李属坏死环斑病毒CP基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清制备

本实验用RT$CPCR的方法获得李属坏死环斑病毒的cp基因,并将其连接到表达载体pET-22b(+)上,得到重组质粒pETPNRSVCP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达。SDSPAGE和Westernblot分析结果表明,cp基因在大肠杆菌中获得了高效表达,获得的融合蛋白分子量约为29.0kDa。将该融合蛋白免疫兔子,获得PNRSV特异性抗血清。酶联法(ELISA)测定的效价为1/1024。为用血清学方法检测该病毒提供了基础条件。