中国甘薯主要育成品种的遗传多样性及遗传趋势

用ISSR和AFLP分子标记手段，对中国不同时期不同甘薯种植区的26份主要育成品种进行遗传多样性和遗传趋势分析，结果表明：①17条ISSR引物共扩增出410条多态性谱带，平均每条引物扩增24．1条多态性谱带，10对AFLP引物共扩增出203条多态性谱带，平均每对引物组合扩增20．3条多态性谱带，2种标记均具有较高的分辨力，可以用于甘薯品种的遗传多样性分析。②甘薯主要育成品种的遗传相似系数为0．4877～0．7743，平均0．5640，表明中国甘薯主要育成品种的遗传多样性程度低，遗传相似程度高，遗传基础狭窄。通过UPGMA聚类分析，26份品种在遗传相似系数为0．55处可分为2类。③南方薯区主要育成品种的遗传多样性和遗传差异高于长江中下游薯区和北方薯区，北方薯区和长江中下游薯区主要育成品种之间的遗传差异较小，但与南方薯区主要育成品种之间的遗传差异较大。④1990年前甘薯主要育成品种的遗传相似程度高，1990年后育成品种的遗传相似程度依然很高，遗传多样性程度没有明显改变。因此，在未来甘薯遗传改良中，可以通过加强不同薯区育种亲本的交换，逐步改变目前中国育成品种遗传基础狭窄的局面。

甘露糖阳性选择系统在水稻遗传转化中的应用研究进展

甘露糖阳性选择系统是近几年应用较多的一种植物转基因安全筛选体系,该体系是以大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因pmi为筛选标记基因,D-甘露糖为筛选剂进行筛选。本文简要综述了甘露糖阳性选择系统在水稻转基因研究中的应用情况。

中国北方薯区甘薯育种核心亲本初步构建与利用

用ISSR和AFLP分子标记手段,分析中国北方薯区主要育种亲本的遗传差异,初步构建中国北方薯区甘薯育种核心亲本。根据育种亲本之间的遗传相似系数,结合综合农艺性状,分别构建以高淀粉、食用和综合性状为育种目标的核心亲本群,所构建的核心亲本群分别保持了供试品种多态性条带93.61%、94.12%和93.73%的遗传多样性。利用核心亲本群配制授粉组合,选择出后代入选率高的重点组合。

表达bar基因的抗除草剂转基因甘薯的获得

用农杆菌介导法将bar基因导入甘薯主栽品种徐薯18的胚性悬浮细胞中,获得了抗除草剂的转基因植株。农杆菌菌株EHA105携带的双元载体pCAMBIA3300上含有bar基因。来自于徐薯18胚性悬浮细胞的直径为0.7～1.3mm的280个胚性细胞团用于遗传转化。共培养3d后,首先在含有2mg/L2,4-D、100mg/LCarb的液体MS培养基中培养1周,然后将胚性细胞团转移到添加2mg/L2,4-D、100mg/LCarb和0.3mg/LPPT的固体MS培养基上进行选择培养。选择8周后,将获得的37个PPT抗性愈伤组织转移到添加1mg/LABA、100mg/LCarb和0.3mg/LPPT的固体MS培养基上,其中的34个愈伤组织诱导得到体细胞胚并发芽形成小植株,共获得了164株拟转基因植株。PCR分析表明,其中的123株为转基因植株。Southernblot和Northernblot分析表明,bar基因稳定整合到转基因植株的基因组中并正确表达。除草剂喷洒试验结果表明,转基因植株具有高度除草剂抗性。

紫外线(UV-B)照射对水稻产量及稻米蛋白质含量的影响

以抗紫外线UV B的日本粳稻品种Sasanishiki为材料 ,1999年和 2 0 0 0年在大田条件下 ,探讨了不同生育时期的UV B处理对水稻产量、糙米的大小及蛋白质含量的影响。结果表明 ,营养生长期 (移栽至幼穗分化 )、生殖生长期 (幼穗分化至抽穗 )及抽穗成熟期的UV B处理对Sasanishiki的产量及其构成因素的影响不显著 ;生殖生长期 (幼穗分化至抽穗 )与抽穗成熟期的UV B处理 ,使大粒米的比例减少 ;抽穗成熟期的UV B处理 ,增加了糙米中全N和贮藏蛋白的含量 ,其中主要是谷蛋白含量的增加 ,对水溶 盐溶蛋白和醇溶蛋白则影响较小。

甘薯块根总RNA的高效快速提取方法

甘薯块根富含多糖(主要为淀粉),提取RNA时,二者极易形成胶状沉淀而难以溶解,严重制约了甘薯块根RNA的提取产量和质量,从而影响后续分子生物学的研究。本研究以甘薯新品系农大辐14的块根为材料,采用异硫氰酸胍提取液结合10%(w/v)醋酸钾(KOAc)和1%(w/v)十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉淀多糖,在1.5h内完成块根总RNA的提取,平均产量为226μg/gFW,A260/A280值为1.95。提取的总RNA可成功进行单链cDNA的合成和反转录PCR。与已有相关报道相比,该方法在保证总RNA纯度的前提下,产量有所提高,所用时间仅为前人报道的1/3￣1/10。

甘薯高类胡萝卜素突变体农大辐14块根cDNA文库的构建及鉴定

为分析和克隆甘薯块根中类胡萝卜素生物合成的相关基因,以甘薯品种高系14号经^(60)Coγ射线慢照射结合茎尖培养获得的高类胡萝卜素含量突变体农大辐14的块根mRNA为材料,利用Clontech SMART cD- NA Library Construction Kit构建了其cDNA文库。初始文库的独立克隆为0.57×10~6pfu,滴度为4.9×10~6pfu/mL,重组率为88%,插入片段大小为0.3～2.5kb,大于0.4kb的克隆比例为70%,独立克隆数为理论值的3倍。扩增文库的滴度为5×10~9 pfu/mL。鉴定结果表明该文库可用于基因克隆与分析。