应用原位PCR对鸡传染性法氏囊病病毒早期侵染过程的研究

人工接种 35日龄SPF鸡传染性法氏囊病病毒 ,间隔不同时间采集法氏囊、胸腺、脾、盲肠扁桃体、肾、肝和腿肌进行了原位PCR检测 ,同时观察各组织病理变化。结果无论是H毒株还是Ts毒株 ,接种后 4h肝、肾、脾等组织中即出现明显的阳性信号 ,Ts毒株 4hPI从胸腺、盲肠扁桃体、腿肌等组织中也检出了病毒基因序列。接种H毒株和Ts毒株后 2 8h和 40h ,法氏囊淋巴细胞开始出现变性、坏死。在阳性信号检出的时间上 ,法氏囊较肝、肾、脾等组织是滞后的。H毒株较Ts毒株在早期对法氏囊具有更强的侵染能力。

狂犬病病毒CTN株糖蛋白基因的克隆与序列分析

克隆分离自我国狂犬病病毒固定毒CTN株糖蛋白基因,分析它的主要功能位点表明它具有319位的糖基化位点和完整的抗原位点,说明其具有用作疫苗株的潜力。并与国内外疫苗株、我国的3株街毒株、CVS株和Mokola毒株进行了同源性分析,表明我国疫苗株和CVS株与我国的街毒株相距最远,而CTN株与我国的3株街毒株相距最近,同属一个分支。

一种独特的疱疹病毒—鸡传染性喉气管炎病毒

作者对鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)从以下4个方面进行了综述:①ILTV宿主的高度特异性;②病毒感染细胞的特殊途径;③病毒基因组内的基因容量和排列;④ILTV与其它疱疹病毒同源序列比较而推测出它们之间的进化关系。上述几方面的论述都表明ILTV具有区别于一般疱疹病毒的独特的特点。

鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白G对病毒吸附、侵入、复制和细胞间接合传染的影响

利用分离纯化的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)天然糖蛋白G及其制备的抗体处理,测定对ILT病毒(E3毒株和Zhonghai毒株)吸附、侵入、复制和病毒从细胞到细胞直接感染的影响.结果证明,ILTV天然糖蛋白G及抗糖蛋白G抗体对病毒的吸附和侵入无明显影响.添加糖蛋白G对病毒从CEL细胞到CEL细胞直接感染和病毒在CEL细胞上的复制的影响不明显,但添加抗糖蛋白G大鼠IgG却显著抑制病毒的复制,表现为噬斑变小,病毒复制曲线降低.激光共聚焦扫描显微镜观察结果显示ILTV糖蛋白G存在于鸡原代肝细胞核外周质及细胞膜上,并且糖蛋白G聚集在细胞融合部位.推测糖蛋白G可能促进了细胞的融合或参与病毒从细胞到细胞的直接感染,从而影响病毒复制和噬斑的形成.

传染性喉气管炎病毒糖蛋白G基因的原核表达、细胞定位及功能研究

克隆测定了传染性喉气管炎病毒(ILTV)北京E3和Zhonghai毒株的糖蛋白G基因(gG)序列,并与多种动物的Ⅰ型α-疱疹病毒gG基因序列作了比对.通过克隆gG基因至原核表达载体pET30a(+)构建pET30a-gG质粒,IPTG诱导表达含pET30a-gG重组质粒的阳性宿主菌后,分离纯化得到分子量约35kD的His-GG融合蛋白.利用该融合蛋白制备的纯化的抗His-GG大鼠多抗血清,观测ILTV糖蛋白G的在细胞上的分布,发现糖蛋白G主要存在于宿主细胞的细胞核外周及细胞膜上,在散在细胞内的分布较为分散,而在融合细胞的结合部位分布较为集中.利用抗体中和病毒糖蛋白G的实验结果表明,糖蛋白G可能参与病毒从细胞到细胞的直接感染(CTCS),从而影响病毒复制和噬斑的形成.