酪蛋白酶解产物-锌络合物的结构鉴定及体外消化特性分析

探讨酪蛋白酶解产物与锌盐的络合特性及络合物的消化稳定性。采用红外光谱和紫外-可见光谱研究酪蛋白酶解产物-锌络合物的结构特性,利用体外模拟消化实验对比分析酪蛋白酶解产物-锌络合物和无机锌(ZnSO4·7H2O)的消化特性。结果表明,酪蛋白酶解产物可以与二价锌离子发生络合反应形成酪蛋白酶解产物-锌络合物,此络合物在模拟肠液中的溶解性优于ZnSO4·7H2O。结论:酪蛋白酶解产物具有络合Zn2+的特性,且络合物在模拟肠液中的消化稳定性优于ZnSO4·7H2O。

响应面法优化植物乳杆菌LPL-1产细菌素发酵条件及细菌素理化性质分析

为提高新型植物乳杆菌LPL-1所产细菌素(植物乳杆菌素LPL-1)的产量,以单核细胞性李斯特菌为指示菌,相对抑菌效价为响应值,通过响应面法对发酵条件进行优化,确定了最优发酵条件。利用单因素试验与Plackett-Burman试验,确定主要影响因素为温度、发酵时间与初始pH值,通过最陡爬坡试验与Box-Behnken响应面试验,确定最优发酵条件为发酵温度31℃、培养基初始pH 6.40、发酵时间32 h、接种量0.5%、装液量60%,在此条件下细菌素效价(674.29 AU/mL)比优化前(292.02 AU/mL)提高了1.31倍。通过对细菌素理化性质的分析,证明了细菌素具有热稳定性(100℃,30 min)、酸碱稳定性(pH 2～10)、蛋白酶敏感性与抑菌性,同时利用二硫键变性剂对细菌素结构中的二硫键进行变性处理,证明二硫键对其抑菌特性的重要性。因此,通过细菌素发酵条件的优化与理化性质的分析,为菌种与细菌素的产业化生产与应用提供了理论支持。

类黄酮化合物的微生物代谢工程研究进展

介绍类黄酮的结构和功能,重点阐述国内外研究者利用基因工程技术和代谢工程学技术将类黄酮合成途径构建到微生物中,发酵生产类黄酮物质的研究进展,旨在为今后进一步研究植物次级代谢途径在微生物中的构建提供参考。

大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的重组表达及活性鉴定

利用基因重组技术,克隆了大豆(Glycinemax(L.)Merr.)的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase,PAL)全基因,构建pET-GMPAL工程表达质粒,在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达,并利用细胞裂解液得到的粗酶液转化L-苯丙氨酸生成肉桂酸。通过8%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,获得了分子量在77.9kD的一条蛋白质特异表达带,特异蛋白质表达量达到总蛋白质含量的8%左右。通过初步发酵,获到具有PAL活性的粗酶液裂解液,粗酶的比活力达到211.7μmol/gpro·min(3529μkat/kg),高于红酵母PAL和欧芹重组PAL表达的比活力。结果表明克隆重组的大豆PAL基因通过表达质粒pET-GMPAL在E.coli中能高效地表达为有催化功能的高活力酶。

牦牛乳酪蛋白酶解产物清除DPPH自由基活性分析

以牦牛(Bos grunniens)乳酪蛋白为原料,用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶制备酪蛋白酶解产物,分别测定其DPPH自由基清除活力,发现碱性蛋白酶酶解产物的清除活力显著高于其他酶解产物(p<0.05)。测定不同水解时间点酪蛋白酶解产物的DPPH自由基清除活力,发现第7h酶解产物的清除活力显著高于其它水解时间点的样品(p<0.05)。还分析了碱性蛋白酶7h酶解产物的理化指标,发现其水解度、三氯乙酸氮溶解指数和蛋白质回收率均较高,表明此时大部分酪蛋白已降解,且酶解产物中短肽段的含量较高,用碱性蛋白酶制备具有DPPH自由基清除能力的酪蛋白酶解产物时得率较高,而其氨基氮含量相对较低,适宜作为保健食品功能性基料。

不同因素对酪蛋白酶解产物螯合亚铁盐能力的影响

本研究以干酪素酪蛋白为原料,对影响酪蛋白酶解产物螯合Fe2+反应的因素进行了初步研究,为获得高效生物补铁剂以预防缺铁性贫血提供理论依据。研究表明,FeSO4与酪蛋白酶解产物的螯合能力显著高于(NH4)2Fe(SO4)2或FeCl2与酪蛋白酶解产物的螯合能力(p<0.05);不同酶解时间获得的酪蛋白酶解产物与FeSO4的螯合能力不同,7h时获得的酶解产物螯合FeSO4的能力最强;当酪蛋白酶解产物与FeSO4共同作用10min、硫酸亚铁与酪蛋白酶解产物的质量比为1:2、反应体系pH为6.0,反应温度为40℃时螯合效果较好。

乳脂乳球菌CH5生长特性的研究

本文以农家干酪生产使用的乳脂乳球菌(Lactococcus lactis ssp.cremoris)为研究对象,从细菌总数(CFU),pH值和滴定酸度三个指标对本实验室分离得到的乳脂乳球菌CH5在脱脂乳中的生长特性和4℃下保存过程中的活力变化进行了研究。结果表明乳脂乳球菌CH5在脱脂乳中的延滞期短,能较快进入对数生长期,6h时进入稳定期,活菌数达109CFU/ml,Tdg约为1.03h,Tda约为2.87h,这表明乳脂乳球菌CH5细胞增长速度快于产酸速率。乳脂乳球菌CH5在4℃下保存时,稳定性较好,前11d活菌数和最大产酸速率(μacid)基本保持不变,此后逐渐下降,表明CH5发酵剂在前11d的活力比较稳定,可以确定生产农家干酪的CH5母发酵剂的最佳传代时间为11d,冷却保藏第3d为最佳生产使用时间。

山羊初乳成分及其免疫球蛋白构成变化的研究

动物初乳对其后代健康的作用已经得到了广泛的证实,其对人类健康的影响也受到了越来越多的重视。本研究探讨了阿尔卑斯山羊产后一周内乳成分和其中免疫球蛋白(Ig)含量的变化。结果表明:产后48h内山羊奶的蛋白质、总固形物和免疫球蛋白含量均快速下降;脂肪含量在前三次的初乳中逐渐升高,随后又缓慢下降;乳糖含量保持相对稳定于4%～5%;经产山羊前三次初乳的蛋白含量分别达到了16.5%、10.7%和6.8%,显著地高于初产山羊前三次初乳的蛋白含量(7.0%、4.8%和4.1%);经产山羊前两次初乳的IgG含量达到了59.9mg/ml和34.7mg/ml,IgM含量达到了6.14mg/ml和2.37mg/ml,显著地高于初产山羊前两次初乳的IgG含量(18.1mg/ml和13.9mg/ml)和IgM含量(1.95mg/ml和0.98mg/ml);经产和初产山羊初乳的IgA含量无显著差异。

不同因素对酶诱导乳清蛋白凝胶性质的影响及其结构研究

采用蛋白酶诱导乳清浓缩蛋白(WPC)成胶,对影响凝胶性质的乳清浓缩蛋白质量浓度、酶与底物比(E/S)、pH值、温度以及钙离子浓度分别进行研究。结果表明:乳清蛋白质量浓度、反应pH值、温度和钙离子浓度均会不同程度地影响乳清蛋白凝胶的质构性质和保水性,且当乳清蛋白质量浓度为10g/100mL,E/S为0.5%,pH值为7.0,酶解温度为50℃,钙离子浓度为2.5mmol/L时制得的乳清蛋白凝胶具有类似于脂肪的质地和口感,具有很好的模拟脂肪特性。透射电镜分析表明此凝胶为一种结构较为松散的颗粒聚集状凝胶。

碱性蛋白酶限制性酶解乳清浓缩蛋白成胶特性的研究

研究了利用碱性蛋白酶限制性酶解乳清蛋白对其凝胶特性、成胶温度、凝胶粒径和蛋白组分水解情况的影响，结果表明，酶解可以提高乳清蛋白的凝胶特性，在酶解70min时达到最大值，此时乳清蛋白的水解度为7．22％，当酶解时间超过70min后随着水解时间的延长凝胶特性略有下降；各水解时间点乳清蛋白成胶温度均为80℃；酶解后乳清蛋白凝胶的粒径值下降了90％以上，且酶解30min后形成的凝胶粒径值都在50um以内；在碱性蛋白酶的限制性酶解作用下，仅部分β-乳球蛋白和很少部分牛血清白蛋白被酶解，而大部分α-乳白蛋白被酶解。

不同因素对酪蛋白酶解产物与锌盐螯合效果的影响

本研究采用酶解法制得酪蛋白酶解产物,分析了不同锌源、酶解产物浓度、酶解产物与Zn2+质量比、反应体系pH值、反应温度、螯合时间等因素对酶解产物与锌盐螯合效果的影响,确定了酪蛋白酶解产物与Zn2+螯合的适宜反应条件。研究表明,ZnSO4·7H2O与酪蛋白酶解产物的螯合能力显著高于醋酸锌或氯化锌与酪蛋白酶解产物的螯合能力(p<0.05)。当酶解产物浓度为0.04g/ml、酶解产物与Zn2+质量比为4:1、反应pH值为6.0、反应温度为40℃、螯合时间为20min时螯合效果较好。

乳源酪蛋白巨肽对大鼠前脂肪细胞增殖与脂肪积聚的影响

肥胖严重威胁着人类的健康,它不仅影响整个机体的正常生理功能,还会增加心血管疾病和Ⅱ型糖尿病等并发症[1]的发生率。乳源酪蛋白肽（CMP）是存在于乳清中的一种生物活性肽[2],