鸡传染性法氏囊病毒强毒株(vvIBDV)VP_2高变区的替换

采用双融合PCR(doublefusionPCR)的方法将鸡传染性法氏囊病毒 (IBDV)的强毒株的VP2 片段替换为疫苗株的相应片段以获得重组的病毒粒子。首先将被替换片段两侧的片段从强毒株的载体上扩增下来 ,并将目的片段从疫苗株序列的载体上扩增下来。然后用融合PCR的方法将目的片段与其上游片段融合起来 ,回收产物并将其与下游片段融合起来 ,最终得到了替换后的新序列。双融合PCR提供了一种快速、精确和不受酶切位点限制的片段替换方法。