现代分子生物学技术在植物抗病毒育种中的作用

概述了近年来利用分子生物学技术进行抗病毒育种的几种主要方法及其研究进展 ,主要内容有外壳蛋白介导的抗性、利用缺损的复制酶、干扰运动蛋白、RNA介导的抗性、卫星RNA介导的抗性、反义RNA介导的抗性。

烟草原生质体在植物病毒研究中的应用

烟草原生质体是植物病毒研究中应用最早、最广泛的原生质材料,它对植物病毒的研究起了有很大的推动作用。笔者介绍了它在植物病毒研究中的一般应用程序,综述了它在植物病毒的侵染、复制、病毒与寄主互作、转基因抗病毒、病毒抑制物等各方面研究中的应用。

侵染桃树的病毒、类病毒和植原体病害研究进展

目前国内外报道的桃树病毒病３３ 种，其中已分离和鉴定的病原病毒１５ 种；类病毒３ 种；植原体病害４ 种。分别概述了这些病害的种类、分布、症状、检测。

植物病原真菌检测技术研究进展

传统的植物病害诊断方法往往根据病组织的症状、病原菌的特征以及研究人员的经验进行。但某些病原引起的症状相似,例如胡萝卜的细菌枯萎病与交链孢黑斑病、病毒与难养菌、不同病原物复合侵染造成的症状。有些病原菌不能进行纯培养,因而,单靠传统的分离培养、生物学测定等?..

利用棉花体内非致病镰刀菌防治棉花黄萎病

从棉花铃内部分离到两株镰刀菌 VL- 1和 VL - 2。平板对峙法表明 ,VL - 1和 VL - 2生长速度快 ,通过空间竞争和营养竞争有效地抑制黄萎菌的生长 ;并且能够抑制棉花黄萎菌微菌核的产生。温室生测结果表明 ,VL- 1和 VL- 2对棉花黄萎病的相对防效分别达到 87.9%和6 6 .4%。安全性测试证明 ,这两株镰刀菌在棉花整个生育过程中不造成棉花的伤害 ,是非致病性镰刀菌。田间试验结果显示 ,在棉田第一次黄萎病发病高峰时 ,VL- 1和 VL- 2对黄萎病的防效较理想 ,分别为 5 1 .5 %和 45 .4%。

紫花苜蓿菌核病病原鉴定及其主要生物学特性

菌株NJ1分离自苏南丘陵地区苜蓿菌核病株.通过病原菌致病性测定和形态学特征观察,结合病原菌核糖体转录间隔区(ITS)序列分析,将病原菌鉴定为三叶草核盘菌(Sclerotinia trifoliorum).对该病原菌生物学特性研究表明,菌株NJ1菌丝生长最适温度为18～23℃;最适pH值为5～9;病原菌对硫酸铵利用能力强,对L-半胱氨酸利用能力差;对甘露醇和乳糖利用最好,D-果糖和D-木糖利用较差,不能利用柠檬酸.

玉米矮花叶病毒HC-Pro在蚜虫传毒过程中的作用机制

本文用亲合印迹法测定了玉米矮花叶病毒 ( MDMV)与 MDMV HC- Pro,及二者与蚜虫蛋白之间的互作。结果表明 ,MDMV HC- Pro可以与 MDMV结合 ,也可以直接与 MDMV的介体——麦二叉蚜 ( Schizaphis graminum)中分子量约为 56k D的可溶性蛋白结合 ,而 MDMV不能与麦二叉蚜的可溶性蛋白直接结合。无论是 MDMV HC- Pro,还是 MDMV,都不能结合非介体灰飞虱 ( Laodelphaxstriatellus)的可溶性蛋白。酶联板模型的结果与此一致。上述结果说明 ,病毒不能直接与蚜虫口针中的病毒附着位点 ( VAS)结合 ;HC- Pro一端连接病毒 ,一端连接 VAS,在蚜虫传播 MDMV的过程中起桥梁作用。这是关于病毒 HC-

寡糖在植物防卫反应中的作用及其信号传导

寡糖是动植物生长发育过程中一类重要的信号，可以调节多种反应。寡糖可以影响豌豆茎切段的伸长及烟草外植体的形态发生，还可诱导乙烯产生和果实成熟。在植物抗病防卫反应中，寡糖可以诱导植保素的合成及蛋白酶抑制剂的合成，并可诱导对病毒的抗性。植物和真菌细胞壁降解时产生的寡糖片断均可作为信号诱导植物的抗病防卫反应。庚－β－葡聚糖和寡聚几丁质的结合蛋白已经得到鉴定。寡糖信号转导过程中有磷酸化和去磷酸化的发生，膜的过氧化，并涉及到离子流和活性氧的产生等。

潍坊萝卜红心病病原鉴定

本文用生物学、血清学和分子生物学证据证明,引起潍坊萝卜红心病的病原为芜菁花叶病毒 (Turnipmosaicvirus,TuMV)。该病毒可系统侵染曼陀罗、油菜、咸阳黄瓜、丝瓜、大白菜和普通烟,局部侵染苋色藜和假酸浆,不侵染豌豆。病毒粒体弯曲线状,长约 700nm,可由蚜虫传播,在红心病组织内形成风轮状和片层凝集状内含体,它在SDS 琼脂糖凝胶免疫双扩散试验中可与TuMV的抗血清形成明显的沉淀线。该病毒的CP基因共 867个核苷酸,编码 288个氨基酸,分子量为32 98kD。该序列与国内外 20个TuMV分离物的CP氨基酸序列比较结果表明,这些分离物可以分为 5组,其中引起萝卜红心病的病毒与日本的H1J、KYD81J、意大利的ITA7同属一组。

玉米矮花叶病毒种子传毒率检测

玉米矮花叶病毒种子传毒率检测马占鸿李怀方裘维蕃（中国农业大学植病系病毒室，北京１０００９４）ＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＭＡＩＺＥＤＷＡＲＦＭＯＳＡＩＣＶＩＲＵＳＩＮＭＡＩＺＥＳＥＥＤＭａＺｈａｎｈｏｎｇＬｉＨｕａｉｆａｎｇＱｉｕＷｅｉｆａｎ（Ｄｅｐａｒ...

生物农药在草坪病害防治中的应用研究

以3种草坪致病真菌为试材,采用室内生长速率法测定了木霉菌Trichodermaspp与三者互作关系。结果表明,木霉菌与3种致病真菌间均存在明显的互作关系,其互作类型与作用强度各不相同:木霉菌与立枯丝核菌Rhizoctoniasolani间存在拮抗作用,但抑制强度不大;木霉菌与腐霉菌Pythiumaphanidermatum不仅存在拮抗作用,且对腐霉菌的抑制强度较大;木霉菌与镰刀菌Fuariumspp 间存在明显的协生作用。

几种蚜虫对MDMV传毒效率及其口针中病毒附着位点(VAS)的免疫荧光标记

本研究在测定了５种蚜虫对玉米矮花叶病毒（ＭＤＭＶ）传播效率的基础上，采用免疫荧光（ＦＩＴＣ）标记方法，观察到蚜虫口针中ＭＤＭＶ附着位点（ＶＡＳ）的存在。结果发现不同蚜虫之间的传毒效率及ＶＡＳ有一定的差异。其中，以麦二叉蚜（Ｓｃｈｉｚａｐｈｉｓｇｒａｍｉｎｕｍ）的传毒效率最高，达６６．８％。并且其ＶＡＳ也最明显，位于口针末端约５０μｍ处。通过试验发现，尽管在ＶＡＳ存在的情况下，用提纯的不含ＨＣ的ＭＤＭＶ进行蚜虫传毒试验，其传毒率为零。只有当ＨＣ与ＭＤＭＶ共同存在的情况下才可有效传播。至于蚜虫是如何释放病毒的还不清楚。根据试验结果初步认为，蚜虫对ＭＤＭＶ的传播是一个“识别—吸附—释放”的过程。

苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备

【目的】为了制备苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的抗血清,【方法】将ACLSV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV和pEHISEGFPTEV,转化大肠杆菌Rosetta,切胶回收诱导表达的CP融合蛋白免疫新西兰长耳兔,制备ACLSV的抗血清。【结果】利用原核表达载体pEHISTEV和pE-HISEGFPTEV在Rosetta中分别表达出了分子质量为25 ku和55 ku的ACLSV CP融合蛋白。切胶回收25 ku的融合蛋白免疫新西兰长耳兔。经ELISA测定,所制备的抗血清效价为1∶1 024,Western blot及组织印迹分析表明抗血清能与ACLSV CP发生特异性的免疫反应。【结论】该血清特异性强,效价高,可用于苹果叶片、果实和枝条等样品中A-CLSV的检测。

梨黑星病菌寄生部位及致病作用研究

组织透明及扫描电镜研究结果表明:梨黑星病菌在叶片上主要寄生于表皮细胞和叶脉薄壁组织细胞的表面,沿细胞表面扩展。病原菌并非只在角质层与表皮细胞间生长,而且在表皮细胞和叶脉薄壁组织细胞的细胞间寄生。在大量的观察中,没有发现侵入到细胞内菌丝或菌丝变态结构。梨黑星病菌不寄生叶肉细胞,但能导致叶肉细胞病变。由于黑星病菌的寄生性既不同于专性寄生,也不同于杀生寄生,才使梨黑星病的潜育期和产孢期都长于这两类真菌病害。这是认识和研究梨黑星病发病特点和流行规律的基础。

我国棉花黄萎病菌群体遗传分析研究初报

我国棉花黄萎病菌群体遗传分析研究初报ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＧｅｎｅｔｉｃＡｎａｌｙｓｉｓｏｎＣｏｔｏｎＶｅｒｔｉｃｉｌｉｕｍＰａｔｈｏｇｅｎ黄萎病菌是严重威胁我国棉花生产的主要病害，系统侵染、抗逆性强，极难防治。棉花黄萎病菌的分子...

氮素形态对西洋参黑斑病的影响

采用砂培法试验不同氮素形态对西洋参黑斑病的影响结果表明，以ＮＯ３Ｎ为氮源时，黑斑病发病轻，而以ＮＨ４＋Ｎ为氮源时发病重。

利用PCR标记对水稻稻瘟病菌适合度的测定(英文)

本文利用２个对水稻抗病基因 Ｐｉ１（ｔ）有致病力的突变菌株和它们的各自原始菌株共同接种高度感病的品种ＣＯ３９。第一轮接种后，采集病叶并收集分生孢子用于下一轮接种，同时分离单孢菌株。经过３ 或４ 轮接种后，共分离９０５个单孢菌株。然后，利用稻瘟病菌的一段倒位重复序列 Ｐｏｔ２所设计的一对引物，Ｐｏｔ２１和Ｐｏｔ２２，直接进行 ＤＮＡ 聚合酶链式反应（ＰＣＲ），检测各菌株在群体中所占比例，结果表明，２个突变体均比各自的原始菌株有更高的适合度，突变体 ＲＣ１（４＋ ５）１４１与原始菌株９２４８６组合中，前者由第１轮接种循环的７１％ 上升到第４轮的１００％ ；突变体 ＭＣ１（３＋ ４）５７９与原始菌株１０１７２１１组合中，前者在各代中均比原始菌多一倍。２个突变体适合度也相差很大，经过３代接种循环后， Ｍ Ｃ１（３＋ ４）５７９则逐渐消失，ＲＣ１（４＋ ５）１４１ 完全占优势，达到１００％ 。突变体 ＲＣ１（４＋ ５）１４１的产孢能力是其它菌株的２～３倍，这表明， 稻瘟病菌菌株在自然条件下成为优势群体，除了致病力发生突变外，

甜菜黑色焦枯病毒经甘蓝油壶菌传播的研究

用甜菜黑色焦枯病毒(Beet Black Scorch Virus,BBSV) 直接接种甜菜根,BBSV轻度侵染甜菜;而将BBSV与甘蓝油壶菌( Olpidium brassicae) 游动孢子体外混合接种甜菜根,BBSV 则严重侵染。结果表明,BBSV 经由O.brassicae 进行传播,传播方式属游动孢子体表带毒,另外,BBSV 也可进行少量的机械传播。国内首次报道油壶菌传播植物病毒。

南京毛刺线虫对山定子的直接致病性研究

北京南口农场山定子砧苹果树受线虫侵害严重。田间树势调查结果表明:病树长势衰退,产量降低,品质下降;补植的幼树表现出再植病症状。田间根系症状调查结果表明:病树根系生长异常,表现出典型的短粗根病症状,即受害幼根不呈延伸生长,而是在生长中不断分枝,以致最后形成须状丛簇根,每年只在新根旺长期长出一小段具有吸收功能的白色、毛笔尖状的新根。盆栽幼苗接种试验表明:南京毛刺线虫的侵染严重影响了山定子幼苗的形态建成,且使根系表现出短粗根病症状,从而证明南京毛刺线虫(Trichodorus nanjingensis Liu＆Chen)是导致该场苹果树势衰退、再植病和短粗根病的主要病原。