时应考虑到性别与年龄的因素。

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之六——SPF级Wistar大鼠血液生化参考值的建立

目的建立新药慢性毒性试验Wistar大鼠血液生化参考值。方法采用全自动生化测定仪对不同年龄、不同性别SPF级Wistar大鼠的血液生化值进行了测定。结果取得不同年龄、性别Wistar大鼠血液生化值平均值及参考值范围。多数生化指标受年龄及性别因素影响。其中,不同性别TBil、ALP、TG,不同年龄ALP、CK、TG、CHO变化最具规律性。结论在新药慢性毒性试验中,雌雄Wistar大鼠血液生化指标不宜合并统计,在比对参考值时应考虑到性别与年龄的因素。

动物鹦鹉热衣原体疫苗研究现状

鹦鹉热衣原体为多种人畜共患病的病原体。衣原体免疫学机制研究表明其主要引发Thl细胞调节的细胞免疫和体液免疫。减毒活疫苗、灭活疫苗的使用在一定程度上控制了其发病率。基因工程疫苗,如重组亚单位苗、核酸疫苗、细茵载体苗等也都在深入研究中。同时,人们也在筛选特异性的抗原,构建各种疫苗载体及选择免疫佐剂和免疫途径等方面做了大量的工作。

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之四——血样存放温度对生化值的影响

目的探讨不同存放温度对所测定血液样本生化值的影响。方法采用全自动生化仪对存放于不同温度条件下动物血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHO)等生化值进行测定。结果血样不同温度存放相同时间,血清生化值出现不同程度变化。其中,存放温度对TP、ALB、ALT、CHO及TBil影响最为明显。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对制备的血液样本存放温度应进行规范与统一。

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之二——样品制备方法对血液生化值的影响

目的探讨血液不同制备方法对其血液生化值的影响。方法采用全自动生化仪对不同制备方法血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHO)等生化值进行测定。结果相同动物血清血浆、不同离心温度及禁食后不同时间点采血均影响血液生化值。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对测定样品的制备方法应进行规范与统一。

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之三——血样存放时间对生化值的影响

目的探讨不同存放时间对所测定血液样本生化值的影响。方法采用全自动生化仪对存放不同时间动物血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHO)等生化值进行测定。结果相同温度存放不同时间,血清生化值出现不同程度的变化。其中,存放时间对TP、ALB及CHO影响最为明显。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对制备后的血液样本,在一定温度下的存放时间应进行规范与统一。

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之七——Beagle犬血液生化参考值的建立

目的建立新药慢性毒性试验Beagle犬血液生化参考值。方法采用全自动生化测定仪对不同年龄、不同性别Beagle犬的血液生化值进行了测定。结果取得不同年龄、性别Beagle犬血液生化值平均值及参考值范围。部分生化指标受性别因素影响。ALP、CK有随年龄增长而降低的趋势。结论在新药慢性毒性试验中,参比参考值时应考虑到Beagle犬性别与年龄的因素。

新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之一——采血部位对血液生化值的影响

目的探讨从大鼠不同部位采血对其血液生化值的影响。方法采用全自动生化仪对不同部位采血动物血液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHO)等生化值进行测定。结果(大鼠)腹主动脉及颈外静脉均与后腔静脉血液生化值在总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)上存在明显差异,表现为前者血清中总蛋白、白蛋白明显高于后者;大鼠眶静脉与股静脉血液生化值在多项指标上亦存在明显区别。结论建议在长毒试验动物血液生化测定中,对采血部位应进行规范与统一。

中国实验小型猪培育和病原净化

“中国实验用小型猪 (CEMP)的培育、开发与应用”是农业部“七五”和“八五”期间的重点攻关项目。自从CEMP培育成功以来 ,经过不断的选育净化 ,CEMP已逐渐成为一种理想的实验动物 。

禽网状内皮组织增殖病研究进展

综述了禽网状内皮组织增殖病的发生与分布、病原学、发病机制、流行病学、诊断与防制。

种鸡场鸡白血病净化的研究(Ⅲ)——ALV检测不同样品种鸡场净化效果的比较

应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (DAS- EL ISA)在种鸡白血病的净化中 ,针对同一种鸡群 ,同时采用蛋清和肛拭作为试验材料 ,实验反映的结果不同 ;将产第一枚蛋为阳性的鸡隔离饲养 ,检测其以后蛋中 AL V的状况 ,结果发现 :在随后的 2 5天左右的每一枚蛋清中都能检测到 AL V:在不同种鸡场分别采用蛋清、蛋清和肛拭同时作试验样品进行净化 ,跟踪结果发现 :在不同种鸡场中 ,AL V阳性感染率都有不同幅度的下降。另一方面 ,检测雏鸡的胎粪 ,淘汰阳性者 ,到其产蛋期抽检蛋清 ,该群鸡 AL

鸡毒支原体诊断方法研究进展

鸡毒支原体诊断方法研究进展郭建华＊陈德威（中国农业大学实验动物研究所，北京海淀１０００９４自从１９３３年Ｎｅｌｓｏｎ［１］首次观察到鸡毒支原体至今，人们对鸡毒支原体已有比较全面、系统的了解和认识。在此期间，鸡毒支原体的诊断方法也从原来的分离和鉴定，发...

种鸡场鸡白血病净化的研究(Ⅱ)——鸡白血病病毒ELISA检测抗体包被稳定剂的研究

本研究应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (DAS- EL ISA) ,对吸附在酶标板上的抗体 (兔抗禽白血病病毒群特异性抗原的 Ig G)通过 4种稳定剂处理之后 ,置于 4～ 8℃、室温 (18～ 2 3℃ )、37℃条件下 ,存放 11天、19天 ,结果发现 :利用 DAS-EL ISA检测同一 AL V阳性蛋清样品 ,测定 OD值大小不同。选择合适的稳定剂处理酶标板 ,在 4～ 8℃条件下保存半年 ,对吸附在酶标板上抗体活性进行探讨 ,其中以山梨醇和 PVP为代表的两种稳定剂效果良好 ,和常规包被抗体 (4～ 8℃隔夜 )

戊二醛复合消毒剂对猪病病毒杀灭效果的研究

目的 研究戊二醛复合消毒剂对猪病病毒的杀灭效果。方法 将猪细小病毒 (porcinepavrovirusvirus ,PPV)、猪繁殖呼吸综合征病毒 (porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV)和猪伪狂犬病病毒(porcinepseudorabiesvirus,PRV)分别与不同浓度的戊二醛复合消毒剂作用后 ,接种于长满细胞单层的细胞培养板中 ,根据细胞是否产生病变情况 ,确定消毒剂杀灭病毒的最佳浓度 ;同时 ,还将不同浓度的消毒剂与猪瘟病毒 (hogchloeravirus,HCV)作用后 ,对兔进行静脉注射 ,根据兔的体温变化情况 ,判断消毒剂杀灭病毒的最佳浓度。结果 1%浓度的消毒剂 ,可在 2 0min之内有效杀灭PPV、PRRSV和PRV ;0 5 %浓度的消毒剂 ,可在 10min之内有效杀灭HCV。结论 戊二醛复合消毒剂具有高效杀灭病毒的作用 ,适用于养殖场、医疗卫生行业及传染病流行地区的消毒灭菌 ;

禽副粘病毒2型(PMV-2)群特异性单克隆抗体的研究

禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )鸡胚成纤维细胞适应毒经差速离心和蔗糖密度梯度离心法提纯 ,免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,经间接ELISA方法筛选 ,有限稀释 3次克隆 ,获得了两株分泌PMV 2单克隆抗体的杂交瘤细胞株 6E9和 7E5。经鉴定两株单抗均为IgG1亚类 ,杂交瘤细胞的平均染色体分别为 96条和98条。细胞培养上清及腹水效价分别为 1∶2 5 6 0 0、1∶5 12 0 0和 1∶10 5、1∶10 7。 6E9和 7E5单抗能稳定分泌抗体且与NDV、AIV、EDSV无交叉反应。间接ELISA实验表明 4株PMV 2 (Yucaipa株、F4 株、F6株和F8株 )均含有单抗6E9和 7E5所针对的位点。

孔雀IgG与鸡IgG的初步比较研究

通过比较孔雀 Ig G与鸡 Ig G的相似性 ,证实鸡疾病诊断试剂用于孔雀疾病诊断的可行性。用饱和硫酸铵盐析法提纯鸡 Ig G、孔雀 Ig G,比较 Ig G粗提物的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱。用直接 EL ISA方法分析孔雀 Ig G、鸡 Ig G与抗鸡 Ig G结合程度的差异 ,并用蛋白免疫转印法进一步验证二者与抗鸡 Ig G的结合情况。最后 ,应用数种鸡疾病诊断试剂盒及血凝抑制实验进行孔雀疾病的血清学调查及诊断应用初步研究。结果表明 :孔雀 Ig G与鸡 Ig G具有较大相似性 ,并能够与兔抗鸡酶标二抗结合 ,但结合力弱于鸡 Ig G;

检测禽副粘病毒2型抗原的双抗体夹心ELISA方法的研究

以禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )群特异性单抗 7E5为基础建立了检测PMV_2抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对Yucaipa病毒的最低检出量为 1.6 96 2 μg/ml,对PMV_2不同形式病毒及各分离株也都有很好的检出率。用Yucaipa病毒尿囊液人工感染 10日龄SPF鸡 ,于感染后不同时间采集心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、气管等病科及泄殖腔拭子 ,经处理后用建立的方法进行检测 ,结果表明PMV_2病毒在感染鸡的法氏囊组织内大量存在 ,感染后 3天就可从法氏囊组织内检测到PMV_2病毒 ,粪便中仅个别有检出阳性者。