转座子挽救法对苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关基因的定位

用含Tn5转座子的质粒pRL10 6 3a诱变苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti) 0 4 2BM ,得到盐敏感突变株0 4 2BML 2。采用转座子挽救法对Tn5插入位点两边的序列进行克隆与测序 ,获得了 1179bp的转座子插入位点侧翼DNA序列。在GenBank中进行序列同源性和基因定位分析 ,结果表明 :转座子插入在一个功能未知的基因内部 ,此基因长 6 2 70bp。研究证明 :该基因与 0 4 2BM的耐盐性有关 ,并定名为rtsC。氨基酸疏水性分析表明 ,在RtsC蛋白的N端有两个跨膜区 ,该蛋白与细菌趋化性相关蛋白的功能域有同源性。并对RtsC蛋白在苜蓿中华根瘤菌0 4